干细胞培养溶液配方（干细胞培养 🍀 溶液配方大 🐋 全）
- 作者: 王希柠
- 来源: 投稿
- 2025-08-27
1、干细 🐞 胞培养 🪴 溶液配方
基本干细胞培养溶 🦉 液（DMEM/F12）
DMEM（高葡 🐵 萄 🦁 糖 🐝 ）：440 mL
F12：560 mL
L谷氨 🦋 酰 🦋 胺（200 mM）：5 mL
补充剂FBS（胎牛血 🐘 清）：100 mL
青霉 🐬 素链霉素溶液（100x）：5 mL
β巯基乙醇 🦈 ：0.1 mL
可选成分NEAA（非 🐳 必需氨 🌷 基 🐦 酸）：10 mL
HEPES 缓 🐦 冲 🍁 液 🐴 （1 M）：5 mL
使用说明1. 在无 🌿 菌条件下混 🐵 合 🌾 所有成分。
2. 将溶液过滤 🌷 灭菌过 🌿 滤（0.22 μm 器）。
3. 储存溶液 ☘ 于 4°C。使。用前温 🐼 至室温
注意FBS 的 🐡 百分比可以根据细胞类型而调整 🐱 。
根据需要可以添加其他生长因子或补充 🪴 剂。
培养条件（pH 值、温度和 🐋 CO2 浓度）因细胞类 🌼 型而异。
定期 🦢 更换培养液 🦁 以维持最 🐯 佳生长条件。
2、干细胞培 🌼 养 💐 溶液配方大全
干细 🌷 胞培养溶液配方大全
基 🪴 本培养 🌿 基 🕸
Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM)
Roswell Park Memorial Institute (RPMI) 1640
Iscove's Modified Dulbecco's Medium (IMDM)
生长因子和 🌲 补 🐠 充剂
白血病抑制 🐡 因子 (LIF)
基本成纤维细 🐳 胞生长因 🦟 子 🌸 (bFGF)
表皮 🕊 生 🦁 长 🕸 因子 (EGF)
转化 🐴 生 🦉 长因 🐳 子β (TGFβ)
B27 补 🐎 充 💮 剂 🕸
N2 补充剂 🐞
神经生 🐡 长因子 (NGF)
脑源性神经 🐡 营养因子 🍁 (BDNF)
血清胎 🦁 牛血 🍁 清 🐬 (FBS)
人 🐠 血 🦍 清 🌾 (HS)
小牛血 🐕 清 (CS)
抗生素和 🐈 抗真菌剂 🐛
青霉素 🌷 /链霉 🪴 素
吉布素营养液 🐕
安 🦈 非 🐞 特里辛 🌲 B
常用配方人 🐦 胚 🦋 胎干细胞 (hESC)
基 🌼 础 🐝 培养基 🦢 ：DMEM/F12
生 🕊 长因子 🐅 ：bFGF (4 ng/mL)
补充剂补充 🐈 剂：B27 (2%)
血 🐒 清 🦆 ：KOSR (20%)
诱导多能干细胞 🦅 (iPSC)
基 🌴 础培养 🦆 基 🐳 ：DMEM/F12
生长 🌷 因 🦅 子：LIF (10 ng/mL)、bFGF (4 ng/mL)
补 🌿 充剂补 🐎 充剂：B27 (2%)
血 🦅 清 🌸 ：KOSR (20%)
间充质干 🦊 细胞 (MSC)
基 🐕 础培养基 🐺 ：DMEM
生长因 🌻 子：bFGF (10 ng/mL)
补 🦊 充 🐘 剂：FBS (10%)
抗生素 🐺 ：青霉素/链霉素 🌿
神经 🐝 干细 🐼 胞 (NSC)
基础 🦢 培 💐 养基：DMEM/F12
生 🐧 长 🐧 因子 🐺 ：EGF (20 ng/mL)、bFGF (20 ng/mL)
补 🕸 充剂补充剂 🌷 ：N2 (1%)
血 🐠 清 🦊 ：FBS (2%)
注意：这些配方仅供参考，具体 🌸 配方可能因干细胞类型、实验目的和其他因素而异。
3、干细胞培养溶液配 💮 方比例
基 🐅 本 🦟 干 🐈 细胞培养溶液
Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM)
DMEM (含 🌲 葡萄糖 💐 和 L谷氨酰 🦁 胺)
10% 胎牛血清 🌼 (FBS)
1% 青 🦊 霉素链霉素 🕊 溶液
最 🐛 小 essenziale 培养 🌳 基 (MEM)
MEM (含 🌲 葡萄糖 🐘 和 L谷氨酰 🐳 胺)
10% 胎 🌸 牛血清 (FBS)
1% 青霉素链 🐧 霉素溶液
特殊干细 🐶 胞 🪴 类型 🐧
胚 🌳 胎 🦊 干 🕷 细胞 (ESC)
ESC 培 🐝 养 🌷 基 🦅 ：DMEM/F12（1:1）
1520% KSR 去脂胎 🐦 牛 🐕 血清 🌵
0.05 mM β巯 🦉 基乙 🦢 醇
10 ng/ml 人 🌲 重组碱性成纤维细胞生 🐟 长因子 🐶 (bFGF)
诱 🐛 导多能干细 🌳 胞 (iPSC)
iPSC 培养 🌻 基：DMEM/F12（1:1）
10% FBS
1% 青霉素链霉素 🦋 溶液 🍁
10 ng/ml 人 🐡 重 🦁 组 🐳 bFGF
造血干细 🐵 胞 (HSC)
HSC 培 🐅 养 🐶 基 🕊 ：αMEM
12% FBS
1% 青霉 🐡 素链霉素溶液
10 ng/ml 人重组白细胞 🐱 介素 🌴 3 (IL3)
其他 🐟 添加 🌺 剂
生 🐅 长因子：如上所 🦉 述的 bFGF 和 IL3。
抗生素：如青霉素、链霉 🕸 素。
抗真菌剂：如安福特利 🌼 素 B。
非必需氨基 🕷 酸：如谷氨酸、丙氨酸。
脂质体：如 🐶 胆固 🐧 醇、磷脂酰乙醇胺。
注意事项胎牛血清的来源和批 🦄 次可能会影响培养物 🦍 的生长和分化。建议使用来自同一批次的 FBS。
培 🦉 养基的 🌴 pH 值应保持在 7.27.4 之间。
培养基 🐼 应每 23 天更换一次，或根据 🌸 细胞的生长速率。
培养基应存储在 4℃ 至 🐝 8℃ 的冰 ☘ 箱中，使用 🐋 前应预热至 37℃。
4、干细胞 🌿 培养溶液配方表
干细胞培 🐒 养溶液配方表 🐬
基础培养基 🕷 ：
Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM)
10% 胎 🌲 牛血清 (FBS)
1% 青霉素 🐈 /链霉 🐴 素
2mM L谷氨酰胺 🍀
添加 🕊 剂（根据 🦟 需要 🐧 ）：
生长 🌺 因子：
人类表 🌴 皮生 🐶 长因子 (EGF)
碱性成纤维细胞生 🦆 长因 🦢 子 (bFGF)
神经生长 🐬 因子 🐛 (NGF)
血小板衍生生长 🌷 因 🦍 子 🐺 (PDGF)
细 🦢 胞因 🐈 子 🦅 ：
白 🐛 细胞 🌻 介 ☘ 素6 (IL6)
干 🐯 扰 💮 素 ☘ γ (IFNγ)
肿瘤坏死因 🦈 子 🌷 α (TNFα)
抗生素：青霉素
链霉素
其他：
非必 🌸 需氨基 🐛 酸 🐈
维生素β巯 🐎 基 🕊 乙醇 🐞
详 🦄 细配方：
基 🦍 础培养基 🦄 (500ml)：
DMEM：450ml
FBS：50ml
青霉 🌾 素/链 🐳 霉素：5ml
L谷氨酰 🦍 胺：10ml
添 💐 加剂（每 500ml 基础 🦢 培养基）：
EGF：10ng/ml
bFGF：20ng/ml
非 🐈 必 🐝 需氨基酸 🐎 ：10ml
维 🐋 生 🌼 素 🌸 ：5ml
β巯基 🐯 乙醇：5μl
制 🦅 备 🌷 说 🐡 明：
1. 无菌条件 💐 下将所有 🦆 成分混合 🪴 。
2. 过滤溶 🐯 液以去除颗粒。
3. 分配到 🐅 无 🐵 菌容 💐 器中。
4. 储 🦍 存溶 🌴 液于 4°C。
注意事项 💮 ：
培 🐠 养基配方 🌹 可能会因特定的干细胞类型而异。
始 🐴 终使用无菌技术来制 🐠 备培养基溶液 🌺 。
定 🐡 期过滤溶液以去除任何沉淀或污染物。
废 🦉 弃超过 2 周的培养基溶液 🦄 。
