干细 🐝 胞标记物检测方法（干细胞鉴定中表面标志物有哪些）

1、干 🐳 细 🦄 胞标记物检测方法

干细 🌷 胞标记物 🦋 检测方法

干细胞标记物是用于鉴定和表征干细胞的独特分子。检。测这些 🦆 标记物对于干 🐧 细胞研究和临床应用至关重要

以下是一些常用的干细胞标记物检测方 🦄 法：

1. 免疫表型 🕷 分析（流式细 🌺 胞术）

使用特异性 🐘 抗体通过流式细胞术分析细胞表面标记物的表达。

例子 🐴 ：CD34、CD45、CD133

2. 免疫组织 🌵 化学和免疫荧光

使用特异性抗体进 🦟 行组织切片或 🦆 细胞 🕷 培养物的免疫着色。

例 🐧 子：Ki67、Nestin

3. qPCR 和 🦋 RTPCR

用于检测 🐕 特定转录因子的mRNA表达，这些转录因子与干细胞相 🌲 关。

例 🐈 子 🌼 ：Oct4、Sox2、Nanog

4. Western blotting

用于检测特定蛋白质的表达，这些蛋白质是干细胞 🌿 特异 🐡 性的。

例 🌺 子 🪴 ：Bmi1、EZH2

5. FACS 分 🌾 选 🐠

根据标记物 ☘ 表 🦈 达将细胞群 🌷 分离成亚群。

使用 🌵 特异性抗体标记细胞 🌷 表 🐱 面标记物，然后使用 FACS 分选器对细胞进行分选。

6. 干 🌷 细 🐈 胞培养

干 💐 细胞在特定培养基和生长因子的作用下 🐟 生长，可以维持其自更新 🐕 和分化特性。

培养后，可以使用其 🍁 他检测方法来表征干细胞。

单一标记物可能不是干 🐈 细胞的唯 🐞 一或 💮 绝对指标。

标记物表达可能会随着干细胞分化状 🕸 态而变化。

检测 🐱 方法的选择取决于标 🐵 记物类型和所需的灵敏度和特异性水平。

干细胞标记 🐯 物检测在以下 🐠 领域具有重要 🦆 应用：

干细胞 🐛 研究和表征 🦢

干细胞分 🌷 离和纯化

干细 🐕 胞跟踪和移植监测

癌 🐯 症 🦉 干细胞鉴定 🍀

再生医学 🦍 和组 🐶 织工程 🦊

2、干细胞鉴定中表面标志物有 🦆 哪些?

胚胎干 🐒 细 🐳 胞 🌲 (ESC)

SSEA4

SSEA3

TRA160

TRA181

Oct4

Nanog

Sox2

诱 🐝 导多能干细 🍀 胞 (iPSC)

Oct4

Nanog

Sox2

Klf4

cMyc

Lin28

SSEA4

间 🐛 充质 🐘 干细胞 (MSC)

CD105

CD73

CD90

CD44

CD29

STRO1

ABCG2

造血干细胞 🐳 (HSC)

CD34

CD117 (cKit)

CD90

CD38 (阳 🌷 性或阴性 🌾 )

CD45RA (阳 🐱 性或 🪴 阴性)

CD133

CD105

神 🐯 经 🦄 营养细 🐶 胞 (NSC)

Nestin

Sox2

GFAP

MAP2

βIIItubulin

肝脏干 🦋 细 🐈 胞 🌿 (HSC)

CD90

CD133

EpCAM

心 🌷 肌干 🦊 细 🦆 胞 (CSC)

cKit

Sca1

CD31

CD45

CD105

造 🐳 血祖细 🐯 胞 (HPC): CD34+, CD117+, CD38, CD45RA

神经 🦅 祖 🕷 细胞 (NPC): Sox1, Sox2, Nestin

成 🐕 肌祖 🐞 细胞 🐠 (MPC): Pax7, Myf5, MyoD

隆 🐅 突胶 🍁 质细胞祖 🐡 细胞 (RGPC): GFAP, A2B5, S100β

3、干细胞标记物检测方法 🐈 有几种 🐧

干细胞标记物检测方法主 ☘ 要有以下几种：

免疫表型分析 🦋 ：使用抗体标记和流式细胞仪检测 🕊 细胞表面或胞内蛋白质的表达，识别特定干 🦟 细胞亚群。

荧光激活细胞分选 🐛 (FACS)：利用抗体标记和荧光 🌲 探针分，离出表达特定标记物的细胞群。

qRTPCR：定量实时 🌳 PCR，用于检测细胞中特定基因的 🦋 mRNA 表，达水平从而推断 🌳 干细胞状态。

免疫组化染色：使用标记特定抗原的抗体对组织进行染色，可视化干细胞在组 🐱 织中的分布和数量。

原代细胞培 💐 养：分离和培养活体组织中的干细胞，观察其分化潜 🌻 能和增殖能力。

无标 🦅 记成像：利用干细胞特有的生物 🐼 物理特征（例如，自发荧光、折射率）进 🌸 行无创标记和检测。

单 🐟 细胞 RNA 测序：对单 RNA 个细胞进行测序，分析转录组并识别干细胞特定转录特征。

甲基化分析：检测干细胞特异性甲 🐡 基化 DNA 模式，有助于表征干细胞状态和调节。

4、干细 🌿 胞标记物检测方 🪴 法有哪些

干细 🌻 胞标记物检测方法 🌷

1. 免疫组 🐝 化法 (IHC)

利用抗体识别并染色特定的细 🐡 胞表面或细 🦢 胞内标记物。

可 🦊 用于固定的细 🦢 胞或组织样品。

提 🌲 供对标记 🌿 物表达定位和丰度的 🦍 直观分析。

2. 流式细胞 🦉 术 (FACS)

通过流式细 🦄 胞仪对 🌷 细胞悬 🌷 液进行多参数分析。

使用标记有荧光抗体的抗体来检测特定表面标记物 🌿 。

可同时 🐘 分析多个标记物并提供细胞群的定量表征 🌿 。

3. 实 🐳 时 🪴 定量 PCR (qPCR)

测量特定基因的 mRNA 表达水平，该基因编码特定的干细 🌵 胞标记物 🌷 。

可 🐳 用于相对定量或绝对定 🦈 量。

提供 🪴 对 🌻 标记物转录活性 🍀 的洞察。

4. Western 印迹 🌿 法 🐧

蛋白质电泳和免疫印迹 💮 结合 🐵 的技术。

使用抗体检测特定标记物蛋 🐝 白的表达水平。

提供有关标记物翻译和 🕊 修饰 🌵 状态的信息。

5. 原 🐬 位杂 🐟 交 🌼 (ISH)

通过杂交互补探针来检测特定 DNA 或 RNA 序列的存 🕷 在。

可用 🐡 于固定 🐋 细胞或组织样品 🐶 。

提 🍀 供对标记物基 🦉 因 🐈 表达的空间定位分析。

6. 单细胞 🦟 RNA 测 🌷 序 🦅 (scRNAseq)

捕获和 ☘ 分 🐛 析单个 🐦 细胞的转录组。

可识 🦅 别不同干细胞亚群并表征其标 🦋 记物表达谱。

7. 抗原递呈检 🦄 测 🦄

使用标记有人类白细胞抗原 (HLA) 肽的抗 🌷 体来检测干细胞表面的表 HLA 达。

反映干细胞的免疫 🦄 原性。

8. Haptoglobin 检 🍀 测 🦋

利 🦆 用干细 🐛 胞分泌的 haptoglobin 来间接检测干细 🐺 胞的存在。

可用于 🕷 血液或组织样品。

9. 腺 🌵 苷 🕊 脱氨酶 (ADA)

酶活性测定 🌴 法 🦍 ，检测干细胞分泌的 ADA 水平。

可用于血液或组 🌿 织样品。