广州小 🌲 鼠多能干细胞（小鼠脂肪干细胞怎么提取）

1、广州小鼠多能干 🌿 细胞 🐎

广州小鼠多能 🍁 干 🐞 细胞

广州小鼠多能干细胞（Guangdong iPSC）是一种具有生成几乎所有身体 🐝 细胞类型的潜力的多能干细胞。它们是从广州市小鼠胚胎中分离出的，并，经过基 🌹 因改造使其表达人类基因Oct4、Sox2、Klf4和cMyc。这。些基 🍀 因赋予了广州小鼠多能干细胞自我更新和分化成不同细胞类型的能力

多能性 🐺 ：广州小鼠多能干细胞可以 🐡 分化为所有三胚层（内胚层、中胚层和外胚层）的细胞 🦆 类型。

自我更新：广州 🦁 小鼠多能干细胞可以在培养皿中无限期地自我更新，而不会失 🐕 去其多能性。

基因修饰：广州小鼠多能干细 🐅 胞经过基因改造，具有稳定表达人类OCT4、SOX2、KLF4和基因cMYC。

广州小鼠多能干细胞具有广 🦋 泛的应用前景，包括：

疾病建模：可以通过将患者特异性 🌺 突变引入广州小鼠多能干细胞来研究 🐈 人类疾病的机制。

药 🐋 物筛选：广 🕸 州小鼠多 🐧 能干细胞可用于筛选针对特定疾病的新药和治疗方案。

细胞移植：广州小鼠多能干细胞可以分化为各种细胞类型，用于治疗 🐒 细胞缺失或受损导致的疾病。

再生医 🐎 学：广州小鼠多能干细胞可以用于再生受损或退化 🕷 的组织和器官。

稳定性：广州小鼠多能 🌼 干细胞是基因稳定的，具有较低的肿瘤 🐟 形成潜力。

可控性：广州小鼠多能干细 🐎 胞的基因 🐳 表达可以通过调控转录因子水平来控制。

来源 🐶 丰富：广州小鼠胚胎易于获得，为大规模生产广州小鼠多能干 🦊 细胞提 🐳 供了充足的来源。

物种 🐧 差异：广州小鼠多能干细胞是人和小鼠混合细胞，在用作人类研究模型时需要考虑物种 🍀 差异。

免疫排斥：移植异种广州小 🐒 鼠多能干细胞衍生的细胞可能引发免疫排斥反 🐋 应。

伦理问题：广州小鼠多能干细胞的应用涉及伦理问题，例如使用人类胚胎中的细 🐧 胞。

广州小鼠 🦍 多能干细胞的不断发展有望为医学研究和再生医学带来革命性突破。通过解决其局限性广州小鼠多能干细胞有，潜力成为疾病治疗、药。物发现和组织工程领 🌼 域 🐛 的强大工具

2、小鼠脂肪干细胞 🐺 怎么 🐵 提取

小鼠 🐒 脂肪干细 🌳 胞提取步 🐘 骤

46 周龄 🐛 小鼠

无菌解剖工具 (镊 🐋 子、剪、刀 🦅 刀片)

10 cm 培养皿 🌻

含抗生素的培养 🐒 基 🐕 (如培养基 DMEM/F12 青 + 10% FBS + 1% 霉素链 🐛 霉素)

脂肪消 🐧 化酶 (如胶原酶 🦋 IV)

过 🕷 滤网 🍁 (100 μm)

PBS 缓 🐦 冲 🦋 液 🌵

1. 动物准 🌲 备：麻醉小鼠并用 70% 酒精消毒手术区域。

2. 脂肪组织采集：从腹壁切开一个约 1 cm 的切口，小心地取出 🌻 腹腔内 🌻 脂肪团。

3. 脂肪消化：将脂肪组织切 🌵 成小块，并将其转移到含有消化酶的培养基中。在培养 37°C、5% CO2 箱中消化小 1 时，以。上直至脂肪组织 🐴 完全消 🐋 化

4. 细胞分离：用过滤网过滤消化物，去除未消化的碎 🐳 片和细胞碎片用。含。抗生素的培养基洗涤细 🦊 胞

5. 离心：将细胞悬液以 🌵 离心 🌴 1200 rpm 分 10 钟 🌹 。弃。去上清液

6. 重悬：用培养基重悬细胞，并转移到培养皿中 🦟 。

7. 培养：将细胞培养 ☘ 在培养 37°C、5% CO2 箱中培养。基应每 23 天。更换一次

使用干净的 🌼 工具和材料以防止细胞污染。

在無菌环境下 🌷 进行操作。

消化时间可能因消化酶和脂肪组 🐦 织的大小而异 🐳 。

培养 🦄 基应含有抗生素以防止细菌 🐡 或真菌感染 🌷 。

3、小鼠 🌴 间充质干细胞大 🦋 小

2060 微 🐬 米

4、小鼠脂肪干细 🐯 胞提取

小鼠 💐 脂肪干 🐠 细胞提取步骤

无菌仪器和材 🐼 料（手术刀、镊、子、培、养基培养皿显微镜）

脂肪组织收集缓冲液（如磷 🌳 酸缓冲液 PBS）

1. 手 🦉 术准 🐦 备 ☘

对小 🐴 鼠进行麻 🐺 醉。

剃除小鼠背 💐 部或腹部的毛发 🕷 。

消毒 🌺 手 🌻 术 💮 区域。

2. 脂 🐋 肪组织收集 🐬

使用手术刀在 🦅 皮下组织中做一个小的切口。

用镊子小心地分离皮下脂肪组织 🌻 。

将脂 🐝 肪组 🦅 织转移到含 🐈 有收集缓冲液的无菌培养皿中。

3. 脂肪 🐯 组织消化

加入消化酶（如胶原 🦄 酶 IV）和缓冲 🌷 液，覆盖脂肪组织。

温 🕷 育 37°C，12 小，时直至脂 🐠 肪组织完全消 🐛 化。

每 🦉 30 分钟轻轻摇晃培养皿，以确保均匀消化。

4. 过 🕊 滤和离 🐛 心 🕷

使用 100 μm 细胞滤 🌵 网过滤 🌷 脂肪组 🐒 织消化液。

将滤液转移到 🐴 离心管中，并在 🦢 离心 4°C，1,200 x g 分 10 钟 🐛 。

5. 去除上清液和 🐛 悬浮细胞

小心地去除上清 🦄 液 🌵 。

将沉淀 🐝 的细胞用培养 🐡 基悬浮。

6. 过柱层析分离 🐋 干 🐒 细胞

使用干细胞过柱层析分离法将脂肪干细胞与其他细胞类型 🐝 分离。

选择合适的层析柱（如 Ficoll 密度梯度离 🌵 心法）。

根据制 🌳 造商的 🌼 说明进 🦢 行层析分离。

7. 收集脂肪干 🌷 细胞

收集 🦆 富 🌳 含脂肪干细胞的 🐋 级分。

根据需要，可以通过 FACS 分 🦁 选或其他方法进一步纯化干细胞。

8. 培 🐒 养脂肪干 🌲 细胞

将脂 🌷 肪干细 🐵 胞悬浮 🌵 在适当的培养基中。

将 🐎 悬浮液转移到培养皿 🌸 中。

将培养皿置于 37°C，5% CO2 的 🐴 培 🐴 养箱中培 🐠 养。

使用无 🕷 菌技 🐛 术，以防止污染。

优化消化条件 🐎 和层析参数，以获得最佳的干细胞产量和纯度。

筛 🐯 选脂肪干细胞的特 🐎 定标记物（如 CD34、CD90、CD105），以确保纯度 🐛 。