怎么提取成体干细胞(干 🍀 细胞外泌体从哪里提 🦍 取的)
- 作者: 杨思影
- 来源: 投稿
- 2025-08-13
1、怎么提 🍁 取成体干 🐡 细胞
体外成 🐧 体干细胞 🐛 提取方法
1. 机械分离 ☘
使用组织剪刀、离心机或过 🌾 滤装置去除细胞外基质,将细 🐱 胞释放出来。
2. 酶促消 🐺 化
使用胶原酶、胰蛋白酶 🦋 或其他酶 🐎 来分解细 🌲 胞外基质,释放细胞。
3. 密度梯 🌺 度离 🌻 心
将悬浮细胞通过密度梯度离心将,干细胞,从其他细胞 🦆 中分离出来因为干细胞具有不同的密度。
4. 磁 🐳 珠 🐝 分离 🌹
使用抗特定干细胞表面 🌹 抗原的 🌺 磁珠,与干细胞,结 🍀 合然后通过磁力分离出来。
5. 流式细胞术 🦊 分 🐈 选
使用荧光标记的抗体或其他配体,与,干细胞表面 🌾 抗原结合然后通过流式细胞术进行分选。
体内成体干细胞提取方 🦄 法
1. 骨髓穿刺 🦅
从骨髓中 🕊 提 🍁 取 🐵 造血干细胞。
2. 外 🐬 周血干细胞动员
使用药物(如粒细胞集落刺激 🦄 因子 (GCSF))将干细胞从骨髓释放到外周血中,然后通过血细胞分离术收集。
3. 脂 🐎 肪 🦄 抽 🐴 吸
从脂肪组织中提取间充 🌷 质干细 💮 胞。
4. 肝脏 🌷 穿 🌸 刺 🐞
从肝脏中提取肝脏干 💮 细胞。
5. 脐带血采集 🦈
从脐 🐺 带上 🐧 采集脐带血,其中含有造血干细胞 🦅 。
2、干细胞外泌体从哪里提 🐧 取的
干细胞外泌体可以 🦊 从各种干细胞来源 🌴 中提取,包括:
胚胎 🌼 干 🐞 细 🦉 胞 (ESC)
诱导 🌼 多能 🦉 干细胞 🌴 (iPSC)
间充 🐧 质 🐳 干细胞 🌵 (MSC)
造血干 🐅 细 🕸 胞 🐦 (HSC)
神 🐳 经 🌼 干 🦄 细胞 (NSC)
具体提取方 🐈 法 🌹 如下:
干细胞培养干细胞:在体外培养 🐛 ,产生和释放 🌼 外泌 🐘 体。
培养基收集:含有外 🌳 泌体的培养基 🪴 从培养容器中收集。
离心:培养基通过 🌺 一系列离心步骤进行浓缩,分离出外泌体。
纯化:使用过滤、免疫亲和色谱或其他技 🍀 术对外泌体进行纯化 🌹 。
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3、干 🐋 细胞外泌体怎么提取
干细胞外泌体 🦁 提 🌿 取步骤
1. 收 🌳 集干 🐎 细胞培养基 🐎
培 🐠 养干 🌲 细胞,收集含外泌体的培养基。
使 🌳 用无血清 ☘ 培养 🐠 基或外泌体专用培养基。
2. 离 🌷 心去 🍀 除细胞 🐛 和碎屑
首先 🌿 低速离心(300 x g,10 分钟)去除细 🐒 胞和碎屑。
然后 🌼 高速离心(10,000 x g,30 分钟),将外泌体沉淀 🦅 在管底。
3. 纯 🐞 化外泌体 💮
方法 A:超速 🦅 离心法
使用超速离 🐦 心机(100,000 x g,12 小时 🌹 )进一步纯化外泌体。
外泌体将沉淀 🌴 在管底。
方法 B:大小排 🌲 阻 🐟 色谱 🐝 法
将高速离心后的 🌿 上清液加载到大小排阻 🐺 色谱柱上。
外泌体将流 🌹 出柱 🍁 子中的特定馏分。
方法 C:免 🐱 疫亲 🐡 和纯 🌷 化
使用针对外泌体表面标记物的抗体,通过免疫亲 🦁 和层 🦟 析 🐧 法纯化外泌体。
4. 洗涤 🐛 和浓 🐒 缩
将纯化的外泌体用 🌾 PBS 或 🐟 其他 💮 缓冲液洗涤。
使用超滤离心管浓缩外 🐦 泌体。
5. 定 🕸 量和 🌾 表 🦄 征
使用 🐘 纳米颗 🦉 粒追踪分析(NTA)或其他方法定量外泌体 🌼 。
通过 Western blotting、流式细胞术或电子显微镜表征外泌体的蛋白质组成和形 🐈 态。
提示:使用高 🐠 品质的培养基和试剂。
保 🌻 持 🐘 无菌条件,以防止污 🌵 染。
优化提取步骤 🪴 以最大化外泌 🐝 体产量和纯度。
4、干细胞怎么提取 🍁 的出来 🦉
干细 🌻 胞提 💐 取方法 🐶 :
1. 骨髓活 🐼 检 🍁
骨髓活检是提 🍁 取干细胞最常见的方法。
医生会在臀骨或骨 🐡 盆骨处插入一根空心针,取出少量骨髓。
骨髓含有造血干细胞,可,用于治疗各种疾病如白血病和淋巴 🌸 瘤。
2. 周 🐠 围 🦊 血干 🐘 细胞采集
周围绕血干细胞采集涉及 🐘 从外周血液中提取干细胞。
在采集前,患,者会接受一种称为动员剂的药物将干细胞 💐 从骨髓释放 🦈 到血液中。
然后使用一种称 🐎 为细胞分离术的设备从血液中 🐯 收集 🌵 干细胞。
3. 脐 🐒 带 🦈 血采集 🐧
脐带血采集涉及在婴儿出生后从脐带中收 🐝 集干细胞 🦟 。
脐带血富含造血干细胞,可,用于治疗各种疾病如白血 🦈 病和淋巴瘤。
4. 脂肪组 🦆 织 🐺 采 🦅 集
脂肪 🐼 组织采集涉及 🕊 从腹部或大腿等部位抽取脂肪。
脂肪组织含 🌿 有间充质干细胞,可用于治疗骨关 🦁 节炎等各种疾病。
5. 羊 ☘ 膜 🐛 液采集 🐵
羊膜液采集 🐼 涉及从怀孕妇女的羊膜 🕊 中收 🌷 集液体。
羊膜液富含胚胎干细胞,可用 🐋 于研究和治疗发育性疾 🐵 病。
提取 🕷 过 🐎 程 🌿 :
干 🌿 细胞提 🕊 取过程因方法而异,但 🦍 通常包括以下步骤:
采集样本:使用上述方法采集骨髓、外、周 🦢 、血脐带血脂肪组织或羊膜液。
分离干细胞:使用离心或其他技术将干细胞与其他细胞分离开 🐱 来 🌲 。
培养和扩增:将干细胞 🐈 培养在特殊培养 🌵 基中,使其生长和扩增。
冻存:提 🐋 取的干细胞可冷冻 🌹 保存以备今后使用。