滋养层细胞 🐶 培养干细胞(滋养 🦋 层细胞培养干细胞的作用)
- 作者: 郭言溪
- 来源: 投稿
- 2025-10-05
1、滋养层细胞 🕸 培养 🐛 干细胞
滋养层干 🐎 细 🐡 胞(TSCs)的 🐘 培养
滋养层干细胞(TSCs)是从早期的胚胎发育 🍀 过程中获取的细胞,具有自我更新和分化成胚胎外胚层中胚层和、内胚层所有细胞类型的潜力。TSCs培养是,一、种。重要的技术可用于研究发育过程再生医学和疾病建模
培养 🌻 方 🐟 法 🦅 :
1. 胚胎 🕸 获取:TSCs从早期胚胎胚(泡期)或 🕸 人胚胎干细胞(hESCs)中提取。
2. 细胞分离:胚泡 🐞 或hESCs被 🌴 处理以分离出滋养层细胞滋养层细胞,形成外层 🐯 。
3. 培养基:TSCs通常在添加生长因子的无血清培养基中培养,例如人重组碱性成纤维细胞生长因子(rhbFGF)和 🐺 转化生 ☘ 长因子α(TGFα)。
4. 培 🕊 养基质:TSCs通常在重组基底膜(如Matrigel或或Laminin)饲 🦉 养层上培养,以提供附着和生长支持。
5. 培养条 🐒 件:TSCs在37°C、5% CO2和低氧条件(5%)下培养,以模拟其在胚胎中的自然环境。
6. 传 🐝 代:TSCs可以通过机械传代或酶 🐋 促传代来传代以,保持其自我更新能力和分化潜力 🐬 。
培 🐈 养的挑战 🐝 :
污染:TSCs培 🦅 养容易受到 🦊 细菌和真菌污染 🦁 。
分化:TSCs在培养过程中容易分化成其他细胞类型,如果 🐴 不适当管理。
异质性:TSCs培 🍁 养物通常 🌵 是异质性的,包含具有不同分化潜能的细胞亚群。
遗传异常:长期培养的 🦋 TSCs可能 🌲 会发生遗传 🦍 异常。
应用:TSCs的 🐠 培养已用 🌲 于各种应用,包括:
发育生物学研究 🐳 研究:胚胎发育的早 🐯 期阶段 🐅 。
再生医学生 🌼 :成用于组织和器官修复的细胞。
疾病建模:创建体 🐒 外疾病模型,用于研究病因学和治疗。
干细胞库:建立具有治疗和研究潜力的 🐝 干细胞库。
2、滋养层细胞培养干细胞的作 🦊 用
滋养层细胞对胚 🐕 胎干细 🦄 胞培养的 🦊 作用
滋养 🦅 层细胞是胚 🐵 泡外层的细胞层,在胚胎发育中起着至关重要的作用在胚胎。干细胞(ESC)培养,中滋养层细胞,被添加到培养基中以提供特定的功能和支持:
提供营养支持 🌾 :
滋养层细胞通 🌹 过分泌 🐶 营养因子,如白细胞介素6 (IL6) 和白细胞介素11 (IL11),为 ESC 提供必需的 🐝 营养。
调 🐘 节生 🦍 长因子信号 🐴 :
滋养层细胞分泌各种生长因子,如纤维母细胞生长因子 (FGF) 和表皮生长 🕸 因子 (EGF),这些生长因子调节 ESC 的增殖和分化。
维持自我更新能 🐱 力:
滋养层细胞通 🦟 过激活被 🌻 称为 Oct4 和 Nanog 的转录因子,帮助 🐋 维持的 ESC 自我更新能力。
限 🐦 制分化:
滋养层细胞分泌抑制因子,如分化抑制因子 3 (LIF),这有助于限制分化 🐈 ESC 并促进其未分化状态。
保 🌵 护 🐘 ESC 免受 🌲 损伤:
滋养层细胞充 🐯 当 🌴 屏障,保护 ESC 免受压力和毒性物质的影响。
改善 🐼 贴 🕊 壁和生长 ☘ :
滋养层细 🦅 胞可以改善 ESC 在培养基板上的贴壁,并,促进它们的聚集生长形成称为胚状体的三维结构。
具体 🦆 机制 🦊 :
滋养层细胞通过多 🐈 种途径发挥这些作用:
分泌旁分泌因子:滋养层细胞将其功能 🌼 因子分泌到培养 🐟 基中,这些因子与 ESC 表面的受体相互作 🍁 用。
直接细胞接触:滋养层细胞与直接 🐼 ESC 相互作用,这 🌺 对于信号传递和营养交换至关重要。
细胞外基质形成:滋养层细胞产 🐴 生细胞 🐦 外 🐘 基质,为 ESC 提供机械支撑和生长信号。
炎症反应:滋养层 🌿 细胞可 🌷 以触发 ESC 中的轻微炎症反 💐 应,这 ESC 促进的自我更新和抗凋亡。
滋养层细胞在 ESC 培养中发挥着至关重要的作用,提供营养支 🦢 持、调、节、生、长 ESC 因,子信号维持自我更新能力限制分化 🦄 保护免受损伤并改善贴壁和生长。这 ESC 使。得维持的未分化状态和培养其发育潜能成为 🐝 可能
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3、滋养层 🌿 细胞 🐼 和滋养细胞的区别
滋养层细胞和滋 🐠 养细胞 🦉 的区别
定义滋养层细胞滋养层:的一部分,负责植入子宫内膜和获取营养 🌵 。
滋养细胞滋养:层最外侧的细胞层,直接与子 🐼 宫内膜接触。
起源滋养层细胞和 🐎 滋养细胞都 🌺 源自囊胚内部细胞 🐟 团。
功能滋 🍁 养 🦋 层细胞:
分泌蛋白质酶,帮助胚胎 🌴 侵 🐕 入子宫内膜。
建立胎盘循环,将母亲的营养物质 🐋 输送到胚胎 🐵 。
滋养 🪴 细胞 🦉 :
附着并侵蚀子宫内 🐘 膜。
吞噬子宫内 🦋 膜组织,为胚胎提 🦉 供空间。
分泌激素,调节 🌻 妊娠过 🍀 程。
结构滋养层细胞:多边 🐕 形细胞,含有丰富的胞浆和细胞核。
滋养细 🐈 胞:立方形细胞,含,有 🐝 大的扁平细胞核和嗜碱性胞浆其顶 🐎 部有微绒毛。
时间线滋养层细胞 🦁 和滋养细胞在囊胚阶段形 🌿 成。
滋养细 🦟 胞在植入期间最活跃,之后它们会被合体滋养层细胞取代。
其他差异滋养细胞直接与子宫内膜接触,而滋养层 🪴 细胞位于外部。
滋养细胞 🌸 参与免疫调节 🌵 ,而滋养层细胞不参与。
滋养细胞的异常增殖会导致妊娠滋养 🌿 细 🦋 胞疾病,如绒毛膜癌。
4、滋养层 🦉 细胞 🦢 培养干细胞的方法
滋养层细胞 🌴 培养干细胞 🪴 的方法
滋养层 🐼 细胞(TCs)是着床前胚胎中的一种细胞类型,具,有自我更新和分化为多种细胞类型的能力包括胚胎干细胞和(ESCs)诱导多能干细胞(iPSCs)。以下是培养以 TCs 衍生干细胞的方法:
1. 受精卵收集和 🕷 培养
从受精 🐕 治疗诊所或研究机构获得受精卵。
将受精卵在适合 🐠 受精前胚胎发育的培养液中培养。
2. 滋 🐎 养层细 🦅 胞分离
让受精卵发育到囊胚阶段(通常 🐎 需要 56 天)。
使用 immunosurgery 或激光显 🐳 微切割术清除滋养层细胞外部的滋养层细胞。
3. TCs 培 🦆 养 🐝
将分离的 TCs 转移到含有 TC 专用培养液的组 🌴 织培养皿中。
TC 专用培养液 🌾 通常含有基于干细胞培养 🐱 基的成分,例 🐈 如 mTESR1 或 StemPro34。
保持培 🐅 养在 37°C、5% CO2 和高湿度环境中。
4. 细 🐎 胞 🐦 传 🦟 代
当 TCs 达到 7080% 的汇合度时,使,用非酶消化剂例如 Accutase 或 🌲 TrypLE,将其传代 🐒 。
分散细胞并 🦉 将其重新接种到新鲜的培养液中。
5. 干 🐵 细 🐼 胞 🌹 衍生
胚 🪴 胎干细胞(ESCs):将培养 🐶 的 TCs 暴露于 OCT4、SOX2 和 NANOG 等重编程因子。
诱导多能干细胞(iPSCs):使(用病毒载体或转座 🐼 子将 🐯 重编程因 🦊 子如 OCT4、SOX2、KLF4 和 cMYC)引入 TCs。
6. 干细胞表 🌸 征
对衍生的干细胞进行免疫表 🦈 型分析(例如 SSEA1、TRA160)、培养分化潜能测试和成瘤形成分析,以确认其多能性。
提示:TC 培养需要专业技 🌿 术和设 🦢 施。
TCs 对 🐼 培养条件 💮 和生长因子敏感。
定期监 🐝 测培养 🦍 物,并根据需要进行调整。
始 🐝 终遵守伦理 🐋 指南和法规 🕷 。