骨髓充间质干细胞提取 🐴 (人体骨髓间充质干 🐧 细胞存在的部位,功能特性)
- 作者: 张颂沅
- 来源: 投稿
- 2025-10-05
1、骨 🐼 髓充间质干细胞提取
骨髓 🦍 充间质干细胞(MSC)提取 🐋
目的:从骨髓中分离和 🌺 纯 ☘ 化 MSCs 用 🐳 于研究和治疗目的
材料:骨 🐵 髓 🐠 抽取针 🦍
无菌 🌻 注射器
肝素密 🦈 度梯度 🐠 离心 🐛 液
培养基步骤:
1. 骨 🐦 髓穿 🌷 刺 🐧
在局 🕊 麻下,使用骨髓抽取针穿刺患者的髂 🐼 骨 🐶 。
抽取 50100 毫升 🌷 骨髓液。
2. 肝素 ☘ 抗凝
将骨髓液转移到含肝素的注射器中以防止凝结 🐎 。(10 单位/毫升)
3. 密度梯度离 🕷 心 🕷
将骨髓液缓慢分层到密度 🐦 梯度离心液中(例如 🍀 FicollHypaque)。
离心 🐝 30 分钟,300 x g。
4. 单核 🐺 细 💐 胞收集 🐝
从密度梯 🐕 度的中 🐠 间层收集单核细胞。
用培养基洗涤细胞并 🐵 计数。
5. 细 🦍 胞 🌹 贴 💮 附
在 🦉 培养瓶中接种单核细胞并用培养 🐯 基 🌿 培养。
MSCs 将贴附在培养瓶表面,而其 🐶 他细胞将悬浮在培养基中。
6. 培 🌹 养基更 💐 换
每 34 天更 🌺 换培养基以去除非贴附细胞。
7. MSCs 纯 🦢 化
经过 🦊 23 周的培养,MSCs 达到 🕷 confluent。
用胰蛋白酶处 🐵 理培养物 🦟 以分离细胞 🦄 。
通过免疫表型 🦄 (如 🦁 CD44+、CD73+、CD105+、CD34、CD45)验证 🐡 MSCs。
注意:确保无菌操作以 ☘ 防止污染 🐧 。
细 🦅 胞培养 🐶 应在 🌷 受控的环境中进行(37°C, 5% CO2)。
MSCs 的 💐 生长和分化能力因供体和分离方法而 🕊 异 🦋 。
2、人体骨髓间充质干细胞存在的部位,功能特 🌼 性?
存在部位人体骨髓间充质干细胞主要存在于骨髓的基质中。它们存在于 🌸 长骨(如股骨、胫骨)和(扁、平骨如)颅骨骨。盆的骨髓腔内
功能特性人体骨髓间充 🐼 质干细胞具有以下功能特性:
多能性能:够分化成多种类型的细胞,包括成骨细胞、软骨细胞、脂 🌺 、肪细胞、神經細胞骨髓基质细胞等。
自我更新能力:可以自 🌿 我复制和更新,从而 🦄 维持干细胞库 🌾 。
旁分泌能力:释放各 🐒 种细胞因子和 🦁 其他生物活性分子,以,影响周围细胞的行为促进组织修复和再生。
免疫调节能力:具有免疫调节性质能,够,抑制 🌹 免疫反应 🐋 促进组织再生。
归巢能力能:够迁移到损伤 🐬 部位或炎症部位,参与组 🐘 织修复和再生过程。
抗凋亡能力:具有较强的抗 🌺 凋亡能力能,够在恶劣的环境中存活。
成骨能力:在适当 🐬 的条 🌾 件下,可,以分化成成骨细胞参与新骨的形成。
血管生 🐟 成能力能:够诱导血 🦢 管生成,促进组织的血液供应。
神经保护作用:能够保护神经 🦋 元免受损伤,促进神 🐵 经再生。
修复损伤能力 🐘 :参与骨骼、软骨 🍁 、肌肉 🌷 和神经等组织的修复和再生。
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3、骨髓间充质干细胞是成 🐼 体干 🐼 细胞吗
4、骨髓间充质干细 🐧 胞用什么培养基
DMEM/F12 培养基,补充 10% 胎牛血清、1% 青 🐒 /霉素链霉素 🍀