肠道干细胞提取方 🐋 法（干细胞在肠粘膜修复中的作用）
- 作者: 朱奕南
- 来源: 投稿
- 2025-07-02
1、肠道干细 🦁 胞提 🌿 取方法
肠道干细胞提取 ☘ 方法 🌹
1. 组织 🐅 采样 🦍
通过内窥镜或手术从 🌻 结肠或回肠中采集组织样 🐒 品。
2. 组 🌴 织解离
将组织样品在含分散酶 🦆 （如胶原酶和胰蛋白酶）的缓冲液中孵育，以将组织分解成单个细胞。
3. 细胞筛 🐠 选
利用免 🦉 疫磁珠或流式细胞术对细胞悬液进行标记和筛选，以富集肠道干细胞（ISC）。
4. 细胞培 🐅 养 💮
将富集的细胞悬液接种到含生长因子和培养基 🕸 的培养基中。
使用条件培养基，其，中 🌿 包含特定成 🌾 分以促进 ISC 的增殖和自我更新。
5. 克 🕷 隆 🐠 筛选 🐈
培养一段时间后，将细 🌷 胞稀释并接 🦋 种到 96 孔板中形成克隆。
筛选具有 colonyforming unit (CFU) 活 🌻 性的克隆。
6. 干细胞扩增 🦉
将确定的 ISC 克隆转移到更大的培养 🌾 基中进行 🍁 扩增。
使用生长因子和培养基 🐴 来维 🦊 持 ISC 的增殖和自我更新能力。
7. 特征鉴定 🌾
对扩增的 💮 ISC 进行特征鉴定，以确认其身份。
使用 🐈 免疫 🐡 表型（如 Lgr5 和表 CD44 达）、自（我）更新潜能通过形成类器官和分化成肠道 🐬 上皮细胞的能力。
其他方法微分离技术：使用激光或机械方法从小鼠肠道组织中 🌼 分 🐦 离单个 ISC。
非贴壁培养：ISC 在非贴 🐱 壁培养基中生长，形成类器官或悬浮球体。
基于类 🐞 器官的方法：从肠 🐱 道组织中 🐝 产生类器官，并从这些类器官中提取 ISC。
注意事项ISC 提取的效率和纯度取决于所使用的技术和组织来源 🕷 。
良好的组 🐠 织处 🐘 理和培养条件对于维持的 ISC 活力至关重要。
对提取的 ISC 进行彻底的特征鉴 🪴 定，以确保 🐴 其身份和功能。
2、干细胞在肠粘膜修 🐟 复中的作用
干细胞在肠粘膜修 🌷 复中的 🍀 作用
肠粘膜是覆盖在肠道内壁的一层上皮 🐞 细胞，它负责吸收营养物质并保护身体免受有害物质的侵害肠粘膜。不，断。更新这 🍁 一过程称为肠上皮更新
干细胞 🦅 在肠粘膜修复中发挥着至关重要的作用。这些干细胞位于肠隐窝的底部，即肠。道，内，壁，微。小的凹陷处干细胞不断分裂产生新的细胞这些细胞迁移到 🦄 肠隐窝的上部分化成各种类型的肠 🦊 上皮细胞
肠上皮更新由多个信号通路调控，包 🦢 括：
Wnt信号通路 💮 ：活Wnt化信号通路可促进干细胞的增 🌸 殖和分化。
Notch信号通路信号通路：Notch抑制干细胞的增殖，促 🐅 进其分化。
BMP信号通 🌺 路信号通路：BMP抑制干细胞的增殖和分化。
在肠道损伤或疾病的情况下，干 🌲 ，细 🐅 胞将增殖并分化成新的肠上皮细胞以修复受 🐧 损的组织。这。种修复能力对于维持肠道健康和功能至关重要
研究肠干细胞在以下疾病 🌳 中的作用：
炎症性 🦈 肠病炎症性肠病：是一种慢性疾病，会导致肠道炎症和 🦉 损伤。研，究。表明肠干细胞在炎症性肠 🐱 病的病理生理中发挥作用
结直肠癌结直肠癌：是一种肠道癌症，通常是由肠上皮细胞的异常增殖引起的。研，究。表明肠干细胞可能在 🦋 结直肠癌的发展中发挥作用
放射性肠炎放射性肠炎：是由放射治疗引 🕷 起的肠道损伤。研究表明肠，干。细胞可以促进放射性肠炎的修复
了解肠干细胞在肠粘膜修复中的作用对 🦄 于开发治疗肠道疾病的新策略至关重要。通过靶向肠干细胞，我。们可以促进组织修复并减轻疾病症状
3、肠道干细胞提 🐬 取方法有哪些
肠 🐶 道 🌷 干 🐋 细胞提取方法
1. 组织活 🌺 检
从结肠或直肠组织中获 🕸 取小样本 🐒 。
主要用于诊断和研究目 🌴 的。
2. 内窥镜 🐈 获取 🦟
使用内窥镜从结肠壁收集组织样 🦄 品。
是一种微创技术，可以用作组织活检的替 🦉 代方 🐯 法。
3. 肠道冲 🌳 洗
通过肠道冲洗 🐬 收集肠道上皮细胞，其中含 🐋 有 🐦 干细胞。
是一种非 🐈 侵入性方法，可提供大量 🌿 样品。
4. 分 🦈 选技 🌿 术
使用荧光激活细胞分选（FACS）或磁性激 🌸 活细胞分选（MACS）等技术 🦅 ，从肠 🦁 道组织或肠道冲洗样品中分离出干细胞。
这些技术依赖于干细胞 🐦 表面的特定 🕸 标记。
5. 培养 🕷 技术
从肠道组织 🦄 中提取的细胞在富含生长因子的培养基中培养，以扩增干细胞。
此方法可 🌺 用于扩大干细胞种群用 💮 于 🌸 研究或治疗。
6. 成 🦆 球 🐝 体培养
将肠道组织或细胞悬液 🐎 培养在悬浮液中，形成富含干细胞的成球体。
成球体 🐱 培养可以促进干细胞 🍀 自我更新和增殖。
7. 异 🕊 种 🐕 移植模 🐯 型
将人 🐱 肠道组织或 🌹 细胞移植到小鼠模型 🐕 中。
此方法允许在活体环境中研 🐧 究肠道干细胞功能。
选择 🦅 方 🐞 法取决于：
研究或临 🐎 床应用目的 🦄
可用 💮 的资源 🌿
样 🦋 品的类型和质量
干细胞 🐶 所需的纯度和数量
4、肠道干细 🐒 胞提取方法视频
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