大鼠的表皮干细胞购买（大鼠 🦅 内皮祖细胞提取）
- 作者: 张泽夕
- 来源: 投稿
- 2025-08-28
1、大鼠的表皮干细胞 🌾 购买
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2、大 🌺 鼠内皮祖细胞提 🌷 取
大鼠内皮祖 🦆 细胞 🐘 提取 🌻
材料：成年雄 🐝 性大鼠 🐧
1x PBS缓冲液 （含 🦍 EDTA）
0.1% 胶原酶 🐦 IV
胰 🐶 蛋 🐱 白酶
胎牛 💮 血清（FBS）
内皮祖细 🕷 胞 💐 培养基（含 ☘ 生长因子）
70% 乙 🐛 醇 🐝
细 🐱 胞 🪴 刮板
50 ml 离 🦄 心管
细胞培 🐘 养 🐛 皿
显微镜步骤：
1. 大 🌵 鼠麻醉和处死 🌹
将大 🦢 鼠腹腔注 🐠 射麻醉药，如戊巴比妥钠 🐅 。
一 🐦 旦麻醉到位，通过心内 🕷 穿刺处死大鼠。
2. 腹主动 🌾 脉采 🌷 集
用 70% 乙醇消毒腹 🦢 腔。
打开腹 🦅 腔，定位腹 🐬 主动脉。
小 🐋 心切开 🐬 腹 🌹 主动脉并将其移至 1x PBS 中。
3. 去除血管 🐶 外膜
在培养皿 🦆 中用镊子小 🌹 心地剥离血管外膜。
用 1x PBS 冲 ☘ 洗 🐒 血 🐛 管。
4. 消 🐴 化 🐱 血 ☘ 管
将血 🦟 管转移到含 🐡 有 0.1% 胶原酶 IV 的 50 ml 离心管中。
在 37°C 下孵育 1 小时 🌿 ，同 🌻 时 🌴 轻轻摇晃。
5. 终止消 🐧 化
将离心管中的胰 🌻 蛋白酶 🦢 加入到最终浓度为 0.1%（v/v）。
继续在 37°C 下再 🍁 孵育 15 分 🐝 钟 🐘 ，同时轻轻摇晃。
6. 细 🦋 胞 🐬 分离和筛 🐒 选
将消化后的细胞悬液转移到 1x PBS 中，并通过细胞过 70 μm 滤器过滤 🐦 。
将悬液离 🐞 心 10 分 🌷 钟，1500 rpm，4°C。
除去上清液，加入内皮祖细 🍀 胞培 🕸 养基重悬细 💮 胞。
将 🐶 细胞接种到细胞培养皿中，置于含 5% CO2 的培养 37°C 箱中。
7. 培 🐬 养和鉴定
更换培养 🌴 基 🌼 每 23 天。
在 🕊 第 710 天，细胞应 🐴 达到 8090% 的汇合度。
使用内皮细胞特异性标志物 ☘ ，例如 CD31 或 vWF，对细胞进行鉴定。
提示：使用健 🌲 康、未妊娠的大鼠。
小心处理血管以防止损 🦁 伤内膜。
严 💮 格按照时间 🌸 和温度要求进行消化。
使用经 🌴 过 🐴 质量 🌼 控制的酶和试剂。
使用无菌 🌵 技术 🐬 以避免污染 🦈 。
3、大鼠骨髓 🦆 干细胞
大鼠骨髓 🕸 干 🌲 细胞 🐈 (BMSCs)
定义：大鼠骨髓干细胞 (BMSCs) 是从大鼠骨髓中分离出的多能干细胞。它们 🐬 具有自我更新的能力，并能分，化为各种细胞类型包括：
成骨细胞骨 🐺 细胞 ()
软骨细 🌵 胞
脂 🐼 肪 🐬 细胞
神 🕸 经 🐎 细胞 🐯
来源：BMSCs 从大鼠股骨或胫骨中的骨 🦉 髓中提取。
特征：表面标志物 🐼 ：CD29、CD44、CD73、CD90 和 🦟 CD105
形态 🌷 ：纺锤形或星形 🐺
增殖能 🐳 力：高增殖能力和自我更新能力 🌳
分化潜能：朝骨、软骨、脂肪和神经细胞系分化 🐞
应用：BMSCs 在以下领 🐱 域具有广泛的应用：
骨修复：促进骨再生，治疗骨缺损和 🐵 骨折。
软骨再 🍁 生：修复关节软骨损伤。
脂肪移 🐴 植：增加脂肪组织，用于美容或修复用途。
神经再生：治 🐒 疗 🦋 神经损伤 🍀 和疾病。
癌症治疗：作为 🐧 一种潜在的癌症 🐛 治疗策略，将药物或基因传递到肿瘤部位。
研究意 🍁 义 🌼 ：
BMSCs 是发育 🦁 和再生生物学 🌺 中重要的 🐯 研究工具。它们有助于理解：
干细胞分化和自 🐛 我更新机制
组织修 🐴 复和再生过 🌲 程
疾病 🐎 中的 🕸 干细胞功能
注意：BMSCs 的临床应用仍在研究 🦅 阶段，需要进一步的研究来确定其安全性和有 💮 效性。
4、大鼠 🐬 脂肪干 🕊 细胞
大 🍀 鼠脂 🍀 肪干 🦄 细胞
大鼠脂肪干细胞（rASCs）是从大鼠脂肪组织中分离得到的间充质干 🐧 细胞。它们具有自我更 🌿 新和向多种细胞类型分化的能力，包括成骨细胞、软。骨细胞和脂肪细胞
来源rASCs 主要从大鼠腹部或内脏脂肪组 🦍 织中获取。可以使用机械 🐬 或酶促方 ☘ 法提取脂肪组织，然。后对其进行消化以释放干细胞
表征rASCs 通常通过以下标志物进行表征 🪴 ：
阳性 🦈 标 🌼 志物 💐 ： CD29、CD44、CD90、CD105、CD166
阴性标 🦉 志物： CD31、CD34、CD45
分化潜能rASCs 具有分 🐡 化为多种细胞 🕊 类型的潜能 🦁 ，包括：
成骨细胞： 形成骨组 🌵 织
软骨细胞： 形成软骨组 🌸 织
脂肪细胞： 储存脂肪 🐕
神经元： 传递神经 🍀 信号 🌷
血管内皮 💐 细胞： 形成血管
应用rASCs 在研究和治疗应 🦁 用 🌷 中具 🐟 有潜力，包括：
组织工程： 修复受 🍁 损组织，例如骨头和 🐘 软骨
再生医学： 治疗疾病 🌼 ，例如心脏病和神 🦍 经退行 🐎 性疾病
药物测试： 研究 🕸 新药和治疗的效果
优点容易获 🍁 取和 🌿 大规模培养
分化潜力广泛 🐘
安 🪴 全 🐧 且无免疫原性
缺点分化 🌾 效率可能较 🐵 低
存 🌴 在衰老和 🐅 癌变的 🐒 风险
结论大鼠脂肪干细胞是具有多种应用潜力的有前途 🦁 的细胞类型。它。们的分化能力和易用性使其成为再生医学和组织工程研究的宝贵工具
