造血干细胞的 🦉 培养液(造血干细胞培养需要多长时 🐝 间)
- 作者: 王乐只
- 来源: 投稿
- 2025-07-13
1、造血干细 🐴 胞的培养液 🌷
造血干细 🪴 胞(HSC)培养液
造血干细胞培养液是一种专门 🦍 配制的液体,用于在体外维 ☘ 持和培养HSC。它HSC为提供必需的营养、生,长、因。子和其他成 🐡 分以支持其增殖分化和自我更新
成分:HSC 培养液 🐬 通常包 🍀 含以 🌷 下成分:
基 🌳 础 🦅 培养基 🦋 :如 Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DMEM) 或 Iscove's Modified Dulbecco's Medium (IMDM)
血清:如胎牛血清 (FBS) 或人 🌾 血清 (HS)
生长 🌾 因子 🐛 :如白细 💐 胞介素白细胞介素6 (IL6)、和3 (IL3) 干细胞因子 (SCF)
激素:如红细 🦁 胞生成素 (EPO) 和 🐵 粒细胞巨 🌷 噬细胞集落刺激因子 (GMCSF)
其他成分:如谷氨 🐶 酰胺、β巯基乙醇和抗 🦆 生素
作用:HSC 培养液在 HSC 研究和临床应用中 🍁 起着至关重要的作用,包 🐵 括:
保持 HSC 的增殖和自我更新:培 HSC 养液中的增长因 🦆 子和激素促进分裂和维持其干细胞特性。
指导 HSC 分化:培 HSC 养 🌲 液中不同的成分可以定向分化成特定的 🕸 血细胞谱系,例如粒细胞、淋巴细胞和红细胞。
移植前扩 🐋 增:通过培养液扩增 HSC 可 🐦 以获得足够数量的细胞用于异体或自体移植。
基因工程:培养液可以 🦟 用于将基因导入用于 HSC,研究目的或 🐘 治 🐒 疗疾病。
优化:优化 HSC 培 HSC 养液 🕊 对于维持的增殖和分化至关重要。这 🐼 可能涉及调整生长因子浓度、血。清类型或培 🐡 养基成分
结论:造 🦟 血干细胞培养液是一种复杂且 🌴 精细的液体,专为在体外维持 HSC 而设计。它在 🐟 HSC 研究、再。生,医 HSC 学、和细胞。疗法中具有广泛的应用通过优化培养液的成分可以最大限度地提高的增殖分化和自我更新能力
2、造血 ☘ 干细胞培养需要多长时间
造血 🐝 干细胞培养所需的时间长度取决于培养方法和 🕊 所使用细胞的类型。
一 🌹 般情 🐛 况下:
悬浮培 🐳 养:12 周
贴壁 🌷 培养 🐒 :24 周 🐶
器官培养:更长的时间 🦆 ,通常为几 🌴 个月甚至几年
以下 🐈 是具 🍁 体培养方法 🌼 的时间范围:
短时间 🪴 培养(< 1 周):用于快速扩增或功能 🪴 检 🌸 测。
中期培养(14 周 🦅 ):用 🍀 于细胞 🌷 扩增和分化。
长 🐘 期培养(> 1 个月):用 🐘 于建立稳定造血 🪴 祖细胞或恢复骨髓造血功能。
需要强调的是,这,些时间范围只是估计值实际所需时间可能因实验 🌵 室条件、培养基配方和细胞状态而异。
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3、造血 🌻 干细胞的培养液怎么配
造 🐛 血干细胞培养液配 🕷 方 🌷
基本 🐳 培养基:
Iscove's Modified Dulbecco's Medium (IMDM) 或 🐎 RPMI1640 培 🌵 养基
10% 热灭活胎牛 🕊 血清 (FBS)
生长因子和细胞因 🌼 子:
人类白细胞介 🐵 素3 (rhIL3) 20 ng/mL
人类粒细胞巨噬 🦊 细胞集 🌴 落刺激 🌿 因子 (rhGMCSF) 10 ng/mL
人类成纤 🪴 维细胞生长因子 (rhFGF) 20 ng/mL
人类表皮 🐼 生 💮 长因子 (rhEGF) 10 ng/mL
人类 🐘 干细 🌷 胞 🐕 因子 (rhSCF) 100 ng/mL
人类促红细胞生成素 🐘 (rhEPO) 1 U/mL
其他添 🦊 加剂 🐡 :
100 U/mL 青/霉 🍁 素链霉 🐴 素 🌴
2 mM L谷氨 🐘 酰胺
55 μM 2巯 🐅 基 🐦 乙 🐈 醇
配方步 🦈 骤:
1. 在无菌条件下,将 IMDM 或 RPMI1640 培养基加 🌳 入无菌容器中。
2. 加 🌺 入 🦊 10% 热 🐧 灭活 FBS。
3. 添加生长因 🐴 子和细 🐟 胞因子 🌼 。
4. 添加 💐 其他添加剂。
5. 将培养液混 🦊 合均匀,分装到无菌培养瓶或培养皿中。
6. 在 37°C、5% CO2 下 🌲 培养至 🦆 少 24 小时 🐒 ,以平衡培养液。
注意:培养液组分和浓度 ☘ 可能会根据所培养的造血干细胞类型和培 🌼 养条件而有所不同。
始 🦁 终使用无菌技术和材料制备培养液。
培养液应定期检 🐒 查污染,并及时更换以保 🌷 持无菌状态。
4、造血干细胞的培养 🐺 液是什么
造血干 🦅 细胞培 🦅 养液的成分 🐴 通常包括:
基础培养基:例 🐝 如 Iscove's Modified Dulbecco's Medium (IMDM)、StemSpan SFEM 或 🌹 StemPro 34 SFM。
生长因子和细胞因子:例如白细胞介 🌳 素白细胞介素3 (IL3)、干细胞因子6 (IL6)、促 (SCF)、红细胞生成素 (EPO)、血小板生成素和 (TPO) 粒细 🦋 胞巨噬细胞集落刺激因 🐧 子 (GMCSF)。
补充剂:例 🌵 如牛胎血清牛血清 (FBS)、白 🌻 蛋白 (BSA)、2巯基乙醇和脂肪酸。
抗生素:例如青霉 🐵 素 🍀 、链霉素或 gentamicin。
其他成分:根 🐈 据具体应用而异,例如葡萄糖、谷氨酰胺、L天冬酰 🦁 胺和维生 🌺 素。