干细胞分离操作流程(干细胞分离操作流程 🐋 图片 🦁 )
- 作者: 刘嘉映
- 来源: 投稿
- 2025-08-04
1、干细胞分离操作流 🐛 程
干细胞分离操作 🌹 流程
材料:骨髓或 🐦 脐带血 🌷 样 🕸 品
抗凝剂Hanks 平衡 🐞 盐 🌷 溶液 🐝 (HBSS)
密度梯度分离 🌲 液
细胞培养 🕊 基
磁珠(用 🐋 于磁选分 🌹 离)
步骤:1. 样 🐱 品 🐞 采集 🐺 :
从健康供体采集骨髓或脐 🌳 带血样 🐎 品。
使用抗凝剂处理样 🦢 品以防止凝血。
2. 红细胞溶解 ☘ :
在 HBSS 中悬浮 🐡 样品并使用试剂溶解红细胞。
离心以 🐱 去除红细 🦆 胞碎 🦊 片。
3. 密 🐦 度 🦋 梯度分离:
将样品分层到密度梯度 ☘ 分 🌺 离液 🐝 中。
离心 🐛 以根据细胞密度分 🐅 离细胞 🐈 。
干细胞通常位于梯度中 🌲 特 🦅 定密度处。
4. 回 🌵 收干细胞 🌵 :
收集包 🦟 含干细 🐼 胞的梯 🐵 度部分。
洗涤细胞以去除 🦟 梯度液。
5. 磁选 🐱 分离(可 🐅 选 🍁 ):
使用特异性磁珠,可以进一步分离出特定亚群 🐈 的干细 🐠 胞。
磁 🐵 珠与细胞表 🦢 面标记物结合 🌳 。
在磁场的作用下,标记的细 🪴 胞与磁珠一起被保留。
6. 扩增(可选 🦉 ):
将 🦁 分离出 🦆 的干细胞置于 🌼 细胞培养基中进行扩增。
定期更换培养基以保持细胞 🕸 活力。
7. 表征 🦅 :
对分离出的干 💮 细胞进行表征,包括流式 🐅 细胞术、免疫细胞化学和功能测定。
注 🐘 意 🦋 事 🐒 项:
整个 🍀 流程应在无菌条件下进行。
使用高质量的试剂 🌿 和材 🐬 料。
监测细胞活力并必 🌿 要时更换培养基。
遵循 IRB 准则 🐴 和所有适用 🐞 的法规。
2、干细胞分离操作流 🦅 程图 🐟 片
干 🦢 细胞分离操作流程图片
步骤 1:采集 💐 样 🐠 本
[采 🦄 集 🌷 样本]
步骤 🐴 2:预处理和离 💐 心
[预处理和 🦊 离心]
步骤 🍁 3:贴壁分离 🦄
[贴壁 ☘ 分离]
步骤 4:收集非贴壁 🐧 细 🦊 胞
[收集 🌺 非 🐛 贴壁 🐅 细胞]
步骤 5:梯度离 🐛 心
[梯 🌷 度 🐵 离 🐳 心]
步骤 🐛 6:收集 🕸 干细 🦊 胞
[收集干细胞 🐬 ]
步 🌺 骤 🐵 7:纯 🐈 化和扩增
[纯 🌳 化和扩增]
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3、干细胞分离 🌷 操作流程视频
干细胞分离 🐋 操作流 🐕 程视频
材料:细 🐯 胞悬 🐒 液 🌸
离心机Ficoll 密度 🍁 梯度液 🦍
移液枪和 🕸 枪头
培 🐼 养皿和培养基
步骤:1. 制备 Ficoll 密度 🕷 梯 🍁 度液:将 Ficoll 溶液与培养基按一定比例混合。
2. 建立 Ficoll 梯度:小 Ficoll 心地将梯度液分层注 🦈 入离 🦄 心管中。
3. 加入细胞悬 🌾 液:将细胞悬液小心地加入 Ficoll 梯度液的顶 🍁 层。
4. 离心 ☘ :高离心速度离心( x g)分 2030 钟。
5. 收集单核细胞:离心后单核细胞,将聚集在 Ficoll 梯度液和培养基之间的界 🌼 面处。小心。地收集该层
6. 洗涤:将单核细 🐎 胞转移到一个 🦆 新的离心管中,并用培养基重 🐬 复洗涤 23 次。
7. 离心收集细胞 🌹 :再 🦍 次离心收集细胞,弃去上清液。
8. 重悬细胞:将细胞重 🦢 悬于新鲜培养基 💮 中,用于后续培 🪴 养或分析。
提示:在进 🌾 行过程 🐵 中保持无菌条件 🌿 。
根据细胞 🌼 类型调 🦈 整离心速度和时间。
收集单 🐕 核细胞时要小心,避 🍀 免污 🐦 染。
如 🕊 果需要,可以 🐬 通过 FACS 分选 🐒 进一步纯化干细胞。
4、干细胞分离机多少 🐟 钱一台
干细胞分离机的价格因型号、配置和制造商而 🐠 异。以下是一些一般价格范围:
研究级分离机:100,000 美元至美元 500,000 不等 🌻
临床 🦉 级分离机:300,000 美元 🐬 至美元 2,000,000 不等
以下是一些特定型号的 🦈 价格示例:
Terumo BCT CellEx System:约 750,000 美元 🦈
Miltenyi Biotec AutoMACS Pro Separator:约 300,000 美元 🌲
STEMCELL Technologies IsoFlux:约 🐛 150,000 美 🐯 元 🐘
Cytonome CellCap:约 💮 200,000 美 🦉 元 🌳
BD FACSAria III Cell Sorter:约 🌾 500,000 美 🐬 元 🕊
价格还可能包括安装、培、训维护和升级 🐵 的额外费用。在做出 🐶 决定之前,请、务。必比较不同制造商和型号的特性性能和成本