血 🐟 液中如何 🦉 提取干细胞(从血液中提取干细胞需要多长时间)
- 作者: 郭黎初
- 来源: 投稿
- 2025-05-14
1、血液中 🦟 如何提 🐟 取干细胞
血液中提取干细胞的步 🌺 骤
1. 采 🌷 集 🐵 血液 🦢
从静脉中采集约 450500 毫升血 🌸 液。
2. 离 💐 心 🐺 分离 🍁
将 🌺 血液在离心机中进行离心将血,细胞与血浆分离开 🐕 来。
白细胞和血小板会聚 🐦 集在富血小板血浆 (PRP) 中。
3. 收 🐅 集 PRP
小 🦁 心抽取 PRP,避免污染其他细胞类型 🦅 。
4. 白血 🐘 球分 🐕 离 🌻
将 PRP 在离心机中进一步 🌷 离心将,白血球分离出来。
这些白血 🐼 球中含有 🐶 干细胞。
5. 干 ☘ 细胞富集
使用抗原结合抗体或其他标记物 🍁 ,从白细胞中分离出干细胞。
6. 扩增(可 🐎 选 🐴 )
如果需要,可,以 🐡 在培养 🐞 皿中扩增干细 ☘ 胞以增加数量。
7. 验证 🐒
使用流式细胞术或其他技术验证 🐱 干细胞 🐵 的特性,例如 CD34、CD45 和 HLADR 表达 🐘 。
其他方法除了上述标准方法外,还,有其他方法可以从血液中 🍁 提取 🪴 干 🐬 细胞包括:
流式细 💮 胞分选 (FACS):使用荧光标记抗体将干细胞从其他细胞中分选出来。
磁性激活细胞分选 (MACS):利用磁性微珠 🦅 将干细胞与其他细 🐘 胞分离开来。
自体荧光激活细胞分选 (FACS):利用干细胞固有的自体荧光来分选 🦈 它 🕸 们 🐶 。
2、从血液中提取干细胞需要 🌺 多长时间 🐞
从血液中提 🐅 取干细胞需要的时间因所用方法和采 🌾 集的干细 🌳 胞类型而异。
外周 🍀 血 🌿 干细胞 🐅 (PBSC)
白血病分离术 (Leukapheresis):通 🐼 常需 🌿 要 46 小时,但,可能需要更长时 🐡 间具体取决于目标细胞数量。
造 🌵 血 🐺 干细胞 (HSC)
血液样本采集 🌺 :单次采集可能需要 3060 分钟 🦋 。
细胞分离:使用荧光 🌻 激活细 💮 胞分选 (FACS) 或磁性分离等技术分 🐦 离干细胞,需要几个小时到几个星期的时间。
其他 🐞 影响因素
以下因素 🦈 也 🌼 会影响提取时间:
供 🦅 体的年 🌹 龄和健康状 🌸 况
目标细 🐅 胞数量 🌷
所使 🐅 用的设备和方法
总体而言,从血液中提取干细胞可 🐦 能需要 几 个,小时到几个星期的时间具体取决于所选方法和采集 🦍 的干细胞类型。
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3、血液中如 🌴 何提取干细胞 🐼 的方法
血液 🍀 中提取干细胞的 🐛 方法
1. 单采 🐳 血 🪴 小板 🕷
通过血细胞分离机,从全血中分 🌺 离出富含干细胞的血小板。
血小板中含有较高的巨核细胞,它们可以分化为 🐬 血小 🦉 板 🦁 和干细胞。
2. 浮选 🐱 法
将全血离心,分 🐒 离血浆和细胞。
在细胞层 🦆 上加入 🐶 浮选液,密度较小的干细 🦁 胞浮到表面。
收集浮 🐧 选液中的干 🐺 细胞 🐋 。
3. 免 🐦 疫 🐟 磁珠法
使用与干细胞表面特异性蛋白结合的 🐈 免疫磁珠。
将磁珠 🦟 与全 🐺 血混合磁 🌻 珠与,干细胞结合。
用磁场吸附磁珠,从而收集干细 🐵 胞。
4. 流 💐 式细胞术
使 ☘ 用荧 🌵 光标记抗体识别 🍀 干细胞的特异性表面蛋白。
将标记好的细 🐕 胞通过流式细 🐅 胞仪,根据荧光信号分离干细胞。
5. 纤连蛋白柱层析法 🐴
纤 🐈 连蛋白是干细胞的粘 🦁 附因子 🪴 。
将全血通过纤连 🐱 蛋白柱,干细胞会粘附在柱上。
用适当的缓冲液洗 🦢 脱干细胞。
6. 培养富 🦋 集法
将全血或分离出的单核细胞培养在特定 🌺 的培 🐱 养基中。
培 🌳 养基含有促进干细胞增殖的生长因子。
经过一 🦈 段时间的培养,干细胞数量会 🐅 富集。
7. 微流 🐬 控 🌸 技术 🕸
利用微流控器件,通过大小、形状或电荷等物理特 🦁 性来分离干细胞。
该 🐠 方法高效且精确,可用于大规模分离。
注意:干细胞提取方法的选择取决 🐵 于所需干细胞的类型和数量。
提取过程必须在 🐟 无菌条件下进行,以避 🌿 免污染 🦆 。
分离后的干细胞需要进一步培养 🐡 和表征 🐯 ,以确保其纯度和活性。
4、怎么从血液里提取 🦍 造血干细胞
从血液中提取造血干细 🐺 胞的步骤:
1. 采 🌷 集外周 🦅 血
从静脉抽取大 🐠 量外周血(通常为 400700 毫升)。
使用抗凝剂防止血液 💮 凝 🌾 固。
2. 分 🕊 离单 🕷 核 🌵 细胞
将血液 🌷 样品与分离液混合并离 🦊 心。
分离液的密度介于红细胞和白 🦈 细胞之间,将淋巴细胞和单核细胞等较轻的细胞分 🌺 离出来。
3. 富 🌴 集造血干细胞
使用细胞排序仪将造 🌼 血干细胞从 🐘 单核细胞中分离出 🐯 来。
细胞排序仪 🦆 基于抗体特异性结合细胞表 🦍 面的特定标记来进 🦟 行细胞分离。
4. 收集造 🦉 血干 🐬 细胞 🐶
将富集的造血干细胞 🦆 从细胞排序仪中收集到无菌容器中。
5. 冷冻 🌾 保存
在 80℃ 或液氮中冷冻保存造血干细胞,以用于未来的移植 🦋 。
其他 🐴 注 🐬 意 🐅 事项:
造 🦈 血干细胞动 🐕 员:在采集前可能需要使用 🕊 生长因子动员造血干细胞进入外周血。
移植:提取后的造血干细胞可用于自体移植移 🦄 植(给捐献者本人)或(异体移植移植给匹配的受体)。
质量控制:需要对提取的造血干细胞进行质量控制 💮 测试,以确保它们的 🐵 活力和纯度 🐝 。