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胚胎干细胞如何分离(胚胎干细胞可以分化成哪些细胞)

  • 作者: 郭允翊
  • 来源: 投稿
  • 2024-12-11


1、胚胎干细胞如何分离

胚胎干细胞的分离步骤:

1. 取卵:

从女性卵巢中提取成熟的卵细胞。

2. 受精和培养:

使用体外受精 (IVF) 方法,将精子与卵细胞结合受精。

将受精卵培养几天,使之分裂形成胚泡(由内部细胞团和滋养层组成)。

3. 胚泡内细胞团分离:

使用激光或显微操作技术,从胚泡中分离出内部细胞团(ICM)。ICM 包含胚胎干细胞。

4. 离心培养:

将 ICM 在含有营养丰富的培养基中离心培养。

培养过程中,ICM 将形成称为胚胎干细胞系的胚胎干细胞群体。

具体步骤:

机械分离:

使用玻璃或塑料针头,从胚泡中吸出 ICM。

激光消融:

使用激光烧蚀技术,除去滋养层,留下 ICM。

显微操作:

使用显微镜和微细工具,小心地将 ICM 从滋养层中剥离出来。

培养和筛选:

分离后的 ICM 培养在含有生长因子和抑制剂的特定培养基中。

培养过程中会筛选和选择生长良好的胚胎干细胞群体。

经过几个培养周期后,胚胎干细胞系能够自我更新和分化成各种细胞类型。

2、胚胎干细胞可以分化成哪些细胞

胚胎干细胞具有分化为所有三胚层细胞类型的潜能:

内胚层:形成呼吸系统、消化系统和泌尿生殖系统的细胞

中胚层:形成肌肉、骨骼、软骨、血液和心脏的细胞

外胚层:形成皮肤、神经系统、眼睛和内耳的细胞

3、胚胎干细胞是由什么分离出来的

早期胚胎

4、胚胎干细胞的分离基本步骤

胚胎干细胞分离的基本步骤

1. 取出胚胎

使用 IVF(体外受精)技术收集胚胎。

从受精卵培养 57 天的胚泡中采集内部细胞团 (ICM)。

2. 分离 ICM

用胰蛋白酶处理胚泡,分离 ICM。

使用无酶技术(如激光剥离术)可以更温和地分离 ICM。

3. 单个细胞培养

将 ICM 分解成单个细胞。

将细胞接种到培养基中,培养基含有抑制分化并促进干细胞自我更新的生长因子。

4. 形成胚胎体(EBs)

单个细胞会聚集并形成三维结构,称为胚胎体 (EBs)。

EBs 模拟早期胚胎发育,促进干细胞的自我更新和多能性。

5. 胚胎体贴壁

EBs 被贴附在培养皿或基质上。

贴壁使 EBs 分化成不同的细胞类型,包括干细胞。

6. 挑选干细胞菌落

通过特征,如形态、标志物表达或 colony forming unit(CFU)测定,识别胚胎干细胞菌落。

挑选出具有期望特性的菌落进行进一步培养。

7. 扩增和维持

选择的菌落被扩增和维持在适当的培养基中。

定期更换培养基和传代细胞以保持干细胞的质量和多能性。

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