玫瑰干 🐦 细胞 🐵 怎么提取制作（玫瑰干细胞怎么提取制作方法）
- 作者: 郭黎初
- 来源: 投稿
- 2025-04-12
1、玫 🕷 瑰干细胞怎么提取制 🐧 作
玫瑰干细 🦆 胞 🦋 提取制作
材料：新鲜玫 🐞 瑰花瓣
无 🐘 菌培 🐼 养基 🦆
抗 🕸 生素抗/真菌 🕷 剂 🕷
超 🐶 净工作台
移液管细胞培 🦁 养 🐈 皿 🌲
细 🐦 胞培养箱
步骤：1. 表面 🦁 消毒花 🌾 瓣
在超净工作台上，用，无菌蒸馏水冲洗 💐 玫瑰花瓣去除污垢和杂 🐕 质。
用 70% 酒精溶液擦拭花瓣表 🐳 面 1 分钟，然后用无菌蒸馏水彻底冲洗。
2. 分离花瓣表皮 💐
使 🦊 用锋利的解剖刀，仔细分离花瓣表皮薄 🌸 层表 🐈 皮。含。有大量干细胞
3. 切碎 🌵 表 🐳 皮
将花瓣表皮切 🐱 碎成 🐛 细小碎片，放入无菌 🦍 培养基中。
4. 消化表 🐟 皮 🍁 碎片
加入消化酶溶液（例如胶 🐝 原酶或纤维酶消化），花瓣表皮 🦆 碎片 12 小，时 🐞 释放干细胞。
5. 离心 💮 和收集 🐒 干细胞 🦈
将消化 🪴 液离心 (1200 rpm，5 分钟) 以分离干细胞。
吸出上 🌷 清液，沉淀物中含 🐬 有 🌷 干细胞。
6. 去除未 🐒 消化 🌷 物 🌵 质
加入无菌培养 🐧 基 🌹 ，轻，柔吹打沉淀物去除未消化的表皮碎片。
再 🦈 次离 🐈 心 (1200 rpm，5 分钟) 并 🐡 收集干细胞。
7. 计数 🐅 和培 🐛 养
使用显微镜和血细胞计数器计数干 🐯 细胞。
将干细胞接种到含抗生 💮 素抗/真菌剂的细胞培养皿中，在的培养 37°C、5% CO2 箱中培养。
注 🐶 意事项 🌺 ：
所有程序必须在 🐟 无菌条 🕊 件下进行。
使用高质量 🐵 的无菌培养基和 🐱 试剂 🦟 。
定期更换培养基以 🌹 维持干细胞 🐼 健 🐛 康。
通过显微镜定期监测培养物以检查细胞活 🐞 力和增殖。
2、玫瑰干细胞怎 🌵 么提取制作 ☘ 方法
玫瑰 🐎 干细胞提取制作方法
材料：玫瑰花 🐛 瓣 50 克 🦅
无水 🕷 乙 🐎 醇 200 毫升 🐘
丙酮 🦁 100 毫升
无血清培 🌸 养基 100 毫升
角质形 🐼 成细胞生长 ☘ 因子 (EGF) 10 μg/ml
纤 🐱 维 🦅 母细胞生长因 🐎 子 (FGF) 10 μg/ml
植 🌹 物 🐒 性肽 🦟 10 μg/ml
步骤：1. 消毒和准备 🐘 材料：
使用 75% 乙醇对所有材料进行消毒 🐳 。
将玫瑰花瓣洗 🌻 净并用 🐯 无菌水冲洗干净 🐞 。
2. 提取 🌵 干细 🐴 胞 🦍 ：
将玫瑰 🌴 花 🐠 瓣放入研钵中研磨至细 🕷 粉。
加入无水 🐘 乙醇和 🦊 丙酮，搅拌 1 小时。
离心 10 分钟 🌼 ，10,000 rpm。
收集上清液并 🐠 丢 🌹 弃 🦈 沉淀物。
3. 培养干细 🌿 胞：
将无血清培养基加入上清 🦟 液中，稀 🐶 释约 10 倍。
加入 EGF、FGF 和植 🐕 物 🐶 性 🐼 肽。
将培养液接种到培养皿或培养瓶 🌳 中 🐈 。
培养于 37°C、5% CO2 的 🪴 环境中。
4. 纯 🦋 化干 🦁 细胞：
培养 7 天后，细胞 🌸 会附 🌷 着在培 🌹 养皿或培养瓶上。
用 PBS 冲 🪴 洗培养 🐼 物以去除未附着细胞。
使用 🐘 磁性 🐎 珠或 FACS 分 🌹 选器纯化玫瑰干细胞。
5. 扩 🐈 大 🌲 培养：
将纯化的玫瑰干细胞重新接 🐱 种到更大的培养皿或培养瓶中。
定期更换培 🐒 养液以维持细胞生长 💐 。
注意 🌷 事 🐱 项：
操作过 🌿 程中必 🐘 须 🌴 保持无菌。
如果培养液变色或浑浊，请丢 🐺 弃并重新开始。
玫瑰干细胞需要特殊的培 🐘 养条件才能存活。
培养和纯化需要专门的 🐴 设备和培训。
3、玫 🐈 瑰干细胞怎么提取制作视频
玫瑰干细 🐒 胞提取和制 🍁 作视频指南
材料：玫瑰花瓣（新鲜或 🍀 干燥）
70% 酒 🌹 精 🐕
无菌培养 🐯 瓶或 🐘 培养皿
无 🐦 菌移液枪
无菌手术刀 🍁 或 🐳 刮刀 🕷
无血清培 🐝 养 🕷 基 🌳 （如培养基 MS ）
固体培养 🐧 基 🐘 （如培养基 B5 ）
荧 🦁 光显微镜（可选 🌺 ）
步骤：1. 消毒 🐯 玫瑰 🦟 花瓣
将 🐕 新鲜 🐴 玫瑰花瓣浸泡在 70% 酒精中 10 分钟。
将干燥的玫 🐠 瑰花瓣直 🐟 接放入无菌培 🦆 养瓶中。
2. 提取玫瑰干 🐴 细胞
使用无菌手术刀或刮刀从消毒后的玫瑰花 🐯 瓣上刮取表皮细胞。
将表皮细胞转移 💮 到无菌培养瓶中，并用无菌 🦢 培养基覆盖它们。
3. 培养玫瑰 🐎 干细 🕸 胞
将培 🦄 养瓶置于黑暗且温度受控的 🌴 培养箱中温度（约为 🐈 25°C）。
每隔 23 天更换培养基 🦟 ，以去除代谢废物并提供新鲜 🐝 养 💮 分。
4. 分 🐬 离 🌲 干细胞群体 🐵
细 🪴 胞生长 710 天后，用荧光显微镜观察培养物。
寻找表现出干细胞特征的细胞，例如快速的增殖和 🪴 自更新能力。
使用无菌移液枪将干细胞群体从其他细胞中分离出 🐠 来。
5. 扩增干 🦊 细 🐦 胞 🌸
将分离出的干细胞群体转移到含有固体培养基的 🦊 新培养瓶中。
继续培养，直到干细胞数量达到所需的水平 🐵 。
6. 制 🦟 作视 🌾 频
使用显微摄 🐟 像机或智能手机录制干细胞培养的延时视频。
根据需要添加 🌺 字幕 🌸 或标注，以解释步骤和结果。
提示：使用高质量的玫瑰，以获得最佳的提取结果 🕸 。
保持无菌条件 🦟 ，以防止培养物 🐦 受到污染。
定期监测细胞生长 🐕 ，以确保它们的健康状况。
优化培养条件 🦅 ，以最大化干细胞产量。
4、玫 🍀 瑰干细胞怎 🦊 么提取制作的
玫瑰 🐕 干细 🦁 胞提取和 🦋 制作过程
1. 原料 🦈 收集 🐴
从新鲜盛开的玫瑰花中收 🕸 集花瓣。
2. 消 🐴 毒和清洗
用 70% 酒精消毒花瓣，去除表面的 🦁 微 🌿 生物。
用无菌水彻底 🐡 冲洗花瓣，去除酒精残留。
3. 粉 🐞 碎和酶 🦁 解 🐛
将花瓣 🐞 粉碎成细小的颗粒。
加 🐶 入酶溶液（如纤维 🕊 素 🐼 酶和果胶酶）并孵育，降解花瓣中的细胞壁和基质。
4. 过滤 🐒 和 🐅 离心
过滤酶解液，去除残留的颗 🌷 粒。
对滤液进行 🌷 离心，将细胞 🐳 沉淀收集 🐎 到底部。
5. 培 🕊 养 🦊
将细胞沉淀重 🌼 悬于富含生长因子的培养基 🦋 中。
将细胞接种到培养 🐘 皿或培养 🐯 瓶中，孵育在 37°C、5% CO2 的环境中。
6. 增 🐺 殖
细胞在培养基中增殖，形成 🐦 单层。
定 🦍 期更换 🦆 培养基，以提 🕷 供新鲜的营养物质和生长因子。
7. 分 🐺 离 🐡
当细胞达到 8090% 的汇合度时，用胰 🌻 蛋白酶溶 🌸 液消化细胞。
使用流式细胞仪 🕊 或免疫磁珠分离 🐦 方 🐘 法分离，出玫瑰干细胞。
8. 验 🦄 证 🦅
对分离出的细 🌷 胞进行验证 🐎 ，以确认其干细胞特性。
例如，进行细胞表面标记、多向分 🐘 化潜能和自我更新能力 🦉 的检测。
9. 冻存和保 🌾 存
验证 🐳 后的玫瑰干细胞可以用液氮冻存以 🌷 ，便长期 🍁 保存。
