人骨髓 🐯 间充质干细胞（骨髓间充质干细胞培养基用什么 🐠 ）
- 作者: 马瑾伊
- 来源: 投稿
- 2025-09-25
1、人骨髓 🌲 间充质干细胞
人骨髓间充 ☘ 质干细胞 (hMSC)
定义hMSC 是存在 🐋 于人骨髓中的多能干细胞。它们具有自我更新和分化为不同类型 🌳 细胞（如骨细胞 🦅 、软骨细胞和脂肪细胞的能）力。
特征自我更新：hMSC 可以 🐅 自 🐺 我复制，保持其未分化状态。
多能性：hMSC 可以分化为多 🦊 种细胞谱系，包括骨、软骨、脂、肪肌肉和 🕊 神经细胞。
免疫抑制 💐 ：hMSC 具有免疫抑制特性，可以抑制免疫反应并促进组织 🌼 再生。
旁分 🦁 泌特性分泌：hMSC 多种生长因子和细 🌹 胞因子，对周边细胞产生促再生和免疫调节作用。
来源hMSC 可以从以下来 🪴 源中分离 🐯 ：
骨髓脂肪 🦆 组 🌿 织
脐带血牙髓
应用
hMSC 在再生医学和组织工程中具 🦈 有广泛的应用，包括：
骨 🌿 骼修 🦈 复 🌵
软 🦉 骨 🍀 修复 🌳
脂肪填 ☘ 充
心 🌴 肌 🌴 修复 🦈
神 🐞 经 🦊 损伤修复
免疫 🌵 调 ☘ 节治 🐬 疗
机制hMSC 的再生和修复作用 🦍 机制包括：
分化分化：hMSC 为所 💮 需的细胞类 🐕 型，取代受损或丢失的细胞。
旁分 🦉 泌分 🦟 泌：hMSC 生长因子和细胞因子，刺激组织再生、抑制炎症并促进血管生成。
免疫调节：hMSC 抑制免疫 🦆 反 🐵 应，促进组织植入和减少组织排斥 🕊 。
优势与其 🐱 他干细胞 🪴 相比，hMSC 的优 🐬 势包括：
容易从骨 🦅 髓 🦆 中分离 🍀
高繁殖 🦈 能 🐋 力 🌼
较少的伦 🕷 理顾 🐶 虑
具有 ☘ 免疫调节特性
对 🦢 某些药 🍀 物的耐受性 🐅 好
2、骨髓间充质干细胞 🐳 培养基用 🦢 什么
骨髓间 🐕 充质干细胞（MSCs）培养基通常包含以下成分：
基 🌾 础培养基 🦍 ：
杜尔伯科改良 🦅 的鹰氏培养 🌴 基 🍁 （DMEM）或αMEM
Ham's F12培 🦉 養 ☘ 基 🐈
血清：胎 🦁 牛血 🌾 清 💮 （FBS，1020%）
人血清 🌿 白蛋白（HSA，25%）
生 🌲 长 🕷 因子 🐶 ：
血小板源性 🌵 生长因子（PDGFBB）
表皮生长 🐳 因子（EGF）
转 🦅 化 🌷 生 🌷 长因子β（TGFβ1）
抗 🌷 生素抗/真菌剂：
青 🌿 霉素/链 🐬 霉素 ☘
安 💮 非特 🐯 辛 🌸 B
两性霉素 🐛 B
其他 🐠 成分 🌵 ：
L谷 🐳 氨酸
HEPES 缓冲 🐴 液
非必 🦍 需氨基酸
其他 🐺 可 🐋 选成 🐵 分：
纤 🌳 维连接蛋白 🦟 （Fibronectin）
层粘连 🐟 蛋白（Laminin）
胆固醇胰岛 🌷 素转移蛋白 🦊 （ITS）
类胰 🌿 岛素生长因 🦉 子 🐕 1（IGF1）
具体培养基 🐎 的选择取决于研究目的和所用的 🦉 MSCs 类型。
3、人骨髓间充质干细胞提 🌿 取方法
人骨髓间充 🦍 质干细胞（MSCs）提取方法
材料：骨髓穿 🐬 刺套件
肝 🐡 素钠溶 🦉 液 🌼
冷冻 🌻 保存液（例如含 10% DMSO 的 FBS）
步骤：1. 骨髓抽 🌺 取
使 🐺 用骨髓穿刺套件从患者髋骨或胸骨抽取骨髓 50100 mL 。
抽 🌷 取部位用局部麻醉剂麻醉。
使用骨髓穿刺针将针头插入骨 🐛 髓腔，然后抽出骨髓。
2. 骨髓 🍁 处 🐞 理 🦟
将骨 🐦 髓转移至含 🦄 有 🍀 肝素钠溶液的锥形瓶中（终浓度为 50 IU/mL）。
轻柔混匀骨髓，防止凝块形 🍁 成。
将骨 🐘 髓样 🐯 品离 ☘ 心 10 分钟，1200 x g，4°C。
3. 红细胞 🌹 裂解
小心地除去上清液，留下细胞 🌷 沉淀。
加入红细胞裂解液（例如 NH4Cl溶液），轻轻混匀并孵 🌴 育 10 分钟，4°C。
将细 🦊 胞团离心 🌻 10 分钟，1200 x g，4°C。
4. 洗涤和分 🌺 离
用 🐦 PBS 洗涤细胞沉淀两次。
将细胞重悬于富含生长因子的培 🐎 养基（例如含 DMEM 中 🌷 FBS）。
将细胞接 🐧 种到培养皿 🐶 中并孵育过 💐 夜。
5. MSCs 的贴壁 🐋
非贴壁细胞将在培 🌺 养基 🐺 中漂浮，而将贴壁 MSCs 生长。
24 小时后 🐈 小，心地去除非贴壁细胞 🦋 。
6. MSCs 的培 🐬 养 🐶 和扩增 🕸
用富含生长因 🕸 子的培养 🦉 基每周更换一次培养液培养，直 🌲 MSCs 至达到所需数量。
细胞长至 🐶 8090% 汇合时，进 🦆 行传代并冻存 🦅 。
7. 冻存 🐡 保 🌻 存 🦅
收集 MSCs 并 🌴 用冷冻保存液重悬。
将细胞悬液分装 🦁 到冷冻管中。
缓 🐘 慢降温至 80°C，然 🐅 后转 🪴 移至液氮中长期保存。
注意事项 🐘 ：
使用无菌技术 🐠 进行所有步骤。
避免对骨髓细胞施加过 🌴 大压力，以免损坏细胞 🐒 。
适当的培养条件对 🐝 于的 MSCs 生长和扩增至关重要。
定期监 🦁 测细胞生长情 🐵 况，并根据需要调整培养条件。
4、人骨髓 🪴 间充质干细胞培养基
人骨髓间充质干 🕊 细胞培养基
人骨 🦉 髓间充质干细胞（hMSCs）是多能干细胞，具，有自我更新和分化为多种细胞系的潜力包括成骨细胞、软骨细胞和脂肪细胞的。hMSCs 体，外、培。养需要一种合适的培养基以支持它们的生长增殖和分化
培养 🦊 基成分 🐴
人骨髓间充 🐅 质干细胞培养基通常含有以下成分：
基础培养基： 通常使用改良的 🌺 Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DMEM) 或 α最低必需 🐕 培养基 🦊 (αMEM)。
血清： 人类血 🐦 清 AB 或胎牛血清是常用的 🪴 血清补充剂，通常以的 1020% 浓度添加。
生长 🐅 因子： 纤维细胞生 🐈 长因子 (FGF)、表皮生长因子 (EGF) 和血小板衍 🐘 生生长因子 (PDGF) 等生长因子可促进 hMSCs 的生长和增殖。
抗生素： 青霉素和链霉素等抗生素 🐬 可防止细菌污染。
其他成分 🪴 ： L谷氨酰胺、非必需氨基 🍀 酸和β巯基乙醇等成分可支 🌻 持 hMSCs 的代谢和生长。
培养基 🕸 选择 🕊
培养基 🐼 的选择取决于特定培养的 hMSCs 目的。例如：
用于增殖： 含 🐴 较高生长因子浓度的培养基可促进的 hMSCs 快速增殖。
用于分化： 添加特定分化诱导因子的培养基可引导分化 hMSCs 为特定细胞 🐱 系。
用于临床应 🐯 用： 旨在用于临床应用的培养基必须符合严格的无血清和 🦊 无动 🌿 物成分标准。
培 ☘ 养基维护
人骨髓间充质干细胞培养基应在 37°C、5% CO2 的条件下保存。定期更换培养基 🦈 （每 35 天）对。于维 🌴 持细胞活力和防止代谢废物的积累至关重要
