神经 🦍 干细胞dongzuodianwei（神经干细胞动作电位传导和不应 🐝 期的实验实验方法）
- 作者: 郭瑶吉
- 来源: 投稿
- 2025-04-10
1、神经 🐞 干细胞dongzuodianwei
神经干 🦊 细胞分化 🕊
2、神 🦆 经干细胞动 🐞 作电位传导和不应期的实验实验方法
实验实验方法：神经干细胞动作电位传导和不应期的 🐵 研究
材 🐘 料和 🦍 试剂 🐦 ：
神经干 🐟 细胞培 🕊 养 🦊 物
全细胞膜片 🐘 钳记录系统
电生理 🐋 液（含 🦅 ：NaCl、KCl、CaCl2、MgCl2、HEPES）
四胺丁（抑 🐶 制 🦟 性突触传递阻滞剂）
六氯异环己 🐱 烷（电压门控钠离子通道阻滞剂）
四乙基铵（电 🦍 压门控钾离子通道阻滞剂）
方法：1. 细胞培 🐒 养和膜 💐 片 🍁 钳记录：
将神经干细胞 🐋 培养于适当 🦍 的培 🍁 养基中。
使用 🌾 全细胞膜片钳技术记录神 🌾 经干细胞的膜电位。
2. 动作 💮 电位 🐒 诱 🦉 发：
使用方波电 🐳 刺激器施加电流脉冲刺激神经干细胞，诱发动作电位。
记录动作电位的 🐱 振幅、半峰宽 🕊 和上升时 🌼 间。
3. 不应期的测量 🐞 ：
在引发动作电位后，施加第二组电 🦟 流 🐦 脉冲以测试 🐧 不应期。
测量第二个电流脉冲引 🦢 发动作电位 🐳 所需的阈值电 🦅 流。
4. 离子通道阻滞剂 🦍 的影 🐅 响：
加入 🌿 四胺丁抑制抑制性突 🐘 触传 🦋 递。
加入六氯异环己烷抑 🐅 制电压门控钠离子通 🍀 道。
加入四 🦟 乙基铵抑制电压门控钾离子通道。
5. 数据 🐎 分 🌴 析 🌾 ：
使用离线分 🐡 析软件分 🐴 析膜片钳记录。
比较不同 🐺 实验条件下动作电位和不应期的参数。
预 🦅 期 🦊 的结果：
动 🌾 作电 🍀 位 🍁 ：
观察到全或无 🪴 的动作电位。
动作电位振幅、半峰宽和上升时间随电流刺激强度而变 🕸 化。
不 🍁 应期 🐵 ：
动作电位后观察到绝对不应期和相对 🌷 不应 🐋 期。
绝对不应期 🌹 的持 🌿 续 🐎 时间随动作电位振幅而变化。
离子通 🐎 道阻滞 ☘ 剂的 🐼 影响：
六氯异环己烷阻断动 💮 作电 🕸 位传导。
四乙基铵 🌿 延长不应期。
结论：本实验实验方法可以用于研究神经干细胞兴奋性的基础，包括动作电位传导和不应 🐧 期的调节。
3、神经干 💐 细胞动作电位传导和不应期的实验
实验：神 🌼 经 🌳 干细胞动作电位传导和不应期的实验
目的：研 🦆 究神经干细胞的动作电位传导 🌳 特性
确定神经干细胞的不应 🐵 期
材料：神经干 🐕 细胞培养物 🦈
外 🐒 部刺激电 🦅 极 🌳
记录 🌵 电极 🌻
电生理 🐶 放 🐕 大器
示波器培养基
步骤：
1. 神 🐯 经干 🐝 细胞培养
将神经干细胞接 🐈 种在培 ☘ 养皿中，并用 🦈 合适的培养基培养。
等待细胞生长和成熟，直 🐎 到 🐼 形成 confluent 的单层。
2. 电 🕸 生 🦊 理记 🐧 录设置
将外部刺激 🌼 电极放置在培养皿的一端，记录电极 🦈 放置在培养皿的另一端。
使用电生理放大器和 🐛 示波器 🐅 记 🌷 录动作电位。
3. 动作电 🐱 位 🐎 传 🌸 导
施 🌷 加一系列不同强度的电刺激到外部刺激电极，并记录相应的动作电位。
测量动作电位传播到记录电极所 🕊 需的时间，计算传 🐧 导速度。
4. 不应期 🐯
对神经干 🌷 细胞施加一对超阈值刺激。
记录两个动作电位之间的间隔，测量绝对不应期两个动作电位之间 🐋 （第，二 🌹 个动作电位无法触发的间隔）。
同样，记，录，绝 🌸 对不应期后相邻两个动作电位之间较 🦄 小间 🌳 隔测量相对不应期（第，二个动作电位可以引发但幅度较小）。
5. 数 🌻 据分 🐛 析
绘制动作电位传导速 🐵 度 🐵 与刺激强度之间的关系图 🐳 。
分析绝 🐴 对不应期和相对不应期的 🦢 长度 🌷 。
预 🦉 期结果：
神经干细胞的动作电 🌴 位传导速度与刺激强度呈正相关。
神 🦆 经干细胞具有绝对不 🦍 应期和相 🦋 对不应期。
讨论：该实验提供了神经干细胞动作 🕸 电位传导和不应期的定量测量。这。些特性对于理解神经干细胞在中枢神经系统发育和功能中的作用至关重要
4、神经干细胞 🦈 动作电位幅度随刺 🦉 激而增大
“神经干细 🦋 胞产生动作电位，其幅度随着刺激 🐒 强度的增加而增大。”
