sd大鼠骨髓干细胞（大鼠骨髓间充质干细 🐦 胞培 🐎 养基）
- 作者: 郭艺澄
- 来源: 投稿
- 2025-04-16
1、sd大 🐵 鼠骨髓干细胞 🐴
SD 大 🐯 鼠骨髓干细胞 🪴 (BMSC)
SD 大鼠骨髓干细胞 (BMSC) 是一种多能 🌵 干细胞，存在于大鼠骨髓中。它，们具有自我更新和向多 🐋 种类型细胞分化的能力包括成骨细胞、软骨细胞。和脂肪细胞
来源BMSC 通常从大鼠股骨或胫骨的 🦈 骨髓中分离得到分离。过程涉及抽吸骨髓、处。理酶和机械分散
特性多 🦉 能性：BMSC 可以分化成多种细胞类型，包括成骨细胞、软骨细 🌼 胞、脂、肪细胞神 🦉 经元和内皮细胞。
自我更新：BMSC 可以在体 🦋 外增殖 💐 并保持其多能性，使它们能够用于长期培养。
免疫原性低：BMSC 表达低水 🕊 平的免疫原性标 🐡 志物，使其适合用于异种移植。
旁分泌作用分泌：BMSC 各种生长因子和细胞 🐠 因子，具有免疫调节、抗炎和组织再生特性。
应用BMSC 已在各种生 🦄 物医学应用中得到研究，包括：
骨再生：BMSC 可 🌷 用于 🦢 修复骨缺损和促 🐎 进骨融合。
软骨再生：BMSC 可以分化成软骨细胞，用于治疗骨关节炎和软骨损伤 🐴 。
脂肪组织 🌿 再生：BMSC 可以分化成脂 🐘 肪 🐧 细胞，用于美容和医疗应用。
组织工 🐟 程：BMSC 可用于构建三维 🦆 组织结构用于，研究和 🌹 再生医学。
免疫治疗：BMSC 具有免疫调节特性，可用 🕊 于 🐘 治疗炎症性疾病和自身免 🌹 疫性疾病。
注意事项尽管 🐞 BMSC 具有很大的应用潜力，但 🐟 也有以 🌲 下注意事项：
异种移植：BMSC 在异种 🌼 移植中可能会发生免 🌷 疫排斥反 💮 应。
肿瘤发生：在某些情况 🐞 下，BMSC 可能分化为肿瘤细胞。
伦理考虑：BMSC 的来源涉及对动物的侵 🌷 入性手术，这引起了一些伦理 🐳 担忧。
2、大鼠骨髓间充质 🌳 干细胞培养基
大鼠骨髓间充质干细 🐴 胞培养基
成分：Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DMEM) 低 🌳 葡萄 🐟 糖 🐕 （<1 g/L）
10% 胎 🐡 牛血清 (FBS)
1% 青 🌼 霉素链霉 🕸 素
2 mM L谷氨 🦢 酰胺 🌷
添加剂：根据需 🌴 要 🕊 ，可以添 🌼 加以下添加剂：
10 ng/mL 人表皮 🐎 生 🦅 长因 🐛 子 (EGF)
10 ng/mL 人碱性成 🐼 纤维细胞 🌹 生长因子 🐡 (bFGF)
10 ng/mL 人 🍀 血小板 🦟 衍生生长因 🦋 子 (PDGF)
50 μg/mL 维生 🦅 素 🐘 C
制备：1. 在无菌条 💮 件下，将 DMEM、FBS、青霉 🐦 素链霉素和 L谷 🌲 氨酰胺混合。
2. 过滤灭菌溶液，并在需 🐈 要时添加添加剂。
3. 在 37°C 下储 🦍 存溶液，避免光照 🌿 。
注意 🌳 事项：
使用 🌷 高品 🐕 质的 FBS 以确保细 🌻 胞生长。
培 🕸 养基应定期过滤灭菌，以 🕷 防止 🌻 污染。
使用时避免重复冻 🐅 融循环。
处理培养基时始终戴手套 🌼 并采取 🦉 适 🐧 当的无菌操作。
3、大鼠骨 🐎 髓细胞染 🐕 色体手绘图
鼠骨 🐦 髓细胞 🦄 染色体手绘 🐵 图：
材料：染色后骨 🦍 髓细胞幻灯片
铅笔放大镜
图纸纸
步骤：
1. 检查幻灯片：从幻灯片盒 🦄 中取出骨髓细胞幻灯片。使用放大镜仔细检查幻灯片，找。到具有明显染色体的细 🐞 胞
2. 确定染色体：识别各个染色体。使用放 🦉 大镜放大细胞，并。使用您的知识来确定染色体的形状和大 🐈 小
3. 绘制轮 🌷 廓：用铅笔在图纸纸上绘制细胞轮廓 🐺 。确。保轮廓尽可 🐕 能准确
4. 绘制染色体：在细胞轮廓内 🕊 ，开始绘 🐘 制染色体 🌿 。使。用与实际染色体相似的形状和大小
5. 标注染色体：使用铅笔标记每一对染色体的编号。可。以通过比较染色体的形态 🌷 特征来识别 🌺 染色体
6. 完成绘图 🐶 ：继续绘制所有染色体，直 🦆 到完成 ☘ 绘图。
7. 仔细检查 🌷 仔细检查：您的绘图，确 🦋 保 💐 其准确无误。
小贴士：使用锋利的铅笔，以获 🦈 得干净的线 🌿 条。
使用不同颜色 🐱 的铅笔来区 🐠 分不同类型 🪴 的染色体。
放 🕊 大细胞以获得更清晰的视野。
如果您 🐒 不确定某个染色体，请参考教科书或在线资源。
练 🦢 习绘制染色体以提高您的准确 🐞 性。
4、大鼠骨髓细胞原 🌵 代培养
大 🐼 鼠骨髓细胞原代培养
目的：获取纯化 🕷 的大鼠骨髓 🐛 细胞，用于研究造血分化、免疫反应和其他细胞生物学过程。
材料：大鼠（812 周 🦋 龄）
RPMI 1640 培养基，含 🌹 10% FBS、1% 青链霉素链霉素/
PBS（磷 🐈 酸盐缓 ☘ 冲液）
剪 🐺 刀 🕊 、镊子 🕊
70% 乙 🐠 醇
大鼠血清 🦄
FicollPaque PREMIUM 密度梯 🐕 度 🦁 液
集落刺激因子（CSF）或其他 🌴 生长 💮 因 🦁 子
方法：1. 获取骨 🦍 髓 🦊 ：
人道处死大 🐵 鼠，用 70% 乙醇消毒骨骼。
切开 🦢 股骨和胫 🐴 骨。
用 RPMI 1640 培养基冲洗骨髓 🌻 腔，收集冲洗液。
2. 密度梯度离心 🕸 ：
将骨髓 🪴 冲洗液与 FicollPaque 密度梯度液以 1:1 的比 🌷 例 🦉 混合。
在 400 x g 下 🐘 离 🐦 心 30 分 🌺 钟。
收集位于密度梯度液中间层（单核细胞层 🌸 ）的细胞。
3. 洗涤 🐝 ：
用 RPMI 1640 培养基 🐯 洗涤细胞 3 次。
离心，以离心 🌴 200 x g 分 🦄 10 钟 🐬 。
4. 培养 🐕 ：
将细胞重悬于含 CSF 或其他生长因子 🌳 的 RPMI 1640 培养基中。
将细胞 🐎 接种到培养皿或培养瓶中，密度为 1 x 10^6 个细胞/mL。
在 🐟 37°C、5% CO2 环境下 🐝 培养细 🐼 胞。
提示：可加入大鼠血清以促进细胞附着和 🌷 增殖。
根据实验目的，可加入不同的生 🕊 长 🌴 因子或刺激物。
定期 🐕 监测培 🌹 养物，并根据需 🐅 要更换培养基。
应用：研究造血分 🐦 化和 🐛 自更新
分析免疫细胞功能 🐴
评 🦍 估药物或治疗对骨 🐧 髓细胞的 🦊 影响
细 🌺 胞疗法 ☘ 和 🌼 再生医学研究
