羊膜干细胞的提取方 🐼 法（羊膜干细胞和间充质干细胞的区别）
- 作者: 郭闻中
- 来源: 投稿
- 2025-10-07
1、羊膜干细胞 🐼 的提取方法
羊膜干细胞的提取 🌾 方 🐕 法
羊膜干细 🪴 胞是一种多能干细胞，存在于羊膜 🐟 中。以下是提取羊膜干细胞的方法：
材 🦅 料准 🌾 备：
健康羊 🐵 膜（从 Cesarean 分娩中获 🐘 得 🌵 ）
无菌器械 💮 （镊子 💐 、剪、刀 🐬 离心管）
生 🌸 理盐 🦅 水 🐵 溶液
羊 🌷 膜 🐘 细胞培养液 🐼
步骤：1. 羊膜 🌸 组织收 🐈 集 🐼
从羊膜囊中小 🌾 心分离羊膜。
使用无菌镊子将羊膜平铺在无菌 🐅 表面上。
2. 羊膜 🐧 组 🦋 织 🌳 消化
使用 🐅 无菌剪刀将羊膜切成小块 🌼 。
将羊膜小块转移到装有生理盐水溶液的离 🐼 心管中。
添加胶原酶消 🐛 化液 💐 ，并轻轻 🐶 混合。
在 37°C 下孵 🌼 育 12 小时，直至羊 🦅 膜组 🌷 织完全消化。
3. 离心分 🦁 离干细 🐼 胞
消化后的 🍁 羊膜溶液离心 10 分钟，1200 rpm。
小心弃去上清 ☘ 液 🐞 。
用生理 🌳 盐水溶液重新悬浮沉淀 🌲 物 🌲 ，然后再次离心。
4. 去除红细 💐 胞
将沉淀物转 🦋 移到装有红细胞裂解液的离心管中 🌺 。
轻柔地混 🐠 匀并孵育 10 分钟。
再 🦢 次离心 5 分钟，1500 rpm。
5. 培养 🌿 羊膜 🕊 干细 🐵 胞
小心弃去上清液，将细胞沉淀物转移到含有羊 🦊 膜细胞培 🌴 养液的培养皿中。
在 37°C、5% CO2 的 🕊 条件下培养细 🐕 胞。
培养 🍀 条 🐱 件 🌼 ：
羊膜干细胞培养在含 🐅 有 EGF、bFGF 等生 🌾 长因子的特异性羊膜细胞培养 🦉 液中。
培 🌺 养 🦊 基每 23 天更换一 🌾 次。
验证：通过流式细胞 🐵 术或免疫荧 🐠 光染色分析羊膜干细胞标记，如 SSEA4、OCT4、NANOG。
在体外分化测 🦟 试中评估 🐧 多能 🌲 性。
注 🌻 意 🐒 事项：
整个 🌾 提取过程必须在无菌条件下进行。
羊膜组织应从健 🕊 康怀孕中获得 🌹 ，并 🦆 经过适当的筛查。
使用的高质 🐠 量培养基和生长因 🐧 子对于培 🐳 养羊膜干细胞至关重要。
遵循提取 🐱 和培养协议的准确步 🦅 骤对于获得高质量的羊 🐡 膜干细胞至关重要。
2、羊膜干细胞 🌸 和间充质干细 🐦 胞的区别
羊膜干细 🌴 胞 🐎 (AMSC)
起源于 🐺 羊膜，为胎 🌹 盘的一 🐺 部分。
多能 🐶 干细胞，具，有分化 🌸 为多种细胞类型的潜力包括成骨细胞、软骨细胞和神 🦅 经元。
具 🐒 有免疫调节特性，可抑制免疫反应。
分泌多 🌷 种生长因子和细胞因子，促 🦢 进组织修复和再 🦟 生。
间 🐎 充 🍁 质干细 🐯 胞 (MSC)
起源于间充质组织，如骨髓、脂 🍀 肪组织和 🐵 胎盘 🦅 。
多能干细胞，但分化潜力较羊膜干细胞 🦁 低。
主 🦉 要分化为成骨细胞、软骨细胞和脂肪细胞。
具有 🌸 免疫调节特性，但不如羊 🌵 膜干细 🐱 胞强。
分泌生 🌾 长因 🪴 子和细胞因子，促 🍀 进组织修复和再生。
主要区别| 特征 | 羊 | 膜 🌳 |干 🐒 细胞间充质干细胞
||||| 起源 | 羊 | 膜 |间充 🐧 质组织 🐶
| 分化潜力 🐧 | 多能 🐅 ，较 | 高多能，较 🦍 |低
| 免疫调节 | 强，抑 | 制免疫，反 |应中 🐳 等调节免疫反应
| 来源 | 胎 | 盘 🐒 骨髓 🌴 、脂、肪 |组织胎盘
| 分泌 🌳 因子 🐕 | 多 | 种 |生长 🌿 因子和细胞因子生长因子和细胞因子
| 再生潜力 | 高，可 | 修，复多种组织中等主要修 🐼 复骨 🐎 骼、软 |骨和脂肪组织
应用羊膜干细胞：再生医学（如伤口愈合、软骨损伤修复）、免（疫调节如 🐕 炎症性疾病治疗）。
间充质干细胞：骨骼再生（如骨折修复）、软骨再生（如骨）、关（节炎治疗脂肪组织再生如填充物和组织工 🐟 程 🐴 ）。
3、羊膜干细 🐠 胞的提取方 💐 法有哪些
羊 🌲 膜干 🌳 细胞的提 🐱 取方法
羊膜干细 🐴 胞可 🐶 从羊膜中提取，有几种不同的方法：
1. 酶消化法 🐧
羊膜被机械性分离并 🐬 置于含有胶原酶或其 🦢 他酶的溶液中 ☘ 。
酶降解羊膜细胞外的 🐡 基 🦉 质，释放干细胞。
干 🌲 细 🐦 胞通过 🐴 离心收集。
2. 机 ☘ 械 🐦 剥离法 🦟
羊膜被从羊膜绒毛膜 🍀 上剥离。
剥离可以 🐧 通过手工 🐕 或使用机械设备进行。
干细胞从 🐠 剥离的羊膜中收集 🦁 。
3. 组织培 🌷 养分 🐕 离法
羊 🐘 膜碎块 🦊 被接种在组织培养皿中。
干细胞从 🪴 外植体中迁移 🌾 到培养基中。
干细胞通过离心 🐘 收集。
4. 密 🦊 度梯度离心 🐵 法 🌸
羊膜组织被均匀化并加 🌷 载到密度梯 🐼 度液 🐵 中。
干细 🌿 胞根据其密 🪴 度迁移 🍁 到梯度中的不同层。
干细胞通过 🐕 小心收 🐈 集来分离。
5. 免疫磁珠分 🐱 离法 🍀
羊膜 🕊 组织被消化并与标记特定 🍀 表面标 🌴 志物的磁珠孵育。
干 🐟 细胞与磁珠结 🦄 合。
使用磁场将结 🦅 合有干细胞的磁珠 ☘ 分离出来。
6. 微流控芯片 🍀 法 🦅
羊膜组织被处理 🐬 并加载到微流 🌾 控芯片中。
干细胞根据其大小、可塑性和其他特性进行分离 🦋 。
提取后 🐴 的细 🌾 胞培 🍁 养
提取的羊膜干细胞通常 🐟 在含生 🕷 长因子和抗生素的完全培养基中培养细胞通常。附。着在培养板上 🐧 并以单层形式生长
4、羊膜干细胞的提取方法是什么 🐺
羊膜干细胞 🕊 提取方 🌷 法
1. 收 🐵 集羊膜 🌳
从妊娠中期（1620 周）的足 🐴 月 🌹 胎 🐬 盘获得。
仔 🌷 细去除脐带和绒毛 🐅 膜 🦈 。
2. 羊膜分离 🐠
将羊膜 🐋 与脉络膜分离。
脉络膜 🌸 ：血管丰 🐱 富的层，位于 🦁 羊膜下方。
羊膜：外层透明层，含有 💮 干细胞。
3. 羊膜消 🐘 化 🕸
使用胶原酶和透明质酸酶等酶消化 🐘 羊膜，释放干细胞。
在无血 🐘 清培养基中进行，以避免血清蛋白的干扰。
4. 细 🌷 胞 🐟 分离 🌹
通过离心将干细胞从消 🦟 化 🌺 液中分离 🐵 出来。
离心法 🌴 产生富含干细胞的细胞沉淀。
5. 重 🦟 悬 🐝 和培养
将细胞沉淀重悬在 💮 适当 🦆 的培养基中。
通常使用含有生长因子 🐦 （如 EGF 和 FGF）的血清培养基培 🕊 养羊膜干细 🌻 胞。
6. 细 🪴 胞扩 🌹 增 🐵
在 🦍 培养环境中 🦋 培养羊膜干细胞，促进其扩增。
通常在体外培 🦊 养 🐈 36 周，使干细胞数量增加 🐝 。
7. 质量 🦋 控制 🌵
提取后对羊膜干细胞进行质量控制 🦢 测试。
这些测试包 🦢 括：
活力检 🪴 测
表面标 🐡 记分 🐝 析
分化 🦉 潜能 🌼
注 🐼 意事项：
所有程 🌺 序都应在无菌条件下进行，以防止 🐈 污染。
收集和提取 🐅 羊膜的伦理方面 🐦 也应予以考虑。
