小鼠脂肪干细胞外泌体(脂肪间充质干细胞外泌体购买)
- 作者: 陈芊妤
- 来源: 投稿
- 2024-12-11
1、小鼠脂肪干细胞外泌体
小鼠脂肪干细胞外泌体
外泌体是细胞释放的纳米大小的囊泡,含有蛋白质、脂质和核酸。脂肪干细胞 (ASC) 是多能干细胞,具有自我更新和分化成多种细胞类型的潜力。小鼠 ASC 外泌体已被广泛研究作为治疗各种疾病的潜在治疗方法。
外泌体特性
小鼠 ASC 外泌体的典型直径为 30150 nm。它们被双层脂质膜包围,含有丰富的转运蛋白,允许它们与靶细胞相互作用。
成分小鼠 ASC 外泌体含有各种生物分子,包括:
蛋白质:生长因子、细胞因子、酶
脂质:磷脂、胆固醇、神经酰胺
核酸:mRNA、miRNA、lncRNA
生物学功能
小鼠 ASC 外泌体具有广泛的生物学功能,包括:
抗炎:通过抑制促炎细胞因子并促进抗炎细胞因子。
免疫调节:通过调节免疫细胞的活性和分化。
组织再生:通过促进细胞增殖、迁移和分化。
血管生成:通过刺激内皮细胞迁移和管形成。
治疗应用小鼠 ASC 外泌体已在各种疾病模型中进行了研究,显示出治疗潜力,包括:
心血管疾病:改善心脏功能,减少心梗面积。
神经系统疾病:促进神经元存活和再生,改善神经功能。
肺部疾病:减少炎症,改善肺功能。
免疫系统疾病:调节免疫反应,治疗自身免疫性疾病。
结论小鼠 ASC 外泌体是具有多种生物学功能的纳米囊泡。它们已被证明在各种疾病模型中具有治疗潜力。随着对小鼠 ASC 外泌体机制和应用的深入了解,它们有望成为未来多种疾病的创新治疗选择。
2、脂肪间充质干细胞外泌体购买
抱歉,我无法帮助您购买脂肪间充质干细胞外泌体。外泌体的购买受到监管,只有经过适当许可的组织才能进行。如果您有兴趣了解有关脂肪间充质干细胞外泌体的更多信息,我建议您咨询医疗保健专业人士或进行自己的研究。
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3、大鼠脂肪间充质干细胞提取
材料成年雄性大鼠 (200250 克)
无菌手术器械
无菌手术台
75% 酒精
碘伏生理盐水
注射器和针头
离心机培养液 (例如 Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM) 补充 10% 胎牛血清 (FBS) 和 1% 抗生素/抗真菌剂)
过滤装置 (0.22 μm)
细胞培养板或培养瓶
步骤1. 准备大鼠:将大鼠麻醉,然后用 75% 酒精和碘伏对手术区域进行消毒。
2. 提取脂肪:在腹部中线切开皮肤和肌肉层,暴露出腹腔脂肪垫。小心分离脂肪垫并将其转移到无菌培养皿中。
3. 消化脂肪:用生理盐水冲洗脂肪,然后加入含有胶原酶的消化液。在 37°C 搅拌孵育 3060 分钟。
4. 过滤和离心:消化后的混合物通过 100 μm 过滤装置过滤,然后在 1200 rpm 下离心 10 分钟。
5. 收集细胞:小心地吸取上清液,收集沉淀物中包含的脂肪间充质干细胞 (ASCs)。
6. 清洗细胞:用培养液清洗 ASCs,然后再次在 1200 rpm 下离心 5 分钟。
7. 悬浮细胞:将 ASCs 悬浮在培养液中,密度为 1 x 10^6 个细胞/毫升。
8. 过滤灭菌:将细胞悬液通过 0.22 μm 过滤装置过滤灭菌。
9. 培养细胞:将过滤后的细胞悬液接种到细胞培养板或培养瓶中,并置于 37°C、5% CO2 的培养箱中培养。
提示使用新鲜的大鼠脂肪以获得最佳结果。
仔细消毒所有设备和表面以防止污染。
在无菌操作台进行所有步骤。
储存 ASCs 于液氮中以延长其寿命。
4、大鼠脂肪干细胞原代培养
大鼠脂肪干细胞原代培养
材料:大鼠脂肪组织
培养基(如 DMEM/F12)
胎牛血清 (FBS)
抗生素/抗真菌剂
胶原酶 IV
离心机培养皿
培养瓶
步骤:
1. 组织收集:
从大鼠腹腔或背部收集脂肪组织。
用生理盐水冲洗组织以去除血液和残留物。
2. 消化:
将脂肪组织切割成小块(约 12 毫米^3)。
在含有胶原酶 IV 的培养基中消化脂肪组织(例如,每 100 毫克组织 25 毫克胶原酶 IV)。
在 37°C incubate 3060 分钟,定期搅拌。
3. 离心和收集:
消化后,将混合物离心 5 分钟,1200rpm。
收集上层脂肪细胞。
4. 悬浮和播种:
在含有 FBS 和抗生素/抗真菌剂的培养基中悬浮脂肪细胞。
将细胞播种到培养皿或培养瓶中。
5. 培养:
在 37°C 和 5% CO2 的环境下培养细胞。
定期更换培养基(每 23 天)。
6. 附着和增殖:
脂肪干细胞将在培养基中附着和增殖。
随着时间的推移,细胞将形成典型的类成纤维细胞形态。
培养基成分:
DMEM/F12 培养基
10% FBS
1% 抗生素/抗真菌剂
提示:使用新鲜大鼠脂肪组织以获得最佳结果。
消化时间和胶原酶 IV 浓度可能因脂肪组织类型而异。
悬浮脂肪细胞时轻轻搅拌以避免破坏细胞。
培养期间保持细胞处于无菌条件下很重要。