胚胎干细胞同源重组(胚胎干细胞有同 🦟 源染色体吗)
- 作者: 张璟昂
- 来源: 投稿
- 2025-09-04
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1、胚 🦢 胎干细 🌻 胞同源重组
胚胎干细胞同源 ☘ 重组
定义:胚胎干细胞同源 🦍 重组细胞(ES是HR)一种 🕷 基因靶向技术,它利用胚胎干细胞来精确地改变小 🐎 鼠基因组。
原理:1. 设计靶向载 🦢 体:创:建一个含有以下元素的靶 💐 向载体
同源序列(与靶基因匹配 🐝 的 DNA 片 🦆 段)
选择 🌵 性标记(例如抗生 🦋 素抗性基因 🐧 )
同源重组 🕷 盒 🐛 ,促进重组
2. 转染 ES 细胞:将靶向载体转染到培 🦄 养的胚胎干细胞 (ES) 中。
3. 选择性标记筛选 🪴 :使用选择性标记筛选出整合了 🐴 靶向载体的 ES 细胞。
4. 同源重组:靶向载体的同源序列与靶基因 🐳 配对,通过同源重组 💐 机制整合到基因组中。
5. 筛选嵌合小鼠:将整合了靶向载体的 ES 细胞注射到早期的胚胎中,产生嵌合小鼠。这 ES 些小鼠。具有来自细胞和 🦅 胚胎来源的细胞
6. 生殖系传递:与受精卵交配嵌合小鼠,以产 💐 生只 🐟 携带靶向基因组编辑 💮 后代的小鼠。
应用:基因功 🐕 能 🐵 研究和疾 🐱 病建模
疾病治 🪴 疗的发展
农业 🐬 改良 🦅
优势:高效且精确的 🦈 基因靶向
允许创建基因敲除小鼠、条件性敲除小鼠 🦄 和敲入小鼠
提供在 🌷 活体动物中研究基因 ☘ 功能的模型 🦉
局限性:只能用于小鼠基因 🦊 组
嵌合体形成和生 🐺 殖系传递过程耗时
伦理问题,因为它涉及胚胎的 💮 使用
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