☘ 干细胞扩 🌸 增培养条件（干细胞扩增培养条件是什么）

1、干细胞扩增培养条 🌿 件 🐈

干细 🦋 胞扩增培养条件

基底培 🦆 养基

无 🐞 血清 🦁 培养 🐠 基，如 DMEM/F12 或 Iscove's Modified Dulbecco's Medium (IMDM)

添加补充成分，如转铁蛋白、胰、岛素甘油酸钠、L谷氨酰胺和抗 🌾 生素

多能干细 🦄 胞 🐼 ：bFGF、LIF、Activin A 和 Wnt3a

造血干 💐 细胞：TPO、SCF、GMCSF、IL3 和 IL6

间充质干 🌸 细 🐠 胞 🌾 ：IGF1、EGF、PDGF 和 TGFβ

组织培养瓶或 🌼 孔板，涂 💮 ，有基底膜成分如或 Matrigel Collagen IV

37°C，5% CO2，95% 湿 🌵 度 🐯

根据细胞类型按比例 🐧 更换培养基（通常为每 23 天 🐼 ）

通 🐛 风以确保气体交换

根据细胞 🐡 类型而异，通 🐡 常为 10,000100,000 个细胞/cm2

当细胞达 🦢 到约 80% 的融合 ☘ 度时传代

使用胰蛋白酶EDTA 或 TrypLE 等 🐴 解离剂 🌳 分离 🦅 细胞

将 🐵 细胞重新悬浮 🐺 在新鲜培养基中，并播种到新的培 🦊 养表面

细胞类型、培养阶 🐒 段和生长因 🐅 子需求可能存在差异

监测细胞活力和 🐛 生长，必要时调整培养条件 🌳

考虑使用摇瓶或生物反应 💐 器进行大规模 🪴 扩增

2、干细胞 🌼 扩增培养 🌷 条件是什么

干细胞扩 🦊 增培养 🦊 条件

富 🦁 含培养基，例 🕊 如含血清 🪴 的 Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM) 或 Roswell Park Memorial Institute (RPMI) 1640。

补充生长因子，例如碱性成纤维细 🌾 胞生长因子 (bFGF)、表皮生长因子 (EGF) 和胰岛素样生长因子 (IGF)。

贴壁培养：使用预涂抹有细胞外基质蛋白（例 🦉 如胶原蛋白、层粘连蛋白或纤维连接 🦈 蛋白）的 🦟 培养皿。

悬浮培养：使用无基质的培养基，允许干细胞在 🌺 培养基中形 🐘 成聚集体。

37°C

培养 🐛 容器：

组 🪴 织 🐶 培养皿培养、瓶或生物反应器 🌻 。

接 🕊 种 🕸 密 🦢 度：

取决于干细胞类型，通常在每平方面厘米 5,00050,000 个细 🦋 胞之间。

培 🐘 养周期：

27 天，具体 🐶 取决于干 🐱 细 🐎 胞类型。

当 🌳 干细胞达到 8090% 的汇合度时，进行 ☘ 传代。

使用胰蛋白酶或EDTA等酶 🌷 促消化液分离干细胞。

其他 🐛 注意事 🦉 项：

定期监测 🌺 培养 🐵 液以确保无污染 🐒 。

使用合适的抗生素来预防细菌或真菌 ☘ 感染。

定期更换培养基以清除废 🐬 物和补充营养 🌾 物质。

保护培养物免 🌹 受光 🐞 和机械应力的 🌿 影响。

3、干细胞扩 🦉 增培养条件有哪些 🌷

干 🌵 细胞扩增培养条 🐅 件

无血清培养 🐡 基培养基：不含小牛血清或人血清 🌹

Matrigel：模拟基底膜的基 🌲 质，支 🌼 持 🪴 干细胞粘附和生长

聚赖 🌵 氨酸（PLL）：使细胞贴 🌲 壁，促进细胞生长

岩藻聚糖（ALG）：天然聚 🕷 合物，可促进细胞增 🐡 殖和分化 🌺

生长 🦄 因子和细胞因子

基础成纤维 🦢 细胞生长因 🌺 子（bFGF）：促进成纤维细胞生长因子家族成员的干细胞增殖

表皮生长因 🌳 子（EGF）：促进表皮生长因子受体家族成员的 🦄 干细 🦋 胞增殖

Wnt蛋白：参与胚胎发育，维持 🐱 干细胞稳态

PGD2：促 🐈 炎介质，在某些条件下 💮 可促进干细胞增殖

Dulbecco's Modified Eagle's Medium（DMEM）或其他含干 🌺 细胞 🌷 生长 🦟 所需营养成分的基础培养基

补充剂 💐 ：如谷 🌺 氨酰胺、抗生素和抗真菌 🐴 剂

温度 🐬 ：37°C

二氧化 🐺 碳（CO2）：510%

湿 🌻 度 🐈 ：95% 以上 🦁

传 🍀 代：根据干细胞类型和生长 🌷 速度而异，一般每 37 天传 🐈 代一次

悬浮培养：使用生物 🐎 反应器或摇瓶 🌸 使，干细胞在培养基中悬浮生长

无氧培养：某些干 🌾 细胞类型在低氧 🌺 条 ☘ 件下生长更好

机械刺激：通过流体剪切力或基质刚度变化，可影响干细胞 🌻 分化

共培养：与其他细胞类型共培养，可促进干细 🍁 胞生长和分化

4、干细胞扩增培 💮 养条件要求

干细胞扩 🐞 增 🕷 培养 🌹 条件要求

基质和 🐳 培 🌾 养 🦍 基

基质：Matrigel、胶、原纤维连接蛋 🦅 白（fibronectin）或 🦈 聚赖氨酸（polyornithine）等生物基 🌾 质

培养基：富含生长因子（如 bFGF、EGF）、白蛋白和抗 🐟 生素的无 🐶 血清培养基如和， mTeSR?1、STEMdiff? APEL?2 Neuronal Maintenance Medium

温 🐴 度 🐶 ：37°C

湿度：95% 以 🕊 上

CO2 浓 💐 度 🕷 ：510%

培养瓶类型 💮 培养：板培养瓶 🐳 、或培养袋

运动：静 🐡 态培养或通过旋转摇床提供轻柔运动

传代时间：根 💐 据细胞类型而异，一般为 37 天 🌸

传代 🌻 比例 🐘 ：1:2 至 1:10

细胞 🌻 密度 🌷 ：根据细胞类型而异，通常为 104106 个细胞/mL

传代方法 🐕 ：酶解或机械传代

细胞 🌻 因子 🌷 和生长因子 🐕

干细 🦊 胞维持 🦆 因子：bFGF、EGF、TGFβ、VEGF 等

分化诱导因 🍁 子：特定细胞类型的特定生长因子或分子（例如，骨形成细胞诱导因 🍁 子）

无菌 🐒 环境：使用无菌的 🦊 材料和培养 🕷 技术，以防止污染

定期监测定期监测：细胞形态、增殖率 🐎 和分化状态

质量 🌼 控制：进 🌿 行基因组、表观基因组和免疫表型分析，以确保细胞特性和稳定性