造血干细胞培 🌻 养基配方（造血干细胞培养需要多长时间）
- 作者: 张苏酥
- 来源: 投稿
- 2025-06-03
1、造血 🐒 干细胞培养基配方
基 🐝 础培养基 🐵 ：
αMEM（添 🦄 加剂 🌵 量 🌹 ：500 mL）
FBS（胎牛血 🐱 清）（添 🐡 加剂 🐎 量：50 mL）
L谷 🌴 氨 🐦 酰 🐅 胺（添加剂量：5 mL，200 mM）
青霉素 🐛 链 🐅 霉素（添加剂量 🐛 ：5 mL，100x）
生长 🐯 因 🕊 子 🌳 ：
白细胞介素3（IL3）（添加 🐱 剂量：10 ng/mL）
白细胞介 🌴 素6（IL6）（添加剂量：10 ng/mL）
粒细胞巨噬细胞集落刺激因子（GMCSF）（添 💮 加剂 🌺 量：10 ng/mL）
血小板衍生生长因子（PDGF）（添加剂 🐳 量：10 ng/mL）
干扰素γ（IFNγ）（添加剂量 🌸 ：10 ng/mL）
其他 🌿 添加剂：
β巯基乙醇（添 🕊 加剂 🐼 量 🐒 ：2 μL，50 mM）
转铁 🌵 蛋白（添加剂量 🌹 ：100 μg/mL）
牛 🍀 血清白蛋白（添 🐴 加剂量：100 μg/mL）
肝素（添加剂 🐵 量：10 μg/mL）
胰 🦄 岛素 🪴 （添加剂量：5 μg/mL）
制备 🐦 步 🦊 骤 🌻 ：
1. 将 αMEM、FBS、L谷氨酰胺和青霉 🐈 素链霉素加入无菌培养皿。
2. 按照添 🐎 加剂量加 🌿 入生长因子和其它添加剂。
3. 将培养基混合 🦄 均 🐱 匀，并过滤除菌。
4. 培养 🐘 基 🦊 可在 4°C 下 🪴 储存 24 周。
使 🐺 用说明 🐬 ：
在使用前将 🐦 培 🌴 养基 🌴 预热至 37°C。
在无菌操作条件下，每 23 天更换一次培 🐼 养 🌸 基。
监测培 🐟 养物，确保无污染或异常细胞生长。
2、造 🐒 血干细胞培养需要多长时 🦍 间
造血干细胞培养 🕸 需要的时间长短取决于培养方法和培 🕊 养的目的。
传 🦁 统培养方 🦁 法：
长线培养：34 周培养。在基 🦅 质细胞层上，允。许干细胞自我更新和分化
半长线培养：12 周培养。在基质细胞层 🐎 上，但培养，时。间较短干细胞 🌼 分化能力更强
无 🐱 基质培养方 🦟 法：
立体培养：12 周培养。在 🌵 三维立体支架上，模。仿骨髓微环 🪴 境
悬浮培养：12 周培养。在无基质的 🐺 液体培养基中，促。进干细胞扩增 🦆 和分化
具 🦊 体 🦄 培养时间 🐒 ：
扩 🦈 增 🦟 干细胞：13 周
诱 🌷 导分化 🐼 为特定 🕊 细胞系：12 周
成熟 🦅 和功 🌺 能验证：12 周
影 🐝 响培养时 🐦 间因素：
干细胞来源 🐠
培养 🐡 基类 🐛 型
培养条件（温度、氧气 🐬 濃度 🐳 ）
培 🌷 养 🐶 方法 🌾
所需细胞类型的成熟度 🦊
因此，造血干细胞培养需要的时间范围可以从 🐦 34 周到周 68 不，等具体取决于培养目标 🌷 和方法。
3、造血干细胞 🕷 培养基配方大全 🦄
配方 1：αMEM 培养基 🌷
αMEM 培 🐦 养 🐛 基
20% FBS
1% L谷氨 🐎 酰胺
1% 青 🌴 霉 🐎 素 🐛 链霉素
配方 2：DMEM/F12 培 🕸 养基 🐦
DMEM/F12 培 🐼 养 🌹 基 🐴
12% FBS
1% L谷氨 🌷 酰 🍁 胺 ☘
1% 青霉 🐛 素链 🐕 霉素
配方 🕊 3：StemSpan SFEM II 培养 🌹 基 🐳
StemSpan SFEM II 培 🌻 养 🐘 基
2% StemSpan CC100
1% 青霉素 🌵 链霉素
配方 🐡 4：Iscove's Modified Dulbecco's Medium (IMDM)
IMDM 培 🌵 养基
10% FBS
50 ng/mL SCF
20 ng/mL IL3
10 ng/mL IL6
1% 青 🐯 霉素链霉 🦉 素
配 🐠 方 5：XVIVO 15 培 🌸 养 🌳 基
XVIVO 15 培 🌵 养 🐎 基
5% 马 🦈 血 🐶 清 🦢
1% L谷 🌻 氨 🐯 酰 🕊 胺
1% 青 🌴 霉素链霉 🌾 素 🐬
配方 🕷 6：RPMI 1640 培养 🦋 基
RPMI 1640 培 🐅 养 🌳 基
20% FBS
1% L谷氨酰 🐱 胺
1% 青霉 ☘ 素 🌹 链霉素
配方 7：SFM468 培养基（血小板生 🌴 成）
SFM468 培 🐴 养 🐶 基 🕊
10% TPO
10% FBS
1% 青霉素链霉 🌷 素
注意：培养基配方可能会根据不同的细胞类型和实验条件而 🌿 有所不同。
确保使用无菌 🌳 技术来配制培养基。
在使用前 🌲 将培养基 🐳 过滤除菌。
培 🌺 养基应在 4°C 下保存 🐶 ，并可在使用前 🐱 在下 37°C 回温。
4、造血干 🐈 细胞培养基配方比例
基础培养基 🐒 (1000 mL)
Iscove's Modified Dulbecco's Medium (IMDM) 800 mL
补充剂10% 牛血清 🐯 白 🌸 蛋白 (BSA) 100 mL
1% Hepes 10 mL
1% 抗菌素抗 🐒 真 🐬 菌剂 10 mL
细胞因子 🦄 补 🍁 充剂 (100 mL)
人重组 🪴 白细胞介素 🍁 3 (rhIL3) 10 ng/mL
人重组颗粒细胞 🌿 巨噬细胞集落 🕊 刺 🐧 激因子 (rhGMCSF) 10 ng/mL
人重组 🦆 钢丝蛋白 🌿 因子 🪴 1 (rhSCF) 100 ng/mL
配方 🐼 比 🕊 例:
将 900 mL 基础培养基与 100 mL 细胞因子补充剂混合制 🦍 备培 🦈 养基 1000 mL 。
注意：培养 🐳 基 🐈 应储存在 4°C，并在使用前温热至 37°C。
细 🍀 胞因子补充 🐯 剂应单 🕷 独储存在 80°C。
使 🪴 用前，培养基应过 🐺 滤灭 🌿 菌。
建 🐕 议每 23 天更换培 🐒 养 🐺 基。
