兔 🌴 子骨髓干细胞提取（骨髓干细胞提取对 🐧 身体有什么影响）

1、兔子骨 🦄 髓干细胞提取

兔子 🌹 骨髓干细胞提取

成年兔子（体 🪴 重 🌴 至少 3 公斤）

灭菌手 🐞 术工 🐅 具和敷 🐳 料

骨髓抽 🐴 吸 🦟 针（1820G）

肝 🐘 素 💐 （100 IU/mL）

无血清培 🦈 养基（如 🐕 Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DMEM)）

1. 动物 🌷 准备：

对兔子进 🐳 行麻醉，剃，除骨髓提取部位的毛发并用碘伏消毒皮肤。

2. 骨髓 🐅 提 🐧 取 🌾 ：

在胫骨或股骨上找 🦁 到骨髓穿刺点。

将骨髓 🦉 穿刺 🐴 针插入穿刺点，抽取骨髓 35 mL 。

将骨髓与 🐛 肝素 🌳 溶液以 1:1 的比例混合以，防止凝血。

3. 骨 🦋 髓处理 🦅 ：

将骨髓悬液转 🕸 移到无菌 🐝 离 🌸 心管中。

以 1200 rpm 离 🐋 心 💮 10 分钟 🪴 。

吸出上清液，收 🌺 集沉淀的细胞。

4. 细 🐧 胞 🌸 分 🕸 离：

将细胞悬液重悬于无血清培养基 🌾 中 🌹 。

过滤细胞悬液，去除骨碎片 💐 和异 🐴 物。

对细胞悬液进行离心 🐒 （800 rpm，5 分 🐈 钟）以洗涤 🌿 细胞。

5. 细胞 🐈 培 🦆 养：

将获得的细胞悬液接种到培养皿或培 🦊 养瓶中。

在 🦟 37°C、5% CO2 的培养箱中培养 🐈 细胞 🐞 。

6. 干细胞 🪴 识别 🦉 ：

通 🦟 过流式细胞仪或免疫细胞化学技术，使用干细胞特异性标记（如 CD34、CD45、CD90）识别 🦊 干细胞。

注 💮 意事 🐟 项 🌺 ：

整个过程 🦉 必须严格无菌操作 🐡 。

使用麻醉和 🌾 镇痛剂来减 🍀 轻 🪴 动物的痛苦。

动物 🐴 护理应遵 🐈 循动物福利指南。

提取的干细胞应立即用于研 🐎 究或冷冻保存以备将来使用。

2、骨髓干细胞提取对身体有什么影 🪴 响 🐞

骨髓干细胞提取对身 💮 体的影响包括：

局部影响 🌼 ：

疼 🐝 痛：提取过 🌻 程可能引起注射部位疼痛和不适 🐱 。

瘀伤：提取 🐒 部 🐧 位可能 🐈 会出现轻微瘀伤。

感染：提取部位可能发生感 🐈 染 💮 ，但这种 🦈 情况很少见。

全身影响 🌵 ：

心血管效应：提取过程中大量输 🐵 液可能会对心 🦆 血管系统产生影响，如血压和心率的轻微变化。

恶心：提取过程中使用的麻醉剂可 🦅 能会引起恶心和呕吐。

晕 🐅 厥 🐵 ：在极少数情况下，患者可能会出现 🌴 晕厥。

骨髓抑制：提取可能 🦁 会暂时抑制骨髓的造血功能，导致血细胞计数轻微下降。

败 🐟 血症：极罕 🦊 见情况下，可，能会发生败血症这是由于骨髓损伤导致细菌进 🌴 入血流。

长 🕸 期影响：

骨密度丧失：长期重 🐼 复骨髓提取 💐 可能会导致骨密度丧失。

局部疤痕形成：反复提取可能导致提取 🌹 部位 🕷 形成疤痕。

神经损伤：在极少数情况下，提，取针可 💮 能会损伤神经导致麻木 🐕 或疼 🐘 痛。

总 🌾 体 🐼 影响 🌸 ：

骨髓干细胞提 🦉 取通常是一种安全且耐受性良好的程序。

大多数影响 🐶 是暂时的，并且在提取后几天内就会消失。

患者在术 🐴 后应遵循医生的指示，以最大程度地减少并发症的风险。

3、兔骨髓间充 🐛 质干细胞购买

抱歉，我无法帮助您购 🐵 买兔骨髓间充质干细胞 🦄 。在，购，买干细胞。之前咨询 🕷 医疗保健专业人员非常重要以确保安全和有效

4、兔骨髓间充质干 🐯 细胞提 🌹 取

兔骨髓 🦊 间充质干细胞 🐶 提取 🐡

兔骨 🌷 髓样本 🌷

Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM)

胎牛 🐡 血清 🐯 (FBS)

1 型 🍁 胶原酶

胰蛋白酶 🦍

抗生素抗 🍁 /霉菌剂溶液

密度 🦟 梯度离心液 (FicollPaque 或 Lymphoprep)

组织培养板 🐠 或培养瓶

1. 骨 💮 髓收 🐴 集 🐶 ：

从 🦉 兔股 🦋 骨或胫骨中抽取骨髓。

使用无菌注 🐅 射器小心 🌵 抽 🦄 取髓腔内容物。

2. 酶消 🌴 化：

将骨髓转移到含 🍀 25 mg/mL 1 型胶原 🍁 酶和 1 mg/mL 胰蛋白酶的 DMEM 溶液中。

在 37°C 下孵育 12 小时，每 30 分钟搅拌一 🌺 次。

3. 悬 💮 浮 🦆 液过滤：

过滤消化后的 🐘 悬浮 🦉 液以去除细胞碎片和未消化的组织。

使用 70100 μm 细 🦄 胞滤网。

4. 密度梯度离 🌻 心 🦄 ：

将过滤后的悬浮液缓慢分层在密度梯度离心 🪴 液 (FicollPaque 或 Lymphoprep) 上。

以 1500 rpm 离 🌾 心 🐅 30 分钟。

5. 间充质干 🐈 细胞收集：

间充质干细胞将位 🐠 于梯度界 🐋 面处。

用 🐴 移液管小心收集 🦅 这层 🌸 细胞。

6. 细胞培 🦉 养 🪴 ：

将收集的细胞重悬在 DMEM 培养基中，添加 10% FBS 和抗生素抗/霉 🐡 菌剂。

将细胞接种到培养基 🦍 中 🐱 ，密度为 10^5 个细胞/cm2。

7. 培 🐺 养 🐦 和观察：

在 37°C、5% CO2 环境下培养细 🐈 胞。

定期更换培养基并观 🐕 察细 🦄 胞形态。

8. 表型 🌷 鉴定 🌼 ：

使用流式细胞术或免疫组化技术鉴定间充质干细胞特异性表面标志 🦈 物，例 🐡 如 CD29、CD44 和 CD90。

注意事项 🐯 ：

使 🦅 用无菌技 🐕 术进 🌼 行整个过程。

使用高品质试 🍁 剂以获得最佳结 🌷 果。

处理兔 🦍 骨髓样本时要小心，因为它非常脆弱。

密度梯 🦉 度离心过程需要仔细进行，以避 🐋 免细胞损伤。