安徽大鼠原代干细胞价格（安徽大鼠原代干细胞价 🐳 格多少）

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4、大鼠脂肪干细 🐅 胞原代 🐘 培养

大鼠脂肪 🐶 干细胞 🦍 原代 🐱 培养

雄性或雌性 SpragueDawley 大 🌾 鼠 🐵 （68 周 🕊 龄）

1× PBS（含有抗 🦊 生素抗/真 🐳 菌 🐕 剂）

0.25% 胰 🕷 蛋白酶/EDTA 溶 🌿 液（含/有抗生素 🐈 抗真菌剂）

罗氏培养基（或其他富含脂肪干细胞生长因子的 🐵 培养基）

培养皿培养、瓶 🐳 和培养 🐶 板 🐒

吸管和移液枪 🌻

细 🐞 胞计数 🌴 器 🌷

培养箱 🦊 （37°C，5% CO2）

1. 动 🐴 物屠宰和组织 🐛 采集

将大鼠 🐞 处死并 🍁 剥皮 🌾 。

沿背部正中线切开皮肤，露出皮 🕷 下脂肪 🦆 层。

用无 🐛 菌镊子小心地移除一块脂肪组织。

2. 组 🌻 织 💐 消化 🦋

将脂肪组织切成小 🌷 块，放入含有 0.25% 胰蛋 🌵 白酶/EDTA 溶液的培养皿中 💐 。

在培养箱中孵育 30 分钟，每分钟 1015 涡，旋一次以 🐞 促进消化。

3. 终 🌷 止消化

孵育后，加，入等体积的罗氏培养基以终 🌾 止消化。

将细胞悬液转移 🦋 到 50 毫升离心 🐺 管中。

4. 离心和 🐱 清洗

在 🌸 300 × g 下离 🐦 心 5 分 🦁 钟。

小心地 🐳 吸出上 🦅 清液并 🌹 用 1× PBS 重悬细胞。

再度离心 🍁 并 🐦 清 🦄 洗两次。

5. 细胞 🌷 计数 🐴 和播种

使用细胞计数器计 🦋 算细胞数目。

根据 💮 所需的细胞密度，将细胞悬液稀释到适当的浓度。

将细胞悬液播种 ☘ 到预先包被的 🌷 培养皿培养、瓶或培养板中。

6. 培 🌷 养 🐼 和 🐯 监测

将细胞培养在 37°C、5% CO2 的培 🦍 养箱中。

定期监 🌼 测细胞生长 🐱 和状态。

视需 🐯 要更换培养基。

使用 🐧 年轻 🌴 健 🐬 康的大鼠可以获得最佳结果。

在无菌条件下进行所有 🕊 手术 🐱 和培养步骤。

避免过度消化，因 ☘ 为它可能损坏干细胞 🦉 。

使 🦊 用新鲜 🐶 制备的溶液 🐵 和培养基。

细胞生长需 🐝 要大 🐝 约 🌿 12 周的时间。