造血干细胞分选方法（造血干细 🐬 胞分选方法是什么）
- 作者: 朱赫言
- 来源: 投稿
- 2025-04-26
1、造血干细胞分选方 🌷 法
造 🦄 血干细 🦍 胞分选方法
造血干细胞 (HSC) 是骨 🐟 髓中未分化的多能干 🦍 细胞，负责产生所有类型的血细胞分。HSC 选对于骨髓移植干细胞、治。疗和研究至关重要存在 🕊 多种方法可用于分选 HSC。
1. 密 🐶 度梯 🐠 度离 🕷 心
基于 🐶 HSC 的低密度，通过梯度 🌴 离心 ☘ 将它们从其他骨髓细胞中分离出来。
最常用的密度梯度介质是 🐺 菲科尔海藻糖。
2. 免疫磁珠分选 🕷
使用结合特定表面标记的磁 🐦 珠来捕捉 HSC。
例如，抗体可用 🌷 于 🐬 靶向 CD34 或 CD133 等 HSC 表面标记。
3. 流式细胞术分选 🐈
结合荧光标记抗体和流式细胞仪来分选 🐅 HSC。
荧 🌼 光标记抗体可用于靶 🕊 向 HSC 表面标记，例如 CD34、CD133 和 CD45。
4. 负选择 🐟 分 🐝 选
通过移除非 🪴 HSC 细胞来纯化 HSC。
使用抗体去除 🦄 造血细胞如粒细胞、单核细胞和淋巴细胞。
5. 染色质免 🐴 疫 🦊 沉 🦟 淀（ChIP）
基于 DNA 结合 🐵 特异性来 🐘 分离 🌷 HSC。
使用 🌻 与 HSC 相关基因的 🐞 抗体来免疫沉淀染色质，然后纯化附着的 HSC。
6. 单 🐛 细胞分选
使用机器人系统 💮 从单细胞悬液中分离 HSC。
基于细 🕊 胞大小、形状和表面标记进行分选。
7. 克 🌵 隆生 🦈 成法
让单个 HSC 在培养基中克隆生长 🌷 ，形成细胞集落。
HSC 可以通 🌸 过对集落 🐛 的分析 💮 进行鉴定和分选。
选择方法的考 🦉 虑 🦍 因素
选择一种 HSC 分 🐠 选方 🐠 法时，需要考虑以下因素：
所需的 HSC 纯度水 🐛 平
样本量可用 🐡 设备
成本特定的研究或 🌷 应用要求
2、造血 🦅 干细胞分选方法是 🌻 什么
造 🦊 血干细胞 🌵 分选方法
造血干细胞 (HSC) 是 🐛 一类位于骨髓 🌿 中的未分化多能细胞能，够产生所有类型的血细胞分。HSC 选用于从骨髓或其他来源中分离 HSC，以便进行移植、研。究或细胞治疗
主要 🕸 的 🐴 造血干 🌳 细胞分选方法有：
1. 密度梯 🐡 度离心 (DCC)
将骨髓细胞悬 🦉 浮在由不同的密度液体组成的梯度中 🐡 。
HSC 位于密 🐯 度介于梯度中其他细胞类型之间的中间层（单核细胞 🐞 层）。
2. 流式 🦄 细 🐳 胞术 (FACS)
利 🐕 用标记抗体 🐞 的特异性与细胞表面蛋白的结合 🐋 来识别和分离 HSC。
常见 🐅 的 HSC 表面标记包括 CD34、CD133 和 CD117。
3. 磁性 🐦 分离 🐵
使用磁性珠与 HSC 表面特 🌷 定的抗体结 🦈 合 🌿 。
磁性珠与HSC 结合后，可以通过磁场从其他细胞中 🐴 分离出来。
4. 免疫 🦍 亲和 🐕 层析 🐬 (IAC)
利用亲和层析 🐒 介质与特 🍀 定 🐕 抗体的结合来靶向 HSC。
HSC 与 🐵 介 🐶 质结合后，可以通 🐋 过洗脱步骤从其他细胞中分离出来。
5. 克隆生 🐎 成试验 🍁 (CFU)
一种功能性分选方法，通过将细胞培养在培养 🐛 基中并评估它们形成集 🦢 落的能力来识别 HSC。
形成集 🌸 落的细胞通常包含 HSC。
选择分选方法的 🌻 因素 🐳 包括：
所需 HSC 的纯度 🌷 和 🐛 数量
样 🐝 本类型 🕷 （骨髓、血液）
预算和可用设备 🐎
3、造血 🐋 干细胞分选方法 🐡 有哪些
造血干细胞分选方 🐝 法
基于细胞表面标志物的方法 🦆 ：
荧光激活细胞分选 (FACS)：使用荧光抗体标记细胞表面标 🦊 志物，然后使用细胞分选器分离出目标细胞群。
磁性激活细胞分选 (MACS)：使用磁珠标记细胞表面标志 🌲 物，然后通过 🐝 磁场 🌼 分离出目标细胞。
基 🍀 于 💐 功能的方法 🌺 ：
分层培养法：根据细胞对生长因子或细胞因子的 🌻 响应将其分层，造血 🐺 干细胞通常存 💮 在于特定的层中。
流动细胞术：根据细胞大小、密 🌷 度 🦢 或其他功能特征分离出目标细胞群 🌸 。
免疫缺陷小鼠模型：将造血干细胞移植到免疫缺陷小鼠中，然后分析重建 🐠 的造血系统中的细胞群 🦁 体。
其他方法 🌾 ：
基因转导法：使用携带特定基 🐴 因的病毒或转座子标记造血干 🐛 细胞，然后通过荧光或磁性标记进行分 🦅 选。
微流控方法：利用微流体设备对细胞进行分 🐧 选，基于细胞大小、形状或其他物理特性。
高通量测 🐳 序 (NGS)：分析造血干细胞的基因表达谱，鉴定用于分选的 🌼 独特分子标志物。
组 🍁 合 🐦 方 🦋 法：
双标记法：结合使用基于细胞表面标 💐 志物和功能的方法，提高分选精度。
多标记法：使用多种细胞表面标 🌻 志物或功能特征的组合进行分选，更有效地富集造血干细胞。
选择方法的考虑 🦋 因素：
目标造血干细胞亚群 ☘ 的特定性
分 🐒 选效率和 🐡 纯度
处理量和细胞 🕷 活性
可 🐠 用设备 🐵 和专业 🦊 知识
下游应用的兼 🍀 容性
4、造血干 🐞 细胞分选方法原理
造血 🌴 干细胞分选原 🕷 理 🐠
造血干细胞 (HSC) 是一种具有自我更新和分化为所有类型的血细胞能力的罕见细胞。从捐献者或患者的骨髓或外周血中分离纯净的 HSC 对 🦅 于造血干细胞 🌺 移植的 (HSCT) 成。功至关重要
基于表型（标记）的分 🐼 选方 🍁 法
免疫荧光分选 (FACS): 使用荧光标记的抗体靶向特定表面标志，然后使用流式细胞术器将标记的 HSC 与其他 🦊 细胞分 🌺 离。
磁性分选: 使用与特定表 🌲 面标志结合的 🐺 磁珠，然后使用磁性装置将结合的 HSC 从 🐶 其他细胞中分离出来。
基于功能的 🌹 分选方 🐺 法
侧向群 (SP) 分选: HSC 表现出低侧散射 (SSC)，这表明它们体 🐱 积小分选。SP 器 🌳 分离出具有 🍀 低 SSC 的，细胞其中富含 HSC。
腔稳态分选 🪴 : HSC 能够长期存活在称为腔的骨髓微环境中腔稳态分选。技术利用这一点，通，过将细胞培养 🐯 在 🌴 模拟腔中选择培养出 HSC。
功能性干细胞分选: 该方法基于分 HSC 化 🌳 成特定细胞类型的能力。例如，造血淋巴 🌹 祖细胞 (HPC) 可以被 CD34 和 CD45RA 抗，体。标记并且具有形成 🐕 髓系和淋巴系细胞的能力
其他方法单细 🐳 胞分析: 利用单细胞 RNA 测序 (scRNAseq) 和 🌾 质谱分析等技术，可以根据基因表达谱和蛋白质组特征对单个 🐴 HSC 进行特征分析。
基因编辑: CRISPRCas9 等基因编辑工 🌾 具可用于靶向并删除或插入基因，从而纯化具有特定基 🐎 因表达谱的 HSC。
分选策略通常，用于 HSC 分，选的方法会结合多种表型和功能标记以提高纯度和产 🐬 量。具 HSC 体方法的选。择取决于具体应用和所需的亚群
