大鼠脂肪干细胞价格 🦊 (大鼠脂 🌹 肪间充质干细胞提取)
- 作者: 郭沁芒
- 来源: 投稿
- 2025-06-12
1、大鼠 🌷 脂肪干 🌾 细胞价格
抱歉,我不知道大鼠脂肪干细胞的价格。也。许 🌵 你可以尝试在网上搜 🌵 索或 🐴 联系兽医了解更多信息
2、大鼠脂肪间 🦄 充质干细胞提取
大鼠 🐅 脂肪间充质干细胞提取
材料雄性 🦆 或雌性 🐵 大 🦈 鼠 (812 周龄)
70% 乙 🐧 醇 🦟
无 🐛 菌手术 🐋 工具 (镊子、剪、刀无菌 🌻 纱布)
培 🐕 养基 (含抗生素和抗真菌 🐡 剂 🦉 )
离心机无菌培 🐱 养 🌺 皿和培养瓶
胶原 🐒 酶 A
脂 🕊 肪组 🌴 织 🕷
步骤1. 准备 🍀 大鼠
麻醉大 🦊 鼠 🐶 。
剃除腹部 🌺 脂肪组织 🐶 区域。
用 🌾 70% 乙 🐼 醇消毒皮肤 🐦 。
2. 提 🐋 取脂肪组织
在无菌条件下 🦆 ,通过小切口切开皮肤。
用无菌镊子小 🦟 心地 🦢 分离脂肪组织 🦢 。
将脂肪组织转移到无菌培养皿中 🦆 。
3. 胶原酶 🐕 消 🐎 化
向脂肪组织中加入含 🦍 有 🌼 胶原酶 A 的 🐎 培养基。
将 🐋 培养皿置于 37°C 的摇床孵箱中,以的 100 rpm 速度孵育 4560 分钟 🐯 。
4. 离 🐒 心 🦅
孵育 🐟 后,将 🐟 悬液通过 400 x g 离心 🌷 10 分钟。
收集上清液,小心不要扰 🐠 动 🦋 细胞沉淀。
5. 培 🌸 养 🐘
将上清液转移 🐵 到新的培养皿中。
每 🦍 隔 34 天更换培养基。
在 37°C 和 🕷 5% CO2 的条件下培养 🐕 细胞 💮 。
6. 间 🦅 充质干细胞的鉴 🦄 定
使用流式细胞术或免疫细胞 🐧 化学检测 🐬 间充质干细胞标志物,如 CD29、CD44 和 CD90。
提示使 🐡 用新鲜的脂肪 🍁 组织可提 🐼 高细胞活力。
仔细 🌻 处 🌵 理脂肪组织 🦁 ,避免损坏细胞。
定期 🍁 更换培养基以保持细 ☘ 胞健康。
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3、大鼠脂肪干细胞原代 🦍 培养
大鼠脂肪干细胞原代培 🐋 养
材料大 ☘ 鼠脂肪组 🦅 织 🐒
Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM)
Ham's F12 营养液 🍀
胎牛 🌹 血 🐅 清 (FBS)
小 🐼 牛 🦉 血 🐡 清 (CS)
胰 🌵 蛋 🌴 白酶 🐠
胶原 💐 酶 🌳 IV
细胞培养 🐠 瓶
细胞 🕷 培养 🕊 板
步骤1. 提取大鼠脂肪组织:从麻醉的大鼠中切取腹腔脂肪组织。用。无菌生理盐水冲洗组织以去 🐱 除血液
2. 剪切脂肪组织:将脂肪 🌿 组织剪成小块 🌾 (约 1 mm3)。
3. 酶促消 🐶 化:
将脂肪组织块置于 🍀 含 2 mg/mL 胶原酶 IV 和 0.1 mg/mL 胰蛋 🌿 白酶的 DMEM/Ham's F12 混合液中。
在 37°C 下孵育 1 小时,摇动培 🦟 养瓶 🦈 。
4. 过滤 🐟 和 🐅 离 🦆 心:
将消化后 🐳 的组织通过 100 μm 滤网过 🪴 滤。
以 🐧 1200 rpm 离 🌴 心 10 分 💐 钟。
5. 采集脂肪干 🦅 细 🐳 胞:
吸出上清液 🌻 ,弃去。
用含 10% FBS 的 DMEM/Ham's F12 混 🦟 合液 🐼 重悬细胞沉淀。
将细胞悬液接种 🐴 到细胞培养瓶中。
6. 培养 🐴 :
在 37°C、5% CO? 培养箱中 ☘ 培养细胞 🐺 。
每 23 天 🐠 更换培养 🍁 基。
细胞鉴定标记 CD34、CD45 和 CD90 表面标志物以证实脂 🌼 肪干细胞的身份。
诱导脂肪干细胞向脂肪细胞 🐎 、软骨细胞和成骨 🌷 细胞分化,以确认多向分化能力。
保存在完成原代培养后,可用 DMSO 冷冻保存脂肪 🐟 干细胞。
将细胞悬液与含 10% DMSO 的 FBS 混合,以 1 × 10? 个 🐺 细胞的/mL 密 🐺 度 🐱 装入冻存管。
以 🐈 1°C/min 的速度冷冻冻存管,然后将其转移 🐴 到液氮中长期保存。
4、脂 🌳 肪干细胞研究应用现状
脂肪干细胞 🌷 研究应用现状
脂肪干细胞 (ASCs) 是一种多能干细胞,存在 🐡 于脂肪组织中。由,于其独特 🦍 的特性例如自我更新能力和向不同细胞类型分化的能力,ASCs 已。成为再生医学和组织工程中极具前景的研究领域
当前应用脂肪 🐛 移植 🐈 :ASCs 用于增强脂肪移植术的结果,提高移植脂肪的存活率 🍀 和体积。
修复软组织损伤:ASCs 用于修复软组织损伤,例如皮肤伤口、肌肉损伤和骨关节炎。它 🦁 ,们、能。够分化成多种类型的细胞包括成纤维细胞脂肪细胞和骨细胞
心血管疾病:ASCs 已显示出治疗心肌梗死和心力衰竭的潜力。它们可以在 🐛 受 🍁 损心脏组织中存活,并。释放促血管生成和抗炎的因子 💐
神经退行性疾病:ASCs 用于治疗神经退行性疾病,例如帕金森病和阿尔茨 🌺 海默病。它,们。能够分化成神经元和胶质细胞帮助修 🍁 复受损的神经组织
免 🍁 疫调节:ASCs 具有 🐴 免疫调节特性。它们已用于治疗自身免疫疾病,例。如狼疮和多发性硬化症
目 🦆 前的 🐧 研究
目前的研究重 🦍 点在于:
改善 ASCs 的分 🦅 化和增殖:研 ASCs 究人员正在 🦍 探索促进 🕊 分化成特定细胞类型的策略,以及提高其增殖速度的方法。
优化 ASCs 的递送:开 ASCs 发更有效的方法将递送至目标组织是研究的另一个关键领域 🐠 。
安全性评估:正在进行研究以评估 🦟 ASCs 的长期安全性以,及移植后它们的潜在风险。
挑战尽管脂肪干细胞 🌹 研究取得了进展 🐘 ,但仍有一些挑 🦢 战需要解决:
异质性:脂 🐕 肪组 🦆 织 🪴 中 ASCs 的异质性可能影响其治疗功效。
免疫 🐟 反 🦍 应:移植的 ASCs 可能引发免疫反应,限制其治疗潜力。
转化 🌴 医学:将脂 🦉 肪干细胞研 🐬 究发现转化为临床应用需要进一步的研究和开发。
未来前景脂肪干细 🐠 胞研究有望为多种疾病提供新的治疗选择。随着持续的研究和创新,预计 ASCs 将。在再生医学和组织工程领域 🐛 发挥越来越重要的作用