干细胞鉴定marker(间充质 🐛 干细胞鉴定三个 💐 标准)
- 作者: 郭黎初
- 来源: 投稿
- 2025-05-14
1、干细胞 🐎 鉴定 🐱 marker
干细 🐟 胞鉴定 🌵 标志物
干细 🌵 胞鉴定标志物是指用于鉴定和表征 🐘 不同类型干细胞的特定蛋白或分子。这些标志物对于研究干细胞生物学、诊。断和监测干细胞治 🍀 疗至关重要
常见 🐬 干细胞 🪴 鉴定标志 🦈 物:
胚 🕊 胎干细胞 (ESC)
Oct4 (POU5F1)
Sox2
Nanog
Klf4
cMyc
诱 🦈 导多能干 🐺 细 💐 胞 (iPSC)
Oct4
Sox2
Klf4
cMyc
Lin28
Nanog
间充 🕷 质 🐱 干细胞 🐕 (MSC)
CD73
CD90
CD105
CD44
CD29
造 🐕 血干细胞 (HSC)
CD34
CD133
CD38
CD45
CD90
神经 🌷 干细胞 (NSC)
Nestin
Sox2
Pax6
GFAP
DCX心 💮 脏干 💮 细 🐟 胞 (CSC)
cKit (CD117)
Sca1 (Ly6A/E)
Isl1
Nkx2.5
GATA4
肝脏 🐺 干细胞 🌺 (HPC)
CD133
CD44
EpCAM
CD34
OV6上 🦉 皮 💐 干细 🌻 胞 (ESC)
CD34
CD44
EpCAM
KRT19
p63内 🌿 皮 🦁 干 💮 细胞 (EPC)
CD34
VEGFR2
CD133
CD31
vWF还存 🐝 在用于识别干细胞功能和分 🌺 化状态的标志物,例如:
增殖标记物 🌴 :Ki67、PCNA
分化标记物:FABP4(脂肪细胞)、MAP2(神)经 🦍 元
自更新标 🐎 记物:Bmi1、Olig2
值得注意的是,不,同的干 🕷 细胞类型可能表达不同的标志物并且标志物表达模式可能会根据细胞培养条件和分化状态而变化。因,此,在干细胞。鉴定中使用 🐵 多 🌺 种标志物非常重要以确保准确性
2、间 🐼 充质 🐦 干细胞鉴定三个标准
间 🐴 充质干 🐬 细胞 (MSC) 鉴定的三个标准 🌹 :
1. 表面标志表达:MSC 通常表达 CD73、CD90 和 CD105 等表面标 🦟 志,同时不表 🌼 达 🦅 CD14 或 CD45。
2. 多向分化潜能能:MSC 够在体外向 🪴 成骨细胞成、软骨细胞和成脂肪细胞 🦉 等多种细胞系分化。
3. 贴壁生长:MSC 在培养基中贴壁生长,形成 🐵 细长或梭形的细胞形态。
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3、间充质干 🦆 细胞鉴定标准
间充质干细胞鉴 🐎 定标准
国际间 🐎 充质干细胞协会(ISCT)于2006年制定了一套间充质干细胞(MSC)的鉴定标准,该 🦋 标准包括以下三个方面:
1. 粘 🐶 附能 🐈 力
MSC在体外 🐝 培养中 🦅 可以贴壁生长,呈纺锤形或梭 🐳 形。
2. 表面标志 💮 物
阳性 🐛 表面标志物:CD105、CD73、CD90
阴 🐕 性表面标志物:CD45、CD34、CD14或或 🦆 CD11b、CD79a低 💐 表CD19、HLADR(达)
3. 多 🐘 向分 🌳 化潜能
在适当的诱导 💮 条件下,MSC可以分化为以下三种类型的细胞:
骨 🦋 细胞( остеогенная дифференцировка)
脂 🪴 肪 🍁 细胞( жировая дифференцировка)
软 🍁 骨细胞( хрящевая дифференцировка)
4、间 🌲 充质干 🦄 细胞流式鉴定
间充 🌹 质干细 🐦 胞(MSCs)流式鉴定
MSCs 是一组多能性间充质 🕊 干细胞,广泛存在于各种组 🦆 织中。为了表征和鉴定 MSCs,流。式细胞术是一种常用的技术
步骤:1. 样品制 🌳 备:
从感兴趣的组织或细 🐡 胞培养 🦊 物中 🐠 分离细胞。
用磷酸盐缓冲盐水 🦋 (PBS) 或含有 EDTA 的缓冲液洗涤细胞以去除血清或生长因子。
2. 抗体 🐬 标 🕸 记:
用荧光标记的 🌾 抗体孵育细胞,这 🦄 些抗体靶向 MSCs 表面的特定表面标记物。
通常使 🦢 用 🦍 的标 🐡 记物包括:
CD73、CD90、CD105
CD44、CD29、CD166
SSEA4、Stro1
3. 孵 🦢 育 🌵 :
将标记的细胞在 4°C 下孵育 3060 分钟,避光 🌸 。
4. 洗涤和 🌳 固 🦄 定:
用 PBS 洗涤细胞以 🐞 去除 🐱 未结 🕊 合的抗体。
用 4% 多 🐳 聚甲醛或 🐼 其他固定剂 🌿 将细胞固定。
5. 流式细胞 🐺 术分 🐟 析 🍀 :
将固定后的细胞 🐬 用流式细胞仪分析 🐯 。
根据荧光强度和抗体结 🌻 合模式,使用流式细胞术软件门控 MSCs 群体。
阳性标 🌺 准:
MSCs 通 🦍 常定义为:
CD73?、CD90?、CD105?(国际细胞治疗 🌸 学会 (ISCT) 标准 🦋 )
并且缺 🐱 乏血 🦉 细 🌷 胞标记物,如 CD34、CD45
限制:不 🍁 同的 🐕 抗体标记组合和分析标准会导致 MSCs 鉴定结果的差异 💮 。
流式细胞 🐡 术只能提供细胞表 🌺 面标记物的信息,而 🌹 不是功能表征。
应用:MSCs 流 💐 式 🐘 鉴 🐺 定用于:
表征和鉴定 🦟 MSCs 群体
监测 MSCs 的分 🪴 化和再 💮 生能 ☘ 力
研究 MSCs 的生物学 🍀 特性和疗 🐅 效