干细胞分离培养基 🌻 配方(干细胞培养用什么培养 🦅 基)
- 作者: 王洛屿
- 来源: 投稿
- 2025-06-27
1、干细胞 🦁 分离培养基配 💐 方
基底培养 🌺 基 🐟 :
DMEM/F12(无血 🐶 清)
B27 补充 🦅 剂 🐵
N2 补 🐴 充 🐱 剂 🐅
纤 🕸 维蛋白 🦅 原(5微克/毫升)
生长 🐼 因子补 🦁 充剂 🦋 :
基 🌷 础成纤维细胞生长因子(bFGF)(10 ng/毫)升
表皮生 🪴 长 🌴 因子(EGF)(20 ng/毫 🐵 )升
抗生素和 🦄 真菌剂 🦊 :
青霉素 💮 链 🐱 霉素(1%)
安非特里 🦍 辛 B(0.25 微克/毫 🦈 升 🍀 )
其 🐳 他 🌷 成 🐬 分:
L谷 🌻 氨酰胺(2 mM)
β巯基乙 🐦 醇(0.1 mM)
非必 🪴 需氨基酸(0.1 mM)
制备 💐 说 🕊 明 🐬 :
1. 在无菌条件下,将基底培养基和生长因 🌴 子补充 🐼 剂 🌵 混合在一起。
2. 添加抗 🐳 生素和真菌剂。
3. 过滤 🐡 灭 🕊 菌,去除任 🐳 何颗粒。
4. 将培养基储 🐯 存在 4°C 下在,使用前不要超过 1 个月。
注意:具体配方可能因干细胞类型和 🍀 研 🐅 究目 ☘ 的而异。
确保使 🐳 用符合 GMP 标准的 🌳 成分。
定 🌾 期监测培养基的 pH 值和渗透压。
对 🌻 于长时间培养,需要补充新鲜的培养基。
2、干细 🍀 胞培养用什么培养基
干细胞培养基 🐯 通常包含以下成分:
基础培养基:例如 Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM) 或培养基 🌾 Roswell Park Memorial Institute (RPMI) 1640 。
胎牛 🐒 血清 (FBS):或人血清、生长因 🐵 子等血清补充剂,提供生长因子和营养。
生长因子:例如表皮 🕷 生长因子 (EGF)、成纤维细胞生长因子 (FGF) 和白细胞 🐛 介素 🐒 6 (IL6)。
抗生素:例如青霉素和链霉素,防止细 🐠 菌污染。
抗真菌剂:例如两性霉素 B,防止 🍀 真菌污染。
其他成分:例如胰岛素、转铁蛋白和亮氨 🐎 酸,支持 🦆 细胞生长和增殖 🌵 。
培 🐯 养基的具体成分和比例会根据干细胞类型和培养目的而有所不同。
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3、干细胞培养视频教程 🦄
干细 🌻 胞培养视 🦅 频教程
第 1 部分:材料和准备工作 🌻
[干细胞培养 💮 基]()
[培养皿 🐒 ]()
[显 🐎 微 🌻 镜 🦁 ]()
[HEPA 过滤层 🦆 流罩]()
第 2 部分 🌹 :细胞接 🐟 种
[培养基 🌷 更换 🍁 ]()
[细胞 🐛 传 🪴 代]()
[细胞 🐶 计数和活力分析]()
第 🦋 3 部分:细胞特性分 🐅 析
[免疫 🌸 表 🌷 型 🌳 分析]()
[分化 🦆 潜能 🦈 分析]()
[细胞周期 🐘 分析]()
第 4 部分:故障排除 🌲
[细胞 🐟 贴壁 🐬 不良]()
[细 🐋 胞污 ☘ 染 🍁 ]()
[分 💮 化失败]()
其他有用的资源 🐠
[默克干 🌷 细胞 🐝 培养指南]()
[赛默飞世尔干细胞培养协 🌾 议]()
[StemBook:干细胞研究指 🌹 南]()
4、干细胞培养基本 🌾 知识
干细 🐒 胞培 🕊 养基本 🌺 知识
什 🐵 么是干 🐦 细胞?
干 🕸 细胞是具有自我更新和分化为各种细胞 🌿 类型的潜力的一类特殊 🌸 细胞。
它们在胚胎发育和组织再生中起着 🦢 至关重要的作用。
干细胞 🕸 培养的要 🍀 求
培养基:提 🐞 供营养物 ☘ 质、生长因子和激素以支持干 🐺 细胞生长。
通 🐝 常包含无血 🦉 清培 🪴 养基,加入生长因子或血清替代物。
增殖因子和 🦅 生长 🍀 因子:
刺激干细胞 🐱 增殖 🕸 和分化 🦊 。
例 🐝 如 🕸 :bFGF、EGF、LIF。
培养基:支持干细胞 🌿 依附并防止分化。
例如:Matrigel、胶、原蛋 🐞 白层粘连蛋白。
培养 🕸 环境:
CO2 培 🐈 养箱: 510% CO2 浓度,以维持生 🐞 理 pH。
无菌 🐅 操作: 严格无菌,以防止污 💐 染。
培 🦊 养温度: 通常 🐎 为 37°C。
培养技术贴壁培 🌾 养 🦊 :
干细胞依附于底 🕸 物表面(例如培养板)生长。
使用 🐒 胰蛋 🍁 白酶或 EDTA 等酶消化细 🦉 胞,然后传代培养。
悬浮培 🌻 养 🐯 :
干细胞在培养基中 🐟 悬浮生长。
通过离心 🐒 或过滤分株细胞。
分 🌷 化培 🐘 养 🦁 :
通过改变培养条件(例 🐧 如生长因子培养、基)诱导干细胞分 🌷 化为特定细胞类型。
应用组织工 🦋 程 🪴 和再生治 🦁 疗
疾病建模和 🌿 药物筛选
干细胞银 🐼 行和储 🦍 存
常见问题干 🐦 细胞 🌾 培养的周期多久? 取决于细胞类型,通 🌼 常为 37 天。
传代 🐝 次数的 🕊 限制? 有限,取决于细胞 🦆 类型。
污 🌷 染如何影响干细胞培养污染 🦈 ? 会导致细胞死亡和生长异常 🐒 。
干细胞培养如何扩 🕸 大规模? 使用生物反应器或培养袋培养大量干细 🐞 胞。