干 🕊 细胞培养工艺参数（干细胞培养实验室最新设计 🦉 图）

1、干细胞培 🪴 养工艺参数 🌾

干细 🍀 胞培养工艺参数

培养基成 🐟 分：

基础培 🐧 养基：DMEM、RPMI1640 或其他特定干细 🍀 胞类型的基础培养基

血清：通常为 1020% 胎牛血清 (FBS) 或人 🦈 血清 (HS)

生长因子：用于刺激 🐎 干细胞增殖和分化，例如和 FGF、EGF、SCF IL6

抗生素：防止细菌和真菌污染，例如青霉素、链 🌷 霉素和真菌素

培 🕊 养条件：

温度 🕊 ：通 🍀 常为 37°C

CO2 浓 🐴 度：510% CO2

潮湿度 ☘ ：95% 或更高

培 💐 养皿：用于贴壁 🌴 培养

培养瓶：用于 🌲 悬浮培养

培养 🌹 袋：用于大规模培养

传代间隔：当细胞达到 7080% 融合度时 🐠 传代

传代比例：通 🐝 常为 🐋 1:2 至 1:4

传代方法：酶 🐧 解消 🌳 化 (TrypsinEDTA) 或 (机)械传 🌻 代刮除

监 🌻 测 🌹 参数 🌷 ：

细胞 🐘 活力：使用 MTT 或 XTT 测 🌳 定进行评估

增殖率：通过计数 🐞 活细胞或测定 DNA 合成进行 🐱 评 🦈 估

分化状态：通过 🦍 免疫组化或流式细胞术检测特定分化标记进行评估

污染：通过显微镜观察或微生物培养 🦟 检测细菌或真菌污染

其他 🐵 参数 🌿 ：

添加物：可能添加其他化合物以支持特定细胞类型或分化途径，例如 Rock 抑 🦉 制剂或 BMP4

培养 🕸 基更换：通 🌹 常每 23 天更换培养基以提供新鲜营养和去 🦉 除代谢废物

冻存和复苏：将干细胞冻存在液氮中以长期储存，必要时可将 🐼 其复苏进行培养

2、干细胞培养实验 🐒 室最新设计 🌻 图

干细胞培养实验室最新设 🐟 计图

模块 🐦 化 🦅 设计，便于适应不断变化的需求 🌾

专用入口和出口，以保持无菌 🐳 环境

负 🐛 压环境，确 🐵 保无菌 🕊

指 🌺 定的设备和 💐 耗材存储区域

ISO 5 级净化区：用于细胞培养 🌳 、分化和冷冻。

层 🐯 流 🐈 罩 🌺

生 🪴 物安全 🌷 柜 🌲

孵化 🐅 器

超净工 🦆 作台 🐴

ISO 7 级净化区：用于准备试 🦟 剂、培养基和设备。

层 🐱 流 🦍 罩 🦄

超净工 🌸 作 🦄 台

培 🐴 养基制备 🦢 设施 🌺

缓冲区 🐋 ：连接洁净区和非洁净区。

换衣 🐠 区

淋 💮 浴 🌴 区 🐧

设备维护区：用于设备维护和维修 🐼 。

仓 🦍 库：用于存储设备、耗 🕊 材和试剂。

设 🦉 施和设 🐱 备

层流罩：用于无菌细胞 🦍 操 🍁 作 🌷 。

生 🐺 物安全 🐅 柜 🌼 ：用于处理传染性材料。

孵 🐅 化器 🐳 ：用于 🐬 培养细胞。

超净工作台：用于无 🐘 菌操作。

培养基制备设施：用于 🌲 制备和分发培养基。

冷 🕊 冻机：用于细胞和 🐼 组织 🌿 冷冻。

显微镜 🐎 ：用于细胞观察和分析。

温度和湿度 🐳 受控，以保持适宜细胞生长的条件。

HEPA 过 🦄 滤器，以去除空 🌾 气中的颗粒物。

紫外线灯，以灭杀细菌和病 🐕 毒。

生物安全协议，以防止 🐡 污染 🌷 和传染。

定期消 🦈 毒和 💮 清洁程序。

个人防护 🌸 装备，以保 🐞 护工作人员 🦄 。

使用节能设 🍁 备 🌷 。

回收 🐱 计 🐛 划 🍀 。

可 🌻 持 🌷 续材 🐴 料。

模块化设计允许轻松扩展，以满足未 🐧 来 🐒 的需 🐵 求。

预留空间，以便添加更多设备和设 🐦 施。

可适应新技 🌻 术和流程。

3、干细胞培养 🐼 工艺参数是什么

干 🐯 细胞培养工艺参数 🌹

环境 🐳 参数：

温 🐧 度 🕷 ： 37°C

二氧 🌸 化 🌿 碳浓度： 5%

湿 🐞 度 🌷 ： 95%

培 🦈 养基成分：

基础培 🌺 养基： 无血清培养基 🌾 ，如 DMEM/F12 或 🐼 αMEM

生长因 🐒 子和细胞因子： 根据培养的干细胞类型而定，例如基础成纤维母细胞生长因子 (bFGF)、表皮生长因子 (EGF)、转化生长因子 (TGF)β 等

抗生素： 防止细菌和真菌 🌿 污染

血清： 某些 🦅 类型 🐘 干细胞的培养需 🕷 要补充血清，如胎牛血清 (FBS)

其他添加剂： β巯基乙醇、非、必需氨基酸谷氨酰 🌲 胺等

培 🐡 养 🦄 容器 🌷 ：

培养 🦢 瓶： 用于附着生长的干细胞

培养皿： 用于贴 💮 壁培养的 🐶 干细 💮 胞

悬浮 🐞 培养 🌲 生物反应器： 用于悬浮生长的干细胞

培 🐱 养频 🦋 率 🕸 ：

传代频 🐳 率： 当细胞达到一定密度时，将其传代到新的培养容器中

传 🦊 代比例传代：时细胞的分裂比例例，如 1:2、1:3

培 🐱 养 🐒 时 🕷 间：

培养周期： 一次传 🐈 代到下一次传代之间的 🐴 时间

总培养时间： 从干细胞 🐋 分离到使用时的总时 🍀 间

其它 🌷 参 🐠 数 🍁 ：

气体交换： 定期更换培养箱中的培养基和气 🌿 体环境

细 🍁 胞计数和活力测定： 监测细胞生长和健康状况

免疫 🐒 表 🐼 型： 确认干细胞的表面标记物以确保其纯度和分化能力

分化诱 🐼 导诱导 🍁 ： 干 💮 细胞向特定细胞类型分化

冷冻 🦁 保 🍁 存保存： 干细胞用于长期储存

4、干细胞培 🌼 养工艺参数有哪些

干细胞培养 🐵 工艺参数

1. 培 🌼 养 🐟 基 🐴

组分：基 🦟 础培养基、补、充剂生长因子等

pH 值 🦄

2. 培养 💐 环境

温度 🦄 ：通常为 37°C

二氧 🌾 化 🌴 碳浓度：通常为 🐟 5%

湿度：通常 🐋 为 🦍 95% 以 🦋 上

3. 培养 🕸 基 🐦 更换频率

每天每、隔一天或 🐠 定期更换

4. 分裂 🕸 比 🐺 例

取 🦍 决于细胞类型 🐼 和生长速率

通 🐯 常 🦢 为 1:2 或 🌺 1:4

5. 培养皿培 🌾 养/瓶 🐋 表面

表面 🌹 处理 🦟 ：无处理、包被 🌵 聚赖氨酸或其他基质

大 🐳 小：培养皿培养、瓶 🐡 或生物反 🦁 应器

6. 培养 🌹 时 💮 间

取决于细胞类 🌼 型和 🐺 培养目 🌾 的

通 🐧 常 🦉 为 714 天

7. 细 🐯 胞密度

接种密度：通常为每平方厘米 🕊 10,000100,000 个细 🦆 胞

分 🐅 裂后 🌹 期密度：通常 🦄 不超过 80%

8. 营 🐋 养补充剂 🌻

蛋 🦉 白质白蛋白：血、清、生长 🐅 因 🐟 子

碳水 🌻 化合物：葡萄糖、果糖

脂肪脂 🌾 肪：酸、胆固醇

9. 生 🌲 长因 🐶 子 🦟

表 🐡 皮生长因子 (EGF)

成纤维细胞生 🐧 长 🌼 因子 🍀 (FGF)

血小板 🐅 衍 🐳 生生长因子 (PDGF)

10. 抗生素 🦄 抗/真菌剂

防治污 🐠 染 🦋

浓度和频率根据具 🐴 体培养基和细胞类型而定

11. 细胞传代 🌲

将细胞从一个培 🐛 养容器转移到另一个 🐝 培 🐠 养容器

传代 🌷 间隔取决 🌾 于 🐒 细胞类型和生长速率

12. 细胞 🌹 冷 🌷 冻 🌾

低温 🐶 保 🦆 存细胞以供将来使用

冷冻 🍀 方法：液氮 🌵 或其他低温存储设备 🐱

13. 细胞 🐶 分化

指导 🐛 细胞向特定谱系 🐦 分化 🐎

使用 🦍 生长因 🐳 子、激素或转录因子

14. 细 🐬 胞鉴定

免疫荧光 🐧 染色

流式 🐬 细 🐅 胞术

基因表达 🐺 分析 🌻