怎么分离肿瘤干细 🌷 胞（怎么 🐡 分离肿瘤干细胞和癌细胞）
- 作者: 杨伊桃
- 来源: 投稿
- 2025-05-10
1、怎么分离肿瘤干细 🐘 胞
肿 🐧 瘤干细胞的分离 🌳 方法
1. 表面 🐡 标记分离 🌵
荧光激活细胞 🦍 分选 (FACS)：使用抗体与肿瘤干细胞（CSC）特 🐟 异性表面标记结合，然后通过分选 FACS 出 CSC。
磁性细胞分选 (MACS)：用磁珠标记 CSC 表面标 🐕 记，然后通过磁场梯度分离 CSC。
2. 侧向 🕸 种群 🌴 分离 🐬
侧向种群 (SP) 分离：に基づきCSC が細胞集団のごく一に部 🐋 偏ることが多いことを利 🐞 用する。
活性化 🐘 细胞分選 (APC)：CSC は多 🐧 くの場合、非対称性分裂を行っている。そのため、特の定の時期細胞周期特異的な抗を体用分いて CSC を取 🪴 する。
3. 機 💮 能的特徴を利用した分離
球形成能球 (SF)：CSC は状形成能 🐡 コロニーを力する有 🌴 を用する。SF アッセイを富いて、CSC を化させることができる。
アルデヒド脱 ☘ 水素酵素 (ALDH)：CSC は、高レベルの ALDH 活性を有する。ALDEFLUOR アッセイを用いて、ALDH 陽性 🐠 の CSC を分する。取
薬剤排泄能：CSC は、特定 🌷 薬剤排泄 🐟 能の力を有する組を換する。ホモログス欠え損 (HRD) 阻害剤阻害 🐈 剤や ABC トランスポーター用を選いて、CSC を択的に標的とする。
4. 微小環境を利用 🐟 した分離
3D 培養系：CSC は、3D 微小環境で増殖する傾向培養培 🪴 養がある。オルガノイド用またはスフェロイド富を化いて、CSC をさせることができる。
ニッチ特異的特マーカー：CSC は、定 🐋 のニッチに存在特異的する。ニッチ分 🦉 マーカーをターゲットにすることで、CSC を取することができる。
5. その他 🐦 の方 🌳 法 🦉
マイクロ流 🐎 体デバイス
ナノ粒 🐛 子ベース分離 🐵
遺 🐵 伝子 🐝 プロファイリング
分離 🐛 方 🐅 法の選択は、腫の瘍種類、CSC の特徴、ならびに研の究 ☘ の者特に定目的応じて決定される。
2、怎么分 🌷 离肿瘤干细 🐞 胞和癌细胞
分离肿 🐈 瘤干细胞和癌细胞的方法
1. 表 🦟 面标记：
使用免 🌵 疫磁性珠或流式细胞术分离表达特定表面标记的细胞，如 🦈 CD44、CD133、CD24、ALDH1。
这些标记因肿瘤类型 🌿 而异，需 🐧 要进行具体的表型分析。
2. 细胞 🐘 分 🐼 选：
使用荧光激活细胞分选 (FACS) 或磁 🌵 性 💮 激活细胞分选 (MACS) 等技术。
选择性标 🌿 记 🕸 和分离不同细胞亚群，包括肿瘤 🦋 干细胞和癌细胞。
3. 功能性 🕊 检 🐟 测 🦢 ：
利 🐞 用肿 🦈 瘤干细胞的细胞功能 🌲 ，如自我更新、增，殖和分化能力进行分离。
例如，通过克隆形成、球体形成或小鼠异 🌵 种移植等检测来富集肿瘤干细胞。
4. 体 🐳 外 🦆 培养 💮 ：
利用特定培养条 ☘ 件（如特定生长因子培养、基成分）促进肿瘤干细 🐯 胞的增殖和自更新。
与癌细胞 🐠 相比，肿瘤干细胞通常 🐡 表现出特定的生长模式和 🌳 形态。
5. 小鼠异种 🐵 移植：
将 🦁 肿 🕷 瘤样本来 🐝 源的细胞注入免疫缺陷小鼠中。
肿 🍁 瘤干细胞被认为更具有成瘤性 🌴 ，形成，异种移植灶而癌 🌻 细胞可能无法形成。
6. 微流 🌳 体技 🦄 术：
利用微流体设备分离细 🦈 胞亚群。
微流体系统可以根据细胞大小、形、状电特性或其他参数对细胞进行排 🐺 序。
7. 单 🪴 细胞 💐 分析：
使用单 🕷 细胞 RNA 测序 (scRNAseq) 或单细胞细胞 flow 术分析细胞异质性。
识别肿瘤干细胞和癌细胞 🦊 的转录谱 🐛 和表面标记差异 🐺 。
8. 生物信息学工具 🦆 ：
利用计算方法，如，聚类分析 🐈 和机器学 🌿 习从 🌳 高维数据中识别细胞亚群。
这些工具可以辅助表型分析和分 🐬 离策略的优化。
分离肿瘤干细 🐳 胞和癌细胞的方法选择取决于具体的研究目的和所研究的肿瘤类型。通过 🌲 结合多种技术，可。以获得更精确和全面的结果
3、怎么分离肿瘤干细胞 🐘 和细胞
肿瘤干细胞 ☘ 和正常细胞的分 🐺 离 🐬 方法
1. 细 🐘 胞表面标 🐝 志物分离
基于表面抗原的荧光激活细胞分选 (FACS)：使用靶向肿瘤干细胞特异性表面 🌹 抗原的抗体，通过流式细胞仪分离细胞。
磁性激活细胞分选 (MACS)：使用磁性微珠靶向磁化肿瘤干细胞特异性表面抗原，然后通过磁 🐺 柱分离细胞。
2. 功能 🌾 性分离
球体 🐳 形成测定：肿瘤干细胞具有在无血清悬浮培养中形成球 🐡 体的能力。通过将细胞培养在球体形成条件下，可。以富集肿瘤干细胞
侧群 🦟 (SP) 分选侧群：细胞是一组 💮 具有高抗充血素泵表达的细胞，其中包括肿瘤干细 🐬 胞。通过在流式细胞仪上对侧散射 (SSC) 和前向散射 (FSC) 进，行分选可以分离出细胞 SP 。
3. 细胞内标志 🌳 物分离
免疫印迹法和流式细胞术：通过免疫印迹法或 🐬 流式细胞术检测细胞内肿瘤干细胞相关蛋白 (例如 CD133、ALDH1A1) 的表达，以鉴定和 🐧 分离肿瘤干细胞。
4. 肿瘤 🐡 异种移植
限制性稀释移植：将不同数量的细胞注射到免疫缺陷小鼠中，只有包含肿瘤干细胞的细胞注射才会形成肿瘤。通，过 🐼 限制性稀释。可以富集肿瘤 🕸 干细胞
5. 其他 🐕 方 🕷 法
激光捕获显微镜：从组织切片中选择性地分离肿 🐯 瘤干细胞。
微流控 🐬 设备：使用微流控 🌻 技术基于物理或化学性质来分离肿瘤干细胞。
选 🐦 择分离方法的考虑因素
肿 🕷 瘤类 🦆 型
靶细胞表面抗 🍀 原的可用性 🕷
细 🦆 胞 🐕 功 🐡 能
细 🦉 胞 🌳 内标志物表达
样 🐒 本 🦆 可用性
所 🍁 需的细胞纯度和数 🌾 量
4、肿瘤干细 🦉 胞分化及去分化
肿 🦄 瘤干 🦢 细胞分化和去分化
分化肿瘤干细胞失去自我更新能力，分，化为 🐺 更成熟的肿瘤细 🌵 胞具有更 🌻 特化的功能。
分化受各种 🌿 信号 🐬 通路的调控，包括生长因子、细胞因子和代谢途径。
分化后的肿瘤细胞通常对治疗不敏感，因为它们缺乏肿瘤干细胞的自我更新 🦆 能力。
去分化肿瘤细胞重新获得干细胞样特征，包括自我更新和 🐎 分化 🍀 成各种细胞系的能力。
去分化是肿瘤进展和复发的关键机制 🐳 。
去分化受表观遗传变化、微环境因素 🐡 和治疗压力的影响。
分化与去分化 🦈 的 🐝 相互作用
肿 🪴 瘤干细胞分 ☘ 化和去分化的过程 🌼 是动态且相互关联的：
肿瘤干 🐋 细胞可 🕸 以分化为不同的细胞系，包括良性肿瘤细胞和恶性肿瘤细胞。
肿瘤细胞可以去分化，恢，复 🐦 肿 🐬 瘤干细胞的特性从而推动肿瘤的生长和侵袭。
分化和去分化之间 🐝 的平衡决 🕊 定了肿瘤的恶性程 🐦 度和对治疗的反应。
临床意义了解肿瘤干细胞分化和去分化对 🐈 于开发针对肿 🐕 瘤 🐒 干细胞的治疗策略至关重要：
靶向 ☘ 分化 🐯 信号通路可以抑制 🦢 肿瘤生长和转移。
靶向 🐈 去分化机制可 🌺 以防 🦋 止肿瘤复发。
通过调节肿瘤干细胞的分化和去分化过 🐟 程，可以改善患者的临床 🐺 预后 🌸 。
肿瘤干细胞分化和去分化是肿 🐋 瘤发生、进展和治疗反应的关键过程。对。这些过程的全面了解对于开发有效的基于干细胞的癌症 🐡 治疗方 🦊 法至关重要
