肿瘤干细胞贴壁培养 🐟 （肿瘤 🐎 干细胞贴壁培养多少钱）
- 作者: 朱学屹
- 来源: 投稿
- 2025-08-26
1、肿 💐 瘤干细胞贴壁 🐶 培养
肿 🍀 瘤干细胞 🐠 贴壁培养
肿瘤干细胞 (CSC) 是具有自更新、多向分化和耐药性的特殊细胞亚群。贴壁 🐴 培养是建立 CSC 体。外模型 🐋 的常用方法
贴壁培 🌾 养步骤：
1. 分离 CSC：从肿瘤组织 🐘 或细胞系中提取 CSC，常用的方法包括分选表面标记物（如或 CD44、CD133）荧光激活细胞分选（FACS）。
2. 培养基选择选择：合适的培养基非常 🌻 重要，通常含有生长因子（如 EGF、FGF）和（抑制因子 🦅 如抑制 Rock 剂的）富含血清的培养基可促进的 CSC 贴壁和生长。
3. 细胞培养：将分离的 CSC 种植在预 🕊 先包被胶原或 Matrigel 等 🌲 基质的细胞培养瓶中培养瓶。应放置在的培养 37°C、5% CO2 箱中。
4. 贴壁培养 🌿 ：CSC 通常需要 12 周才能贴壁。在贴壁过程中需，定。期更换培养基以去除未贴壁的细胞
5. 形成类肿瘤球: 贴壁后的 🐯 CSC 会形 🌵 成类肿瘤球球（状克隆），这表明具有自更新和分化潜 🐋 能。
注 🦢 意事 🦅 项：
细胞 🐧 密度：接种密度应 🌲 足够低，以允许类肿瘤球的形成。
培养基更 🌿 换：定期 🐞 更换培养基以保持无菌环境并补充营养物质。
污染检测：定期监测污染，并采取适当的措施进行预 🐠 防和控制。
培养时间培养 🌴 时间 🌺 ：应根据特定的 CSC 类 🐼 型和实验要求而定。
微环境：体外的 🌴 培养环 ☘ 境可能与体内不同，因此应尝试模拟肿瘤微环境（例，如添加细胞因子或基质）。
通过贴壁培养，可以建立可用于研究 CSC 特性、靶 🐠 向治疗和耐药性的 ☘ 体外模型。
2、肿瘤干细胞贴壁培养多少钱 🌵
肿瘤 🦅 干细胞贴壁培养的费用可能会根据实验室、所使用的 🐛 培养基和试剂以及培养的规模等因素而有所不同以。下是一些估计值：
基 🐝 础费用：
培养皿 🌳 ：1050 美元
培 🐳 养基：50200 美元 🕊 /升
血清（如 🌻 果需要）：100500 美元/500 毫 🦈 升
其 🐯 他费 🌹 用 🌴 ：
细 🐱 胞： 美元/百 🐒 万个细胞
培 🐒 养添加剂（例如生长因子或抗生 🐡 素）：50200 美元/管
培养 🦋 箱 🕊 ： 美元（用于长期培养）
实验室耗材（如移 🐧 液器、吸头 🌻 ）：100500 美元 🌲
人工成本：这 🦁 将取决于实验室的位置和研究人员的经验。
估计 🐵 总 🐵 成本：
小规模培养（10 万个细 🕷 胞）： 美元
中 🐝 规模培养（100 万个细胞）： 美 🐟 元 🐯
大规 🌲 模培养（1000 万个细胞）： 美元以上
请注意，这，些只是估计值实际成本可能会有所不同。为，了。获得更准确的报价建议您直接 🐵 联系细胞培养实 🌲 验室或服务提供商
3、肿瘤干 🌳 细胞贴壁培养方法
肿瘤干细胞贴壁 🌲 培养 🍀 方 🐞 法
材料：无血清 🌺 培养基：DMEM/F12 或 RPMI 1640
补充剂 🦁 ：B27（1%）、N2（1%）、EGF（20 ng/ml）、bFGF（20 ng/ml）
贴 🍀 壁培养基：无血清培 🦆 养 🐛 基 + Matrigel
Matrigel
培 🐳 养 🐟 皿或培养瓶 🦅
移 🕊 液器和枪头
细 🌷 胞刮 🌵 板
助吸器步骤：
1. Matrigel 覆盖培养皿/瓶 🐎
在细胞培养皿 🦅 或培养瓶 🐠 中铺一 🌾 层薄いMatrigel。
放置在 🐒 室温下 1 小时 🍀 以使其聚合。
2. 准备细胞悬浮 🦄 液
从培养物中收集肿瘤 🌷 干细胞并 🌴 制成细胞悬浮液。
细胞浓度应为 1 x 10^5 2 x 10^6 个细 🦍 胞/ml。
3. 接 🐧 种 🐞 细胞 🦍
将细胞悬浮液接种到 Matrigel 覆盖的 🐶 培养 🐎 皿或培养瓶中。
每口径 🦉 6 厘米的 🌼 培养皿接种 25 x 10^5 个细胞。
每瓶 75 cm2 的培养瓶接种 💮 12 x 10^6 个 🐟 细 🦈 胞。
4. 培 🪴 养 🌴
将培养皿 🐼 或培养瓶置于 37°C、5% CO2 的培养箱中进行培养。
每 🦋 隔 23 天更换培养基。
5. 传 🦊 代
当细胞达到 8090% 的汇合度时，应进行 🌴 传代。
使用细胞刮板将 🐴 细胞从培养皿或培养瓶中 🐶 刮除。
收集刮下 🌷 的细胞并离心 🐶 。
重悬细胞于新鲜 🐡 的贴壁培养基中进行传代。
注 💐 意事 🕷 项：
Matrigel 的浓度和厚度会 🌷 影响细胞的贴壁和生长。
培养基应定期更换以去 🐈 除废物和补充 🦆 营养。
避免过度传代，因 🕸 为这可能导致细胞 🐛 特性发生改变。
在无菌条件下进行所有操 🍁 作以防止污染 🌹 。
4、肿瘤干 🦟 细胞 🦄 niche
肿瘤 🐟 干细胞利 🕷 基
肿瘤干细胞利基是指 🌲 肿瘤微环境中一个特定的区域，能够维持和支持肿瘤干细胞的（CSC）自我更新、增殖和分化是。CSC 具，有干细胞。样特性的恶性细胞是癌症复发和耐药的主要原因
利基成分肿瘤干细 🐶 胞利基通 🕊 常由以下成分组成：
细胞外基质 (ECM)：包括胶原蛋白、纤、维蛋白透明质酸等成分，为 CSC 提供 🌺 结构支持和信号传导。
成 💐 纤维细胞和内皮细胞：分泌生长因子细胞因子和、其他分子，支 🐘 持 CSC 的存活 🐼 和增殖。
炎症细胞：如巨噬细 🦁 胞和中性粒细胞，分，泌细胞因子和趋化因子调节利基微环境。
神经细 🐠 胞和神经递质：调节利基内的血管生成和 🐵 细胞迁移 🐝 。
利基功能肿瘤干细胞 🌵 利基为 ☘ CSC 提供 🕊 以下功能：
自我更新： CSC 通过对称分裂保持它们的干细胞性，从而产生新 ☘ 的 CSC。
增殖： CSC 能够快速增殖，产生大量肿 🕸 瘤细胞。
分化： 在适当 🐴 的信号传导 🐡 下，CSC 可以分化为具有不同表型的肿瘤 🦁 细胞。
保护： 利基通过产生细胞因子和 ECM 成分保护，免 CSC 受化学疗法和放疗 🐶 等外部攻击。
靶向治疗靶向肿瘤干细胞利 🦊 基是癌症治疗的一 🦅 种有前途的策略。通过破坏利基或抑制其与的 CSC 相互作用，可 CSC 以 🐅 。抑制的功能和肿瘤生长
靶向策略 🦈 包括：
靶向 ECM 成 🌵 分
抑制 CSC 与成纤维细胞或内皮细胞 🐼 的相 🐎 互作用
调 🐯 节炎 🌵 症反 🌸 应
抑制神 🐠 经信号传 🍁 导
通过靶 🐱 向肿瘤干细胞利基 🦈 ，有可能开发更有效和持久的 🌺 癌症疗法。
