脂肪干细胞换液方法（脂肪干细胞可 🌼 以 🦟 治疗什么疾病）
- 作者: 张洛萱
- 来源: 投稿
- 2025-04-29
1、脂肪干细胞 🐦 换液方法 🪴
脂肪干细 💮 胞换液方法
材料：无 🐶 菌培养瓶或培养 🐅 皿 🦈
无 🌸 菌 🐼 吸 🐡 管
含血清 🌴 的培 🐳 养基
培 🐯 养 🐋 基（不 🐯 含血清）
培养瓶或培养皿盖 🍀
步骤：1. 准备 🌵 工 🐦 作：
将 🌼 无菌培养瓶或培养皿用含血清的培养基预先温热。
在工作台表 ☘ 面上 🌾 铺上无菌纸。
2. 取 🐝 出脂肪 🪴 干 🐶 细胞：
将培养瓶 🦈 或培养皿从 🐎 孵箱中取出。
用吸 🐶 管小心吸取培养基，留 🌻 下细胞。
3. 冲洗 🦁 细胞：
用无菌吸管 🐴 向细胞中缓慢加入培养基（不含血清），冲洗细胞。
小心地用 🌻 吸管混合细胞，以免损坏细 🌷 胞。
4. 去除 🐼 培 🦁 养 🦟 基：
用吸管小 🌷 心吸取大部 🐵 分培养基，但不要完全去除。
5. 添加新鲜 🌷 培养基：
将预热的含血清的培养基缓 🌿 慢添加到细胞中。
培 🐒 养基体积应达到培养容器的 8090%。
6. 盖 ☘ 上容器：
盖上培养瓶或培养皿盖，确 🐺 保紧密密封。
7. 返 🌲 回孵 🍀 箱 🦍 ：
将培养 🦊 容器返回 🐵 37°C、5% CO? 的孵箱中。
注意 🍁 事项 🐱 ：
所有步骤均应在无 🐝 菌条件下进行。
在 🐼 操作过程中，避 🌷 免过度吸入或吹出培养基。
定期换液以 🐟 保持细胞健康和增殖。
换液频率根据细 🕊 胞类型和培养条件而有所不 🐼 同。
如果细胞出 🦍 现变色或形态异 🐼 常，应立即更换培养基并咨询专家。
2、脂 🐟 肪干细胞可以治疗 🐬 什么疾病
脂肪干细胞是一 🦁 种间充质干细胞，具有多向分化潜能。它们可以治疗以 🐝 下疾病 💮 ：
骨科 🌸 疾病 🌸 ：
骨关 🍁 节炎 🦅
骨缺损骨髓炎
成骨不全症 ☘
心血管疾 🐧 病 🦟 ：
心脏 🦉 病 🦅 发作 🦋
心力 🐡 衰 🐺 竭
外周动 🦟 脉疾病
神经 🐞 系 🌺 统疾病：
脑卒中脊 🦊 髓 🦋 损伤 🦁
多发性硬 🌴 化症
帕金森病 🐈
皮 🐘 肤疾 🐺 病 🐎 ：
烧伤溃疡
皮肤癌
免 🐯 疫系统疾病 🌾 ：
自体免 🐴 疫性疾病（如类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮 🐵 ）
移植排斥反 🍁 应
其 🌺 他 🦊 疾病：
糖尿病肝病
慢 🍀 性阻 🐠 塞 💐 性肺疾病
肾病眼部 🐬 疾 🪴 病 🐵
需要注 🐺 意的是，脂，肪干细胞疗法仍然处于研究阶段对于某 🌳 些疾病的疗效尚未完全确定需要。更。多的临床试验来评估其 🦟 安全性和有效性
3、脂肪干 🐴 细 🐱 胞换液方法有哪些
脂 🐦 肪干 🐧 细胞换 ☘ 液方法
1. 离 🐶 心 🐧 法
将脂肪组织样本离心将，干 🐒 细胞分 🐠 离 🐛 到培养基中。
轻轻吸出上清液 🦟 ，留 🐬 下干细胞沉淀。
向沉淀 🌳 中加入新鲜 🌹 培养基，轻轻旋转使 🌴 其混合。
2. 密度梯 🌳 度离心 🦁 法
将脂肪组织样本与不 🌲 同密度的离心液 🐠 层叠。
离心后 🌼 ，干细胞将沉淀在特定密度的界面处。
小 🌸 心收集 🐯 干细胞。
3. Ficoll 密 💮 度梯 🌾 度离心 🐼 法
将脂肪组织样本与 Ficoll 密 🐯 度梯度液层叠。
离心后 🦍 ，干细胞将沉淀在低密 🌾 度层和高密度层之间 🦅 的界面处。
收集并洗涤干 🐝 细胞。
4. 磁性 🐱 细 🦄 胞 🌴 分选
使用磁性珠 💐 标 🦍 记干细 🐦 胞表面特异性抗原。
将标记的 🦟 细胞与磁场接触 🦆 ，吸 🐘 附在磁铁上。
移走 🌴 磁铁，收，集未吸附的细胞即干细 🐘 胞。
5. 流 🐛 动细胞 🐯 分 🐅 选
使用荧光标记抗体标记干细胞表面特异性抗 🦟 原。
将标记的细胞 🍀 通过流式细胞仪，根据 🐕 荧光强度将干细胞分选出来。
6. 组 🐞 织培 🕷 养法
将脂肪组织样本 🌸 剪碎 🐶 并消化成单细胞悬浮液。
将 🐬 细胞悬浮液接种到组 🪴 织培养皿中 🌵 。
干细胞将贴附 🐞 在培养 🐛 皿上，而其他细胞则悬 🍀 浮。
定期换液以清除死亡细胞 🐋 和代谢废 🐋 物。
换液频率根 🌷 据培养步骤而异 🌲 。
一般而言，每 23 天，换一次液以提供营 🐵 养并去除废物。
4、脂肪干细胞怎么提取和 🦍 回收 🦆
脂肪干 🐳 细胞 🐎 提取和回收过程
1. 脂肪组 🕸 织采 🐦 集
从腹部 🕊 、大腿或臀 🌹 部等脂肪组织丰富的部位采集脂肪样本。
使用肿胀液（含有利多卡因和肾上腺素的盐 🐈 水溶液）进行肿胀，以松散脂肪细胞。
2. 吸 🦋 脂 🪴
使用吸脂管将肿胀的脂肪 🦋 组织 🕷 吸出 🦍 。
机械抽吸将脂肪细胞与血管 🐠 和结缔组织分离开来。
3. 离心分 🦋 离 🐦
对吸出的脂肪进 🕊 行离心，以分离出脂肪细胞脂肪、干 🐺 细胞和血清。
脂肪干 🐅 细胞位于脂肪细胞的基底层。
4. 酶 🌷 解 💐
使用胶原酶等酶溶解脂肪细胞膜，释放出 🐶 脂肪干细胞。
酶解过程必须仔细控制，以 🌹 避 🐵 免损伤 🐺 干细胞。
5. 过滤和洗 🌾 涤
将酶 🐟 解后的脂 🌿 肪组织通过过滤器去除未消化 🕸 的组织碎片。
用缓冲液反 🐘 复洗涤脂肪干细胞，以去除酶和其他杂质。
6. 培养 🐅
将提取出 🐳 的脂肪干细 🐝 胞接种到培养基中，并放置在的 🦅 培养37°C、5% CO2箱中孵育。
干 🌳 细胞将增殖并分化为各种细 🦈 胞类型。
7. 冷冻保 🌻 存（可选）
脂肪干细胞可以冷 🦟 冻保存以，便将来使用。
使用二甲基亚砜（DMSO）作为 🦉 冷冻保护剂，并将细胞储存在196°C的 ☘ 液氮中。
回收 🐠 脂肪干细胞 🐺
1. 酶 🪴 解
将冷冻的脂肪干细胞解冻并 🐳 用酶解酶处理，以从冷冻保存介质中释 🐧 放干细胞。
2. 洗涤 🦆 和过滤
用缓冲液洗涤脂肪干细 🦍 胞，并通过过滤器去除杂质。
3. 离心分 💐 离 🐞
对洗涤后的细胞进行离 🐧 心 🐵 ，以沉淀脂肪干细胞 🦉 。
4. 再 🌲 悬 🦄 浮和培养
将沉淀的脂肪干细胞再悬 🦋 浮在新鲜培养基中，并 🐬 ，重新接 🌼 种以便继续增殖和分化。
