怎么还 🐕 原胚胎干细胞（胚胎干细胞 🌷 怎么提取）
- 作者: 胡芮柒
- 来源: 投稿
- 2025-09-05
1、怎么 🐵 还原胚胎 🐈 干细胞
体外受精 (IVF)：从卵 🐋 巢中取出卵子，并在体外与精子受精。产，生，的。胚胎培养 🐠 到囊胚期然后进行活检以去除 🌳 内细胞团用于胚胎干细胞培养
单细胞 🦢 克隆：将单个胚胎干细胞分离 🐱 出来并培养在培养皿中细胞将。增。殖并形成 🌷 一个克隆群体
核移植：将人类胚胎干细胞的细胞核移植到去除细胞核的动物卵细胞中卵 🐬 细胞。随后通过体外受精的方式激活，导，致。形成一个胚胎该胚胎包含人类胚胎干细胞的遗传物质
诱导多能干细胞 (iPSC)：将成熟的体细胞（如皮肤或血液细胞）重编 🌷 程为胚胎干细胞样状态。iPSC 可。以 💮 通过添加 🌾 特定基因或蛋白质来生成
胚胎原基培养：从早期人类胚胎中分离出胚胎原基（内部细胞团的早期 🐎 阶段胚胎原基）。可。以在培养皿中培养成胚胎干细胞
注 🦢 意 🐦 事 🐦 项：
还原胚胎干细胞的过程具有技术性要求并 🦟 需要专门的设备和技术人员。
胚胎干细胞的研 🐧 究和使用受到道德考虑的 🦆 制约，因为它们涉及人类胚胎的创建或使用。
2、胚胎干细 🐘 胞怎么提 🐝 取
胚胎干细胞提 🐼 取 🕷 步骤
胚胎干细胞（ESCs）是从早期胚胎 🐵 发育过程中提取的未分化细胞提取过程。涉及以下步骤：
1. 受精和 🦈 胚胎 🦟 培养
从 🦍 捐赠者获得 🕷 卵子和精子进行体外受精（IVF）。
受精卵在培养基 ☘ 中培养数天，形成囊胚。
2. 内 🦢 细胞团 🦉 分 🌷 离
从囊胚中取出内细胞团（ICM），这是一个由胚胎干细胞组 🐡 成的细胞群。
3. 干细 🌹 胞 🕊 培养 🦟
ICM 细胞 🐬 在含有特定生长因子的培养基中培养。
干细胞在培养 🕷 基中增殖并保持未 🐱 分化的状态。
4. 分 🐋 离和克隆 🌳 化 🪴
使用免疫标记或其 🐠 他技术将 ES 细胞从其他细胞类型 🦈 中 🐬 分离出来。
ES 细胞被分选成单 🦆 个细胞并在个别培养皿中培养以形成克隆。
5. 培 🐝 养 💐 和储存
ES 细胞克隆在合适的培养条件 🌻 下培养，以保持其未分化状态。
细胞还可以冷冻保存 🦄 以 🦊 供以后使用。
其他注 🐞 意事项：
胚胎干细胞提取 🌼 是一个严格监管的过程，需要 🐶 获得伦理委员会的批 🦆 准。
胚胎干细胞的提取涉及破坏 🐺 胚胎，因此存在道德方面 🌴 的 🌴 顾虑。
除了胚胎干细胞外，还，有其他类型的干细胞可用例如诱导多 🐛 能干细胞可（iPSCs），以，通过 🐘 重编程体细胞获得从而避免使用胚胎。
3、胚胎干细胞 ☘ 怎么培养
胚 🌹 胎干细胞培 🦄 养
材料：胚胎
无血清 🌿 培 🐺 养基 💐 （如DMEM/F12）
纤维母细胞贴壁培 🐠 养皿
胚胎干 🌹 细胞培养基
中性酶（如胶 🌳 原酶 IV）
二甲 🌷 基 🦢 亚 🕊 砜（DMSO）
液氮步骤：
1. 胚胎收 🌴 集
从胚胎捐献者 🕊 那 🌷 里获得早期胚胎。
2. 消毒和 🌻 准备培养皿
将 🍀 纤 🐯 维母细胞贴壁培养皿用 70% 乙醇消毒。
用无血清 🐟 培养基 🦋 清洗 🐺 培养皿。
3. 分离胚胎 🌻 干 🪴 细 🐅 胞
用中性酶消化胚胎以释放胚胎干细胞 🌹 。
使用离心机将胚胎干细胞沉淀下来 🦋 。
4. 培养胚胎干 🦋 细胞
将胚胎干细胞接 🦍 种到纤维母细胞贴壁培养皿 🐯 中 🐈 。
加入胚胎 🦉 干细胞培养基，确保培 🐎 养皿底层覆盖。
将培 🌼 养皿 🦅 置于 🐴 37°C、5% CO2 的培养箱中。
5. 培 🐯 养基 🕸 更换
每 23 天更换一次 🐒 培养 🦢 基 🦉 。
用无血清培养基轻 🌼 轻 🐦 洗涤细胞 🐋 。
加入新鲜的胚胎 🦈 干细胞培养基 🌷 。
6. 克隆化胚胎 🕊 干细胞
当细胞长到 7080% 汇合度时，需要 🦅 进行克隆化以保持细胞株的 🦁 纯度。
使用 🍀 胰 🦈 酶消化细胞 🌼 。
将细胞稀释 🐵 成单细胞悬液。
将稀释后的细胞接种到新的 🦢 纤维母细胞贴壁培养皿中。
每孔接种 🐴 100200 个细 🍁 胞。
7. 冷冻 🦋 保存 🕸
将胚胎干细胞与含有 10% DMSO 的胚胎干细胞 🐳 培 🐯 养基混合。
将混 🕷 合 🐺 物分装 🐦 到冷冻管中。
缓 🌸 慢 🕊 降 🐟 温至 80°C。
将冷冻管 🌳 转移至液氮容器中进 🪴 行长期保存。
4、胚胎干细胞怎么保存 🐞
胚 🦆 胎干细胞的保存方法：
1. 冷冻保存冷 ☘ 冻（储 🐛 存）：
收集胚胎干细胞后，将它们转运到专业设施 🐅 。
在196°C的液氮 🐺 中 🐞 冷冻细胞 🦉 。
这种方法可以保存细胞数月甚至 🐛 数年。
2. 玻璃 🦢 化保存（超低温保存 🐵 ）：
是一种比冷冻 🐒 保存 🐺 更快 🐞 的冷冻方法。
将细胞悬浮在含有 🐼 高浓度冷冻保护剂的溶 🐛 液中，然后迅速降温至196°C以下。
这种 🌹 方法可以最大程度 🌹 地减 🐱 少细胞损伤。
3. 干燥保 🐯 存：
将胚胎干细胞悬浮 🦈 在含有低浓度冷冻保护剂 🐵 的溶液中 🐴 。
将 🦁 悬浮液在 🦊 无菌条件下干燥。
干 🌾 燥后的细胞可以存放在 🦅 室 🐡 温下，并随时恢复活性。
4. 生 🐕 物银行保存：
胚胎干细胞存储 🐕 在专门设计的生物银行中。
生物银行提供受控的储存环境，监测温度 🦍 、湿度和污染物水平。
生 🦅 物银行还提供细胞分发服务，以便快速检索和使用细胞。
保存胚胎干细胞的注 🐟 意事 🐘 项：
使用高质量的细胞：收集健康、无疾 🦍 病的胚胎干细胞。
适当的准备：在保存前 🌼 正确处理细胞，以最大限度地减少损伤。
专业的设备：使用专门的 🦆 设备和设施进行冷冻和储存。
持续监测：定期监测储存条件，以确保细胞 🐞 的生存能 🌾 力。
合格人员：由训练有素 🐈 的专业人员执 🐘 行保存程序 🐶 。
