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🐝 干细胞培养因子教学(干细胞培养 🐋 因子教学ppt)

  • 作者: 朱颜可
  • 来源: 投稿
  • 2025-08-14


1、干 🦢 细胞培养因子教学

干细胞培养因 🐦 子教学

干细胞培养因子在维 🌴 持干细胞自我更新和多能性方面至关重 🐟 要。

培养因子通过结 🐴 合到细胞表 🌿 面受体或通过内吞 🦋 作用激活下游信号通路,调节细胞行为。

主要培 🕸 养因 🌲

FGF2 (成纤 🌳 维细 🌲 胞生长 🦋 因子 2)

促进 🌷 干细胞增殖和自我更新。

通过激活 🐟 激 MAP 酶和激酶 PI3 信 🐧 号通路发挥作用。

EGF (表 🌾 生长因子)

与 FGF2 共同作用,促 🍀 进干细胞增殖和分化。

通过激活 EGFR (表皮生 🌲 🐵 因子受体) 信号通路发挥作用。

LIF (白 🐱 细胞抑 🌾 制因子)

维持胚胎干细胞自我更 🦋 新和抑制分化。

🐱 过激活 🦉 JAKSTAT 信号通路发挥 🌹 作用。

TGFβ (转化 🌸 生长因子 β)

🦅 节干细胞分化 🐝 和归巢。

通过激 🐺 活 Smad 信号通路发挥作用。

BMP4 (骨形态发生 💐 🕸 🐘 4)

诱导 🕸 干细胞分化为中胚层细胞谱系

通过激活 BMP 信 🐒 号通 🐬 路发挥作用 🦢

Wnt3a

🌷 🐧 干细胞自我更新和抑制分化。

通过激活 βcatenin 信号通路发挥作用 🦄

培养 🦉 🐘 💐 配方

培养 🕸 因子配方 🐞 因干细胞类型和培养条件而异。

通常使用无血清培养基,其中包含基本营养物质和特定的培养因 🕊 🌴

培养因子 🐝 🐱

根据培养基体积添加 🐬 培养 🐳 🌺 子。

通常 💮 使 🌴 用 10100 ng/ml 的培 🕷 养因子浓度。

培养因子储存 🐺

🐝 养因子应保存在 20°C 或 🦟 80°C。

冻融循 🌳 环应尽可能减 🦊 少。

质量控制

定期监测培养因子 🐵 的活性,以确 🦄 保其 🌲 质量。

可使 🌳 用生物活性测 🕷 定或 Western 印迹 🌷 来评估活性。

常见问题

Q:培养 🦄 因子何 🐬 时添加?

🕷 养因子通常在传代或重新悬浮干细胞 🌲 后立即添加。

Q:培 🐈 养因子过量 🍁 会发生什 🌼 么?

培养因子 🐅 过量可 🌲 能会导致干细胞分化或死亡 🌻

Q:如何 🐶 🌳 化培养因子 🐝 配方?

通过尝试不同的 🦅 培养 🐒 因子组合和浓度来优化配方,满足特定的干细胞培养要求。

2、干 🌾 细胞培养因子 🦍 教学ppt

🐴 细胞培 🦄 养因子 🐋 教学 PPT

幻灯片 🦊 1:标题 🌷

干细胞培养因子:定义和作用 🌿

幻灯 🐋 片 2:定 🌳

定义干细胞培养因子:支持干细胞自我更 🦊 新和增殖的蛋白质、多肽或其他小分子

强调培养因 🐞 子的必需性,以维持干细胞的干性 🦊

🐟 🐼 片 3:作 🌹

🦈 节细胞周期、凋 🐡 亡和分化

促进 DNA 合成 🐠 和细胞增殖

抑制分 🌸 🦍 和保 🐈 持干性

幻灯 🐳 片 4:分类

生长因子:刺激细胞增殖 🕷 ,如 EGF、FGF 和 IGF

细胞因子 🐬 :调节免疫功能和细胞相互 🕊 作用,如和 IL、TNF IFN

激素:调节细胞代谢和增殖,如皮质 🌲 醇和甲状腺激素

幻灯片 🐞 5:选择培养因子

🐅 虑细胞类型、培养阶段和期望的结果

参考文 🐋 献和供应商建议

优化浓 🐳 度和组合

幻灯 🦉 片 6:培养因 🌲 子制备

商业来源:纯 🐶 化和浓缩,易于使用

🐺 内来源:从组织、血清或血浆中提取

重组来 🐘 源:基因工程产生 🌼 ,高度特异性

幻灯片 7:添加 🦊 培养 🪴 因子

定期补充新鲜培 🐞 养因子

避免过度或不足添加 🌴

优化添加 🐡 时间和频率

幻灯片 🍀 8:培养因子 🌷 储存

冷冻储 🦉 存,避免 🦍 反复冻融

🕷 光储存,防止降解

定期监测培养因子 🐋 的活 🌷

🦟 灯片 🌷 9:质量控制

检测污染物:内毒素、支 🌻 💮 体和真菌

🐴 证培养因子的活性:细胞增殖测定

记录 🐳 保存和批 🐈 次追溯 🍁

幻灯 🐎 🦢 10:结论 🌲

培养因子对 🐯 🦄 干细胞培养至关重要 🐈

选择、制备和添 🌿 加培养因子对于维护干细胞干性至关重要

质量控制 🐼 对于确保培养因子质量和培养成功至关重 🐅 💮

3、干细胞培养 🐟 视频 🐯 教程

干细胞 🌷 培养视 🦊 🐠 教程

第 1 部分 🕸 :准备 🐺 培养基 🦅

视频 1:如 🌹 🦅 配制干细 🦅 胞培养基(5:31)

视频 2:配 🌵 制 FBS 补充剂(1:47)

第 2 部分:培 🌷 养基和培养皿 💐 准备

视频 3:涂敷培养皿和培养 🐈 瓶以用于干细胞培养(5:40)

视频 4:准备 🪴 和钝化 🦟 细胞 🌲 培养瓶(2:40)

第 3 部分:干细胞培养技术 🐎

视频 🌳 5:如何 🦆 从冻存中复苏 🌷 干细胞(5:47)

🐵 🌺 6:干细胞传代(5:08)

视频 7:干细 🪴 胞分离 🦊 :Ficoll 方法(4:36)

第 4 部分 🐕 :细胞计数和活力评估

视频 8:使用血细胞计数器计数干细胞(3:04)

视频 9:使用 🌴 台盼兰染色评估干细胞 🐯 活力(4:17)

第 5 部分 🦉 🐱 :化和 🦈 诱导

视频 10:干细胞 🦊 向神经祖细胞的分化 🐱 (4:43)

视频 🐈 11:诱 🦢 导多能干细胞(iPSCs)的产生(5:16)

第 6 部分:故障排 🐦

🐦 频 12:干细 🌸 胞培养常见问题故 🌴 障排除(5:39)

视频 13:干细 🐎 胞污染 🌾 检测和去除(4:07)

提示:

🕷 保在无菌环境下 🦆 进行所有操 🌾 作。

穿戴 🐧 适当的个人防护装备 (PPE)。

遵循特定于您使用的细胞类型的 🦋 详细说明 🐅

定期监测培养物并根据需要进行调整 🐯

如果您有任何问题或疑虑,请务必咨询经验丰富的干细胞研 🌻 究人员。

4、干细胞培养液的成分 🐡

🌺 细胞培养液的成分

🐘 🐵 胞培养液是培养和维持干细胞生长和增殖所必需的液体环 🌻 境。它通常包含以下成分:

1. 基础 🐼 培养基

DMEM(杜尔伯克改良的 🌵 鹰氏培养基):为干细胞提 🐱 供基本营 🐶 养。

RPMI1640:另一种广泛用于干细 🐈 胞培养的培养基。

2. 血清 🦊 或生长 🕊 因子

胎牛血清(FBS):富含生长因子和其他营养物质,促进干 🌼 细胞增殖和存 🌸 🌵

生长因子 🌿 :如 bFGF(碱性 🐘 成纤维细胞生长因子)、EGF(表)皮生长因子和SCF(干细胞因子),刺激干细胞增殖和分 🐕 化。

3. 补 🍀 💐 🕊

谷氨酰胺:非必需氨基酸,支持能 🌹 量代谢。

青霉素/链 🐧 霉素:抗生素,预防细菌污染 🌼

β巯 🐟 基乙醇:抗氧化剂,保护 🐞 干细胞免受氧化应激。

非必需氨基酸:如丙氨酸、天冬氨酸和丝 🦈 氨酸,补充细胞代谢所需的营养。

4. 其他 🦈 🕸

缓冲液 🌴 (如 HEPES):调节培养液的 🐦 pH 值。

血小板来源生 🌻 长因子(PDGF):促进基质细胞增殖和存活。

肝细胞生长因子(HGF):刺激干细胞 🐧 迁移和侵 🐳 袭。

🕷 养液 🐘 🐘 优化

干细胞培养液的成分可能会根据 🐯 所培养的干细胞类型和特定的实验要求而有所不同。因此,需要。对 🕊 培养液进行优化以获得 🐘 最佳的干细胞生长和功能

质量控制

干细胞培养液的质量对于确保干 🌵 细胞培养的成功至关重要培养液。应定期监测其成分、pH 值 🦁 和无菌性,以确保。其符合质量标准

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