干细胞如 🌾 何发现和提取 💮 （干细胞如何发现和提取物）
- 作者: 李知涵
- 来源: 投稿
- 2025-06-30
1、干细胞如何发现 🐳 和提取
干 🌷 细胞的发现
胚胎 🦈 干细胞：1981 年从人类胚胎中分离。
成体干细胞 🌵 ：1998 年从骨髓中分离。
干 🌿 细胞的提取方法
胚 🐋 胎 🌷 干细胞 🦉 ：
胚泡内细胞群（ICM）提 ☘ 取：从受精后的 56 天胚胎中取出 ICM。
裂解 💐 囊胚内部细胞群（ESC）提取：从受精后的 68 天囊胚中分离出 ESC。
成体 🕸 干细胞：
骨髓 🐋 抽取：从 🕊 髋骨或胸骨中提取骨 🐵 髓液。
脂肪组织抽吸：从腹部或大 🐱 腿等部位提取脂肪组织。
血 🌺 液抽取 🐺 ：从静脉中采集血 🪴 液。
胎盘组 💮 织采集：从分娩后 🕸 收集 🕊 胎盘。
脐带血 🦁 采集：从新生儿 🕸 脐带中收集血液。
提取过程胚胎干 💐 细 🌷 胞 🌷 ：
胚胎植入培养 🐞 皿并培养直至形成 🐟 囊胚。
使用微小仪器从囊 🐛 胚中取出 ICM 或 ESC，然后培养在特 🌹 制的培养 🦈 基中。
成 🌺 体干 🌾 细 🌿 胞：
抽 🌷 取 🐟 或采 🕊 集组织样本。
使用密度梯度离心或细胞分离技术将干细胞与其他细胞 🐒 分离。
培养在 💐 特制的培养基中 🐎 ，以扩增和 🐠 维持干细胞特性。
注意：干细 🐴 胞的提 🐬 取方法因具体干细胞 ☘ 类型和来源而异提取。过。程还需要符合严格的伦理和监管指南
2、干细胞如何发现 🌼 和提 🌾 取物
干细胞 🐎 的发现和 🐺 提取
发现：1961 年，James Till 和 Ernest McCulloch 发现骨髓中存在造血干细胞 🐧 。
1981 年，马 🐞 里奥 🐱 ·卡·佩奇和埃 🌲 文吉尔伯特发现小鼠胚胎中存在胚胎干细胞。
1998 年，詹姆斯·汤姆森和约 🐧 翰· gearhart 发现人类胚胎中存在胚胎干细胞。
2006 年，山中伸弥和山中伸弥 🪴 发现将体细胞 🌺 “重编程”为诱导多能干细胞 (iPSC) 的方法。
提取：胚胎干 🐛 细 🍁 胞 🐡 ：
从受精后 57 天的人类胚 🐵 胎 🐋 中提取。
涉及从胚胎中分离出内部细 🕷 胞 🌷 团。
成体干细 🌷 胞 🌷 ：
从各种组织中提取，包括骨髓、脐、带血脂肪组织和肌 🐶 肉。
涉及使用分离基于 🦁 细胞表面标记的方法，例如免疫磁性珠。
诱 🐱 导多能 🐠 干细 🌴 胞 (iPSCs)：
通过将体细胞（例如皮肤或血液细胞）重新编程为多能干细胞的状 🐟 态来产生。
涉及使用转录因 🐴 子或病毒载体将重编程基因整合到细胞中 🦢 。
提取过程步 🕊 骤：
1. 样本采集： 从适当的来源收集组织或细 🌷 胞。
2. 组织解离： 将固体组织分 💮 成单个细胞。
3. 细胞筛选： 使用细胞表面标 🌳 记或其他方法隔离干细胞。
4. 培养： 将干细胞置于 🐝 特殊的培养基中进 🌺 行培养和扩增 🕷 。
5. 单细胞 💮 克隆化 🌷 ： 分离单个干细胞并使其生长 🐠 成克隆细胞群体。
6. 鉴定： 使用分 🍀 子标 🕸 记和其他方法验证干细胞身份。
注意事项 🍀 ：
干 🐼 细 🐯 胞提取可能会因不同类型的干细胞 🐟 和来源而异。
使用胚胎干细胞涉及 🐱 伦 🦋 理考虑。
诱导多能 🦅 干细胞的重编程过程可能会导致遗 🐅 传异 ☘ 常。
3、干细胞如何提取 🦄 和 🐱 保存
干细胞 🐟 的提取
干细 🐵 胞的提取方法因干细胞类型而异，主要有以下几种：
胚胎干细 🌷 胞：
通过体外受 🍁 精过程获 🦁 得早期胚 ☘ 胎。
分离出内部 🐵 细胞团，这是胚 🦈 胎中包含干细胞的部位。
成人 🐳 干细胞：
从 💐 骨髓、脐、带血羊水和其他组织中提取。
使用抽吸法（骨 🐬 髓）、收（集法）脐 🐞 （带）血或组织活检其他组织进 🐡 行。
成人干细胞通常是多能 🌷 的，只 🐞 能分化为特定类型 💮 的细胞。
诱导多能 🌷 干细胞 🦅 (iPSC)：
从成 🐶 体细胞（例如皮肤细胞）中产生。
通过重新编程技术将其转化为具有与胚胎 🐶 干细胞相似的特性。
干细 🦟 胞的 🦆 保 🌸 存
提取 🌼 后的干细胞需要保存以 🌻 备将来使用。这可 🐡 以通过以下方法实现：
冷 🐟 冻 🦁 保存：
将干细胞悬浮在含有保护剂（例如 🌷 二甲基亚砜）的介 🐈 质中。
在极低温（196℃）下保存在液氮 🐼 中。
脱 🌲 水保存 🍁 ：
使用冷干燥或冰干燥去除干细胞中 🐬 的水分。
此方法可使 🪴 干细胞在 🌷 室温下保存长 🕊 达数年。
保 🐺 存 🐶 的限 🪴 制：
冷冻保 🪴 存可能导致干细胞损伤或死亡。
脱水保存会改 🌹 变 🦄 干细 🌷 胞的某些特性。
干细胞保存的成功取决于干 🌵 细胞的类型保存、方法和 🐒 存储条件。
4、干细胞提取方法 🐅 和设备
干细 🦢 胞提 🐞 取方法
1. 机械提 🐝 取 🐺 法 🌺
组织切片 🐋 法：将组织切成薄片，然后 🌻 使用锋利的刀片或镊子分离干 🌳 细胞。
离心法：将组织悬浮 🐝 液离心，分离，出不同密度和大小的细胞其 🐱 中 💐 干细胞往往位于特定层中。
2. 酶促消化法 🌿
胶原酶消化：使用胶原酶将细胞外基质消化分解，释放出 🐕 干细胞。
胰 🌿 蛋白酶消化：使 🌾 用胰蛋白酶消化细胞表面受体，将干细胞 🦋 与基质细胞分离。
3. 免疫磁 🦆 珠 🐯 分选法 🌸
抗体结合：使用抗体标记干细胞 🐕 表面特定的分子 🦄 标志物。
磁珠结 🌷 合：抗体与连接有磁珠的二抗体结合，使干细 🐦 胞吸附在磁珠上 🐝 。
磁分离 🐒 ：将磁珠与悬浮液中的其他细胞分离 🐠 。
4. FACS 分选法（荧光激活细胞分 🌿 选）
荧光标记：使用荧光抗体 🐛 标记干细胞表面标志物。
激光照射：使 🐧 用 🌸 激光照射细胞悬浮液，荧光标记的干细胞被激活。
电荷偏转：根据荧光标记的强度，将干细胞 🌷 偏转到特定的收集管中。
干细 🌺 胞提 🌿 取 🦈 设备
1. 组 🐦 织 🐺 切片机
振动切片机：使用高频振动切断组织，产生 🐦 薄片。
旋转切片机：使用旋转刀片切断组织用 🐠 ，于制备更厚切片。
2. 离 🦋 心 🐅 机 🐝
台式离心机：用于分离小 🌴 体积的 🐠 细胞悬浮液。
管 💮 式离心机：用于分离大体积的细胞悬浮 🦁 液，提取干细胞与细胞 🌸 外基质的分离。
3. 免 🌺 疫磁 🌼 珠分选仪 🌺
管式磁珠分选仪：使用磁力将标记有磁珠的干细胞 🐺 从悬浮液中分离。
柱式磁珠分选仪：通过柱子 🐦 收集和洗涤标记 🐦 有磁珠的干细胞。
4. FACS 分 🐝 选仪 🕊
单激光 FACS 分选 🦆 仪：使用单个激光检测 🦆 细胞 🐅 特征并进行分选。
多激光 FACS 分选仪：使用多个激光同时检 🦁 测多个细胞特征，实现更精细的分选。
