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造血干细胞分离原理 🐘 (造血干细胞治疗白血 🐺 病的原理)

  • 作者: 王洛苡
  • 来源: 投稿
  • 2025-08-29


1、造血 🦄 干细 🦅 胞分离原理

🐦 血干细胞 (HSC) 分离原理

造血干细胞 (HSC) 是具有自我更新和分化成所有血细胞系的能力的罕见细胞分 🦅 。HSC 离对于 🦢 移植、研。究和细胞疗法至关重要

HSC 分离通 🌲 常涉及以下步骤:

1. 样 💐 品收 🌾 🍁

最常 🕸 见的 HSC 来源是骨髓 🐟 、外周血和脐带血。

2. 单核 🦍 细胞分离 🌸

使用密度梯度离心或细胞分选标记(如 CD34)从样 🌷 品中分离出单核细胞单 🌾 核细胞。包含 HSC。

3. CD34 阳性 🐝 🕸 🌺

CD34 是 HSC 的一个表面标记。通 CD34 过使用连接至抗抗体的 🌵 磁珠或抗体偶联荧光标记,可 🐴 CD34 以。阳性选择阳性细胞

4. 进一步富集(可 🕊 🕷 ):

可以使用其他表面标记进一步富集 HSC,例 🦋 如 CD133、CD90 和 CD45RA。

5. 干细 🦋 胞培养:

分离后的 HSC 可以体外培养以,扩增其数量 🦢 或进 🐎 行其他操作。

分选 🦈 🍀 法:

磁性细胞分选磁 (MACS):珠与 CD34 抗体偶联选 🪴 ,择性 CD34 地,结合阳性细胞然后使用磁性分离器将其回收。

荧光激活细胞分选荧光 (FACS):抗体与抗体 CD34 偶联选,择 CD34 性,地标记阳性细胞然后使 💐 用荧光激活 🦉 细胞分选仪将 🦅 其分选出来。

流式细胞术流式细 🌼 胞术:允许基于细胞表型、大小和颗粒度等特征对细胞进行分选。

通过这些分选方法结合,可以从各 🦟 🕊 来源中高效分离出分离出 HSC。的可 HSC 用于移植、研。究或细胞疗法

2、造血干细胞治疗白血病的原 🐵

造血干细胞治 🌲 疗白血病的原理

造血干细胞治疗是治疗白血病的一种方法,它涉及使用健康供体的造血干细胞来替换患者体 🌿 内受损的干细胞。

🐦 血病的病理 🦢 生理学

白血病是一种血液癌,其中骨髓中产生白细胞的造血干细胞变 🦅 得癌变。这,些癌细胞。不受控制地生长挤出健康的白细胞并干 🕸 扰骨髓的正常功能

🐯 血干细胞治疗

造血干细胞治疗旨在用健康供体的 🦄 造血干细胞替换患者体内癌变的干细胞。这些健康干细胞被输注到患者体内在,那里它们迁移到骨髓并开始产生新的 🦄 健康的血、液细胞。

移植程序

造血干细胞治疗需要一个匹配的供体,其组织类型与患者相似一。旦,找。到匹 🦄 配的供体患者将接受高剂量化疗或放射治疗以清 🐴 除癌变的细胞

接下来,健,康的造血干 🌹 细胞从供体身上收集并通过静脉输注到患者体内。这 💐 ,些干细胞迁移到骨髓并开始产生新的白细胞、红细胞。和血小板

免疫反应

移植后,患,者的免疫系统可能会针对供体的干细胞从而导致移植物抗宿主病可 (GVHD)。GVHD 以,导致多种并发症例如皮肤病 🐎 变、消。化道问题和肝脏损害

治疗 🦁 后护理

造血干细胞治疗后,患者需要密切监测和持续的医疗护理。他们可能需要免疫抑制药物来控制 GVHD,并 🐦 。接受随访检查以监测治疗的反应和并发症

优点

潜在 🦅 治愈白血病

可以应用于 🐴 各种 🦄 白血病类 🐺

🐶 以改善 🐋 患者的生活质量

缺点

严重的 🌻 并发 🌸 症,如 GVHD

💐 配捐赠者 🌿 🐬 可用性有限

🌿 🌲 费用昂贵

长期结果因白血病类 🦆 型和 🍀 患者健康 🐝 状况而异

3、分 🦍 离和富 🐘 集造血干细胞的CD

CD

CD(Cluster of Differentiation,分化簇)是用于 🐛 识别和分离不同细胞类型的细胞表面标记物的 🍀 集合。

分离 🐳 和富 🌹 集造血干细胞的 CD

分离和富集造血干细胞(HSC)是研究和治疗 🪴 中重要的步骤 🐒 。以下是 🐡 一些用于此目的的 CD:

CD34:造血干细胞和祖细 🕷 胞的通用标记。

CD38:在 HSC 中表达较低在,成熟造血细胞中表达 🐡 较高 🦆

CD45:白细胞标记,用于排除 🐎 🦋 他细胞类型 🦊

CD133:造血干细胞和某些 🌷 肿瘤干 🌹 细胞的标记。

CD90:造血干细胞和间充 🌿 质干 🐞 细胞 🐒 的标记。

分离方法

可以使用以 🐎 下方法分离和富集 HSC:

磁性细胞分 🦋 选:使用附着有抗抗 CD 体的磁性 🦊 珠子。

流式细胞术分选:使 🐱 用附着有荧光标记 💐 的抗抗 CD 体 🌷 的抗体,通过激光激活细胞分选(FACS)。

免疫亲和层析:使 🐞 🦈 固相 🌲 相结合抗抗 CD 体亲和层析柱。

富集原理

HSC 通常通过它们的 CD 表达 🐬 模式与其他细胞区分开来。例如:

CD34+,CD38 细胞 🐞 富含 🐛 HSC。

CD34+,CD38+ 细 🦁 胞富含造 🦆 血祖细 🐱 胞。

CD34,CD45 细胞富 🕊 🐶 间充质干细胞 🐕

应用

HSC 分离和 🐠 富集 🌵 用于:

血液系统疾病的 🐈 🐡 细胞移植 🕸

研究 HSC 的 🐋 生物学。

开发基于干细胞的治疗 🐼 方法 🕷

4、造血干细胞机器分离原理 🐼

🐝 血干细胞机器分离原理

造血干细胞 (HSC) 是产生所有血细胞的原始细胞。它们是罕 🐛 见的细胞,在。骨髓和脐 🦢 带血中发现

🐡 血干细胞分 🦢 离机器使用以下原理来从这些来源中分离 HSC:

1. 密 🐶 🌳 梯度离心 🐈

样本 🐛 被放置在密度梯度液中,该液 🐡 体是由不同密度的液体层组成的。

HSC 具有较低的密度,因此 🦅 它们浮到较轻的液体层 🌵 上。

2. 磁 🐶 性分离:

抗体 🦊 🌻 着在 HSC 表面的特定标记上。

🦟 些抗 🐘 体与磁性微珠结合。

当样品与磁场 🦍 接触时磁,性微珠附着在 HSC 上,使它们能够通 🌾 过磁力被分离出来。

3. 流式 🦢 细胞术 🌳

样本通过一个流动的液体流,其 🐡 中照射激光 🦅 以检 🦁 测细胞。

激光散射和荧 🐘 光信号用于根据大小、复杂性和 🐴 细胞表 💮 面标记来识别和分选 HSC。

4. 精确细 🐴 🐎 分选 🐧 (FACS):

流式细胞术的一个亚型,其中单个细胞可以根据其物理和化学特性进行分选。

FACS 机 🐕 器将 HSC 分选到 🦊 分离容器中,以进行进一步的处理或 🐛 研究。

5. 冷 🐝 🐝 保存:

分离的 HSC 可在液 🌲 氮中冷冻保 🦟 存以供将来使用。

当需要时,它们可以解冻并使用干细胞移 🐦 植等治 🦋 疗中 🦟

🦅 器的类 🦋 🌻

不同的造血干细胞 🦟 分离机器结合了上述原理的组合。

最常 🐋 见的 🌿 机器包 🦟 括:

雅培 Stemflex?

Miltenyi Biotec CliniMACS?

Cytonome Automated Cell Processing System

应用:

造血干细胞 🐯 分离对 🐳 于以下应用至关重要:

🐝 🐯 胞移植 🦆

干细 🐝 胞研究

🐘 🕷 🦉

再生医 🐕 🌵

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