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干细胞分离培养基 🌻 配方(干细胞培养用什么培养 🦅 基)

  • 作者: 王洛屿
  • 来源: 投稿
  • 2025-06-27


1、干细胞 🦁 分离培养基配 💐

基底培养 🌺 🐟

DMEM/F12(无血 🐶 清)

B27 补充 🦅 🐵

N2 补 🐴 🐱 🐅

🕸 维蛋白 🦅 原(5微克/毫升)

生长 🐼 因子补 🦁 充剂 🦋

🌷 础成纤维细胞生长因子(bFGF)(10 ng/毫)升

表皮生 🪴 🌴 因子(EGF)(20 ng/毫 🐵 )升

抗生素和 🦄 真菌剂 🦊

青霉素 💮 🐱 霉素(1%)

安非特里 🦍 辛 B(0.25 微克/毫 🦈 🍀

🐳 🌷 🐬 分:

L谷 🌻 氨酰胺(2 mM)

β巯基乙 🐦 醇(0.1 mM)

非必 🪴 需氨基酸(0.1 mM)

制备 💐 🕊 🐬

1. 在无菌条件下,将基底培养基和生长因 🌴 子补充 🐼 🌵 混合在一起。

2. 添加抗 🐳 生素和真菌剂。

3. 过滤 🐡 🕊 菌,去除任 🐳 何颗粒。

4. 将培养基储 🐯 存在 4°C 下在,使用前不要超过 1 个月。

注意:

具体配方可能因干细胞类型和 🍀 🐅 究目的而异。

确保使 🐳 用符合 GMP 标准的 🌳 成分。

🌾 期监测培养基的 pH 值和渗透压。

🌻 于长时间培养,需要补充新鲜的培养基。

2、干细 🍀 胞培养用什么培养基

干细胞培养基 🐯 通常包含以下成分:

基础培养基:例如 Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM) 或培养基 🌾 Roswell Park Memorial Institute (RPMI) 1640 。

胎牛 🐒 血清 (FBS):或人血清、生长因 🐵 子等血清补充剂,提供生长因子和营养。

生长因子:例如表皮 🕷 生长因子 (EGF)、成纤维细胞生长因子 (FGF) 和白细胞 🐛 介素 🐒 6 (IL6)。

抗生素:例如青霉素和链霉素,防止细 🐠 菌污染。

抗真菌剂:例如两性霉素 B,防止 🍀 真菌污染。

其他成分:例如胰岛素、转铁蛋白和亮氨 🐎 酸,支持 🦆 细胞生长和增殖 🌵

🐯 养基的具体成分和比例会根据干细胞类型和培养目的而有所不同。

3、干细胞培养视频教程 🦄

干细 🌻 胞培养视 🦅 频教程

第 1 部分:材料和准备工作 🌻

[干细胞培养 💮 基]()

[培养皿 🐒 ]()

[显 🐎 🌻 🦁 ]()

[HEPA 过滤层 🦆 流罩]()

第 2 部分 🌹 :细胞接 🐟

[培养基 🌷 更换 🍁 ]()

[细胞 🐛 🪴 代]()

[细胞 🐶 计数和活力分析]()

🦋 3 部分:细胞特性分 🐅

[免疫 🌸 🌷 🌳 分析]()

[分化 🦆 潜能 🦈 分析]()

[细胞周期 🐘 分析]()

第 4 部分:故障排除 🌲

[细胞 🐟 贴壁 🐬 不良]()

[细 🐋 胞污 🍁 ]()

[分 💮 化失败]()

其他有用的资源 🐠

[默克干 🌷 细胞 🐝 培养指南]()

[赛默飞世尔干细胞培养协 🌾 议]()

[StemBook:干细胞研究指 🌹 南]()

4、干细胞培养基本 🌾 知识

干细 🐒 胞培 🕊 养基本 🌺 知识

🐵 么是干 🐦 细胞?

🕸 细胞是具有自我更新和分化为各种细胞 🌿 类型的潜力的一类特殊 🌸 细胞。

它们在胚胎发育和组织再生中起着 🦢 至关重要的作用。

干细胞 🕸 培养的要 🍀

培养基:

🐞 供营养物质、生长因子和激素以支持干 🐺 细胞生长。

🐝 常包含无血 🦉 清培 🪴 养基,加入生长因子或血清替代物。

增殖因子和 🦅 生长 🍀 因子:

刺激干细胞 🐱 增殖 🕸 和分化 🦊

🐝 🕸 :bFGF、EGF、LIF。

培养基:

支持干细胞 🌿 依附并防止分化。

例如:Matrigel、胶、原蛋 🐞 白层粘连蛋白。

培养 🕸 环境:

CO2 培 🐈 养箱: 510% CO2 浓度,以维持生 🐞 理 pH。

无菌 🐅 操作: 严格无菌,以防止污 💐 染。

🦊 养温度: 通常 🐎 为 37°C。

培养技术

贴壁培 🌾 🦊

干细胞依附于底 🕸 物表面(例如培养板)生长。

使用 🐒 胰蛋 🍁 白酶或 EDTA 等酶消化细 🦉 胞,然后传代培养。

悬浮培 🌻 🐯

干细胞在培养基中 🐟 悬浮生长。

通过离心 🐒 或过滤分株细胞。

🌷 化培 🐘 🦁

通过改变培养条件(例 🐧 如生长因子培养、基)诱导干细胞分 🌷 化为特定细胞类型。

应用

组织工 🦋 🪴 和再生治 🦁

疾病建模和 🌿 药物筛选

干细胞银 🐼 行和储 🦍

常见问题

🐦 细胞 🌾 培养的周期多久? 取决于细胞类型,通 🌼 常为 37 天。

传代 🐝 次数的 🕊 限制? 有限,取决于细胞 🦆 类型。

🌷 染如何影响干细胞培养污染 🦈 ? 会导致细胞死亡和生长异常 🐒

干细胞培养如何扩 🕸 大规模? 使用生物反应器或培养袋培养大量干细 🐞 胞。

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