干细胞显微镜下计数方法（干细胞的量 ☘ 用什么表示）
- 作者: 马珂芋
- 来源: 投稿
- 2025-10-12
1、干细胞显微 🌷 镜下计数方法
干 🐦 细胞显微镜下 🐕 计数方 🕊 法
材料：干细 🐧 胞培养 🐼 物
培养基移液管
细胞计数 🦋 板 🐈
显微镜血细 🐦 胞 🪴 计 🐒 数计
步骤：1. 准备 🦄 细胞悬液
从培养物中取出细胞，并用培养基稀释到合适的浓度（通常 💮 为 10^510^6 个细胞/毫升）。
充 🦉 分混合细胞悬液。
2. 装载 🐼 细胞计数 🕷 板 🐋
用移液管将 10 μl 细胞悬液滴到细胞计数板的 🐠 两个计数室中。
3. 放 🐈 置 🦊 计数 🌷 板
将计数板盖上盖子，并将计数室置 🐠 于显微 🐕 镜视 🐱 野中心。
4. 计 🐼 数细 🦋 胞 🦍
在显微镜下 100 倍或倍 200 放大倍率下观察计数 🦉 室。
数 5 个方 🦈 格中 🦁 的细胞数，并分别记录 🌵 两个计数室的细胞数。
5. 计 🕷 算细胞 🌸 浓 🐛 度
使用以下公 🐬 式计算细胞浓度 🐕 ：
细胞浓度 🐺 (个/毫升细胞) = (总数 / 5) (稀 🐅 ) (释)因子细胞计数板 💮 体积
其中：
细胞总数：计数室中 5 个 🐡 方格中计算的细胞总数的平均值
稀 🐝 释因子：细胞悬液稀 🐴 释的倍数
细 🪴 胞计数板体积：通常为 0.1 μl
6. 计算细 🦊 胞总数
使用以下公式计算细胞总 🦈 数：
细 🌼 胞总 🌳 数细胞 = 浓度 (个/毫升) 培 (养)物体积毫升
提示：
使用新 🪴 鲜制 🐼 备的细胞悬液。
确保计数室装载适当量的细胞悬液，避免过稀或 🐬 过稠 🌻 。
计数 🐘 时保持计数板稳定。
为提高准确性，重复计 🦈 数几次并计算平均值。
2、干细胞的量用什么表 🐒 示
细胞数
3、干细胞采 🌼 集计算公式 🐅
干细胞采集计 🐴 算公式 🌸
全血采集量（毫升）= 体（重公斤 🦅 ） x 储（存体积毫升公斤/）
储 🦟 存体积（毫升/公斤）通 🕷 常基于以下因素进行计算：
目标干细胞数量（百万个）：要收集的干细 🐘 胞数量。
预期干 🌸 细胞浓度（百万个/毫升）：从血液中提取干细胞 💮 的预期浓度。
安全裕量：为确保收集到足够 🐧 的干细胞 🦅 而增加的体积。
常见 🦍 储 🌷 存 🐘 体积：
自体造血 🦈 干细胞采 🍁 集：3045 毫升 🐞 /公斤
同种异体造血干细胞采集 🦅 ：1525 毫升/公斤
示例计 💐 算：
一名体重 70 公斤的 🐘 患者需要采集 500 万个干细胞，预 500 期干细胞浓度为万个/毫，升并考虑的 20% 安全裕量。
储存体 🦆 积 = 500 万个 🐎 干细胞万个 🌷 / (500 毫/升) + 20%
储 🪴 存体 🐼 积 ☘ = 1.2 毫升/公斤
全血采集量 = 70 公 🐞 斤 x 1.2 毫升公斤/
全血采集 🌷 量 = 84 毫升
因此，从该患者体内需要采集 🌷 84 毫 🌼 升的全血以获得 500 万个干 🐛 细胞。
4、干细胞采集数 🐟 量计数
干细胞采 🌵 集数量计 🐯 数 🦋
步骤：1. 准备 🌲 材料 🐞
干细胞悬浮 🪴 液 💐
细胞计数板（如血球 🐱 计数板）
显微镜吸管
缓冲液（如磷酸盐缓 🐛 冲液 💮 PBS）
2. 制备 🐒 细胞悬浮液
将干细胞悬浮于 🍀 缓 🦢 冲 🦍 液中。
轻轻涡旋或吹打细胞悬浮液，使其充分混 🪴 匀 🌺 。
3. 装载细胞计 🦈 数板
使用吸管小心地吸取细胞悬浮液，滴加到细胞计数板的凹 🦋 槽中。
等待几分钟 🌻 ，让细胞 🌿 沉降至计数板底部。
4. 计数 🕷 细胞
在 🌵 显微 🦁 镜下观 🌸 察计数板。
使用 🌺 网格计数区域内的细胞数量。
记录网格 🦅 内细 🕸 胞的 🦍 数量。
5. 计算总 🌺 数
根据网格的面积和 🌵 总体 🐋 积，计算细胞悬浮液中的细胞总 🌾 数。
公式：细胞总数 = 网 🐳 格内 🦊 细胞数 🕸 量 x 稀 x 释因子体积
其中：稀 🌵 释因子：细胞悬浮液稀释 🐟 的倍数
体积：装载在计数 🐦 板上的细胞悬浮液体 🕷 积
注 🪴 意 🐠 事 🐞 项：
确保细胞悬浮 🌺 液充 🌷 分混匀，以获 🐯 得准确的计数。
使用干净的细胞计数板和 🦁 吸管。
计数多个网格区 🕸 域以提高 🐼 准 🌷 确性。
对于较低细胞浓度的样品，可能需要使用显微镜下的图像分析软件来 🌷 计数。
