干细胞产品工艺验证（干细胞制剂 🪴 制备与质检行业标准(试行)）

1、干细 🐅 胞产品工艺验证 🌻

干 🦁 细胞产 🦢 品工艺 🍁 验证

干细胞 🌷 产品工艺验证是通过系 🐈 统地收集和评估数据，以证明干细胞产品制造工艺的持续有效性 🌾 和一致性。

确保干细胞 🐳 产品的安全性、有效性和质量

满足法 🐋 规 🐼 要求 🌼

为 🐈 临床试验和商业生产提供基础

1.工艺设计和 🐅 开发

定义工 🦍 艺步 🕊 骤和关键参 🦉 数

优化工艺参数以实现所需 🍀 产 🌺 品特征

2.工艺 🌷 表 🐦 征 🍁

使用分析方法表征产品关 🌿 键质量属性（CQA）

确定关键工艺参 🐛 数的 🦊 影 🐵 响

建 🌷 立工艺控 🐶 制限值

3.工艺验 🕊 证 🦈

运行多个工 🌹 艺 🦈 验证 🌿 批次

收集数据以评估工艺的可靠 🐛 性和一致 🐼 性

验证工艺能够生产符合规 🦁 范的产品

4.持续过程 🐎 验证

定期监 🦁 测工艺性能

进行趋 🐞 势分析以检测工艺变化

根据需 🐘 要 🌹 调整工艺参 🦢 数

5.验证方法和 🐶 标准

验 🐞 证用于工艺表征和验证 🦁 的 🦁 分析方法和标准

确保数据的准确性和 🐅 可靠性

6.质量管理 🐡 体系

建立质 🌳 量管理体 🌳 系以支 🐋 持工艺验证

实施 🦁 工艺控制程序和纠正 🦉 措施

7.法 🐺 规要求

遵循适用 🐦 于干细胞产品的法规要求，例如 ICH Q10 和法规 GMP

提高产品 🐎 安全性、有效性和质 🦁 量

减少 🦋 临床试验 ☘ 风 🦊 险

加 🕸 速商 🌷 业化

增强对监管机构和公 🌾 众的信心

2、干细胞 🐟 制剂制备与质检行业标准(试行)

干细胞制剂制备与 🦍 质检 🐧 行业标准（试行）

本标准规定了干细胞制剂的制 🌳 备和质检的要求。

2 规范性 🐈 引用 🐘 文件 🦁

下列文件对于本文件至关重要。凡是注日期的引用文 🦉 件，其 🐴 随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或，修。订，版。均不适用于本文件鼓励各方研究是否可使用这些文件的最新版本凡是不注日期的引用文件其最新版本适用于本文件 🍁

GB/T 医用敷 🦢 料术 🌾 语 🌸

GB/T 医用高分子材料生物相容性 🕊 评价试验方法 🌵

GB/T /ISO9001：2008 质 量 🐼 管理体系要求 🐴

GB/T 医用 🌾 敷料 🐟 产品标签 🐱 通则

YY/T 医疗 🐠 器械生物安全性评 🌲 价通则

YY/T 干细胞制剂 🦊 的储存和运输

YY/T 干细胞制剂的细胞培养 🪴

YY/T 干 🐕 细胞的 🦅 鉴定

3 术语 🦍 和定义

干细胞制剂 💐

经由体外 🐒 培养、分、离筛选等技术手段获得的外源性细胞或组织，在一定 🐎 条件 🐞 下具有分化或转化为特定细胞类型或组织的潜能。

自 🌳 体干细胞制 ☘ 剂 🦉

取材自患者自身并经培养或处 🕊 理后回输至患者本人 🌼 的干细胞制剂。

异 🐯 体干 🌴 细胞制剂

取材 💐 自他人并用于治疗 🐺 患者的干细胞制剂。

间充质 🐋 干细 🐳 胞 🦟

来源广泛的干细胞 🐡 ，具有成骨成、软骨成、脂肪分化潜能。

胚 🐦 胎干细胞 🐒

来源于发育中的胚胎内部细胞团的细 🌳 胞，具有高 🍀 度自我更新 🌴 能力和多种分化潜能。

诱导 🌾 多能干 🐅 细胞（iPSC）

由成体细胞重编程而来，具有与胚胎干 🌳 细胞类似的自我更 🦊 新能力和多分化 🍁 潜能的细胞。

4 质量 🦁 管理 🌺 体系要求

参照GB/T /ISO9001：2008建立质量管理体 ☘ 系。

质量管理 🐕 体系应包括：

a) 组织机构 🐬 和 🦅 职 🐺 责；

b) 文 🍁 件 🍁 控制 🐠 ；

c) 采 🐶 购 🐺 ；

d) 人员 🐞 培 🌹 训 🌲 ；

e) 产操作过程控制 🐋 ；

f) 检验 🦉 和测试设备控制；

g) 不合 🌻 格品 🦅 的控制 🕊 ；

h) 纠正 🐵 措施、预防措施和持 🐳 续改 🦆 进。

5 无 🐯 菌操 🌹 作 🐎 要求

5.1 无菌 🌼 操作原则

a) 所有无 🐼 菌操作 🐱 应在符合生物安全要 🦉 求的专用无菌区进行。

b) 操作人员应接受无菌操作训练，并严格执行无菌操 💐 作规程。

5.2 无菌 🦢 区管理

a) 无菌区应与外界环 🐶 境隔离，并保持一定的正压。

b) 无菌区应定期进行空气微生物监测监测，指标应符合相关标准 🐱 要求。

5.3 无菌操作技术 🐡

a) 操作人员应穿戴无菌工作服 🐼 、手、套口 🐈 罩等个人防护装备。

b) 培养基 🌿 、试剂等材料应经过灭 🌲 菌处理。

c) 操作台面应进行消毒 🐋 处 🐬 理。

6 干细 🐦 胞制 🍁 备 🌺

6.1 起始细 🕷 胞的获取

6.1.1 自体 🌵 干细胞制 🐳 备

a) 患 🐯 者知 🌻 情同意 🐶 后，按无菌操作要求采集细胞源。

b) 采 🦉 集的细 🌳 胞源应及时运送至加工机构。

6.1.2 异体干细 ☘ 胞制备

a) 干细胞 🐅 应来自 🐠 合格 🐳 的供体。

b) 干 🌼 细胞的采集、加工和保存 🌸 应符合相 🌺 关标准要求。

6.2 细胞分离 🦋 、纯化和培 💐 养

a) 参照YY/T 进行细胞分离、纯化 🌼 和培养。

b) 培养基和培养条 🦈 件应 🦈 经验证并符合干细胞生长和分化的要求。

6.3 细 🐈 胞鉴定

参照 💐 YY/T 进 🌴 行细 🐛 胞鉴定。

7 干细 🐦 胞 🌹 质检 ☘

7.1 无 🐵 菌 🐠 检 🐠 测

参照相关标准要求 🐟 进行无菌检测，确认干细胞 🌳 制剂无细菌 🌹 、真菌污染。

7.2 生物安全 🦈 性评价

参照YY/T 进行生物安全性评价评，估 🐱 干细胞制剂的安全性。

7.3 细胞活 🐒 力检测

检 💮 测干细胞制剂中的活细胞比例，保证干细胞具有足够的 🍀 活 🐼 性。

7.4 分化潜能 🐼 评价 🐶

参照相关标准要求进行分化潜能评价，确认干细胞具 🐵 有预期的分化能力。

7.5 遗传稳定性 🌵 评价 🐈

参照相关标准 🐠 要求进行遗传稳定性评价评，估干细胞制剂在体外培 🐯 养过程中是否发生遗传物质的改变。

8 干 🦉 细胞制剂 🌺 储 🦄 存和运输

8.1 储 🌹 存 🐟

参照YY/T 进行干细胞制 🦟 剂储存，确保干细胞活性 🌺 得到维持。

8.2 运 🦊 输

参照YY/T 进行干细胞制剂运输 💐 ，确保干 🐦 细胞在运输过程中保持活性。

9 标 🍁 签 🦈 标识 🌾

9.1 干细胞制剂的标 🦢 签应包 🕊 括 🍀 ：

a) 制剂 🐘 名称 🐱 ；

b) 制剂类型（自体或异体 🐎 ）；

c) 干细 🐎 胞来源；

d) 细胞数 🐅 量 🍀 ；

e) 培养 🕸 条件；

f) 有 🐠 效 🌲 期 🌳 ；

g) 储存 🐕 条件；

h) 运输条 🐅 件 🕷 ；

i) 警告和注 🐠 意 🌻 事项；

j) 生 🐬 产商名称和地址。

9.2 标签应 🌺 清晰、准、确 🐴 不易脱落或损坏。

3、干细胞生 🐧 产工艺流程图

干细胞生产工艺 🦊 流程图

1. 干细 🦈 胞 🐴 来 🌻 源

人体组织（脐带 🦊 血、骨、髓脂肪组织等）

2. 组织 🦍 收 🐟 集和加工

收集和运 🌸 输供体组织

分离和纯化所需细胞类型 🌵

3. 细胞 🐱 培养

在受控条 🌳 件下 🐟 培养干细胞，促进其增殖 🐧 和分化

使用 🕊 特定的培养基、生长因子和环境因素

4. 质量控制 🐯

定期监测培养 🐵 物的健康状况、生长速率和形态

进行遗 🌺 传和微生物 🪴 测试以确保安 🦈 全性

5. 干细 🐒 胞扩 🐒 增 🌺

通过细胞 🌸 传代来扩 🪴 大干细胞数量 🦈

使用生物 🦉 反应器或其他放大系统

6. 分 🦈 化 🌺

在特定条件下培 🐬 养干细胞以分化为所需细胞类型 🐛

使用生长因 🐬 子、转录因子或 🌼 其 ☘ 他诱导物

7. 产品 🐦 表征

对分化细胞进行表征，以确认其身份 🪴 、功能和安全性

使用流式细胞术、免、疫组化功能分 🐋 析等技术

8. 制 🌵 剂 🐎

根据临床应用 🦟 准备最终产品

包括浓缩 🦊 、冻存和运输

9. 质量 ☘ 控 🐘 制

对最终产品进行最终质 🦊 量控制 🐦 ，以确保其符合安全 🐦 性和功效标准

10. 储 🌳 存和 🐦 运输

将产品冷藏 🌺 或 ☘ 冷冻储 🦈 存，以维持其活力

建立有效的运输和分销系统，以 🌲 确保产 🌻 品安全性和完整性

4、干细胞制 🌷 备质检方法 ☘

干细胞制备 🐼 质检方法

微生 🍁 物培养（细菌、真菌和支原体）

内毒素 🐳 检测

细胞形态学 🦈 评估

显 🐺 微镜观 🦈 察观察 🐛 （细胞形态、大小和饱满度）

流式细胞术（评估细胞表面 🐧 标 🌸 志物表达）

细胞活力和增殖 🌷 评估

三苯 🌺 基甲基四唑 🦅 溴化物 🐘 (MTT) 测定（评估细胞活力）

细胞计数（评估细 🐈 胞增 🐠 殖）

分化潜能 🦁 评 🌲 估

免疫表型分析（评估细胞表面和细胞内标 🦢 志物的表达）

功能测 🐡 定（评估细胞在特 🐈 定条件下的功能，例如分化成特定细 🐺 胞类型）

遗传 🐋 稳定 🐈 性评 🐝 估

染色体核型 🦈 分析（检测染 🌳 色 🦟 体异常）

短串联重复序列 (STR) 分析（识别和比 🦈 较细胞 🐠 系的身份 🌵 ）

其他质 🐼 检方法

免疫原性评估评估：细胞对免疫系统的 ☘ 潜在反应 ☘

致瘤性 🐦 评估评估：细 🐧 胞在免疫缺陷小鼠中的成 🌼 瘤能力

基因表达分 🐅 析：评估与细胞功能 🐈 相关的特定基因的表达水平

粘附 🐵 和迁移评估评估：细胞附着和迁移的特性

端粒长度分析 🕊 ：评估 🐒 细胞的复制潜能

质 🌺 控 🌵 合 🦄 格标准

合格 🦄 的干细胞应 🍁 满足 🌲 以下质控标准：

形态学正常 🦢

高 🌸 细胞活力和增殖率

具有预 🌴 期分化 🌿 潜能

遗传稳 🌼 定

无免疫原性和致瘤性 🌻

符合特定的应用 🦟 要求 ☘