培养干细胞需要试剂耗材(干细胞培养 🌺 用什么培 💐 养基)
- 作者: 张皓野
- 来源: 投稿
- 2025-06-03
1、培养干 🦄 细胞需要试剂耗材
培 🦈 养干 🍀 细胞所需的试剂耗材包括:
培养基和添加剂 🕸 :
无血 🕸 清 🐱 培养 🐈 基 (如 DMEM/F12、mTeSR?1)
蛋 🐅 白质补充剂 ☘ (如 BSA、人白蛋 💮 白)
生 🕊 长因 🐛 子 (如 🍀 bFGF、EGF)
抗生素抗/真菌剂 (如/青霉素链霉素、两性 🦍 霉素B)
生长表面 💮 :
细 🦟 胞培养板或培养 🐅 瓶
涂有基底膜 🌷 蛋 🐒 白的 🐋 培养皿 (如 Matrigel?、Laminin)
胰蛋白 🦟 酶消化:
胰蛋 🐧 白 🐱 酶 🕊 溶液
EDTA 溶 🦅 液 🐞
细 🦟 胞计数 🦆 和分析 🐛 :
血 💮 细胞计 🐯 数器或自动化细 🐶 胞计数器
流式细胞仪或显微 🐡 镜
细胞活力 🦈 测定 🌳 试剂盒
分选 🦍 和纯化:
磁性激活细 🐎 胞 🐟 分选 (MACS) 试剂盒或流式细胞 🌷 仪
抗体 🦅 或标记物 (如 🌷 CD34、CD133)
冷冻 🦈 和储 🌿 存:
冷冻培养 🐟 液 🕷 (如 DMSO)
冷冻管或 🌼 培 🐟 养瓶 🐼
液氮罐 🐋 或超低 🦄 温冰箱
其 🦁 他耗 🐘 材:
移液 🌴 管 🐳 和移 🌿 液器
无 🕸 菌尖 🍁 端 🐵
洗瓶细胞 🦅 刮刀
显微镜 🐒 载玻 🦆 片 🦅 和盖玻片
2、干 🌻 细胞培养用什么培养基
干细 🦅 胞培养中常用的培养基包括:
特异性培养基:为特定类型的干细胞量身定制,提供必 🌷 需的生长因子和营养 🐒 物质。例:如
人胚胎干细胞 🐡 培 🌵 养 🕊 :mTeSR? Plus、StemPro? hESC SFM
人诱导多能干细 🌴 胞培养培养:StemMACS? iPSC基培养基、TeSR?E8?
基础培养基:提供干细胞 🦟 生长的基本营养物质和生长因子。例:如
αMEM培 🦁 养基 🐎
DMEM/F12培 🦄 养 🐱 基 🕊
添加剂加:入基础培养基中,提供额外的生长因子或抑制剂以支持干 🦉 细胞生长。例:如
B27补 🐡 充 🌻 液
N2补 🪴 充 🦉 液 🌼
白 🐱 蛋白 🌸
转 🌷 化生 🌿 长因子 🐈 α (TGFα)
抑制剂(如Y27632,用于抑制ROCK通路 🦍 )
具体使用的培养基类型取决于干细胞的类型、分化状态 🐡 和其他因素培养基的。选。择应根据干细胞培养条件的具体要求确定
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3、干细胞培养需要多长时间 🐯
干细胞培养所需 🍀 的时间取 🌳 决于具体培养途径和细胞类型:
胚胎干细 🐡 胞 (ESC):
培养至 🌵 初代 🦅 :约 57 天
培养至培养 🐋 稳定 🐶 :约 24 周
诱 🐠 导多能干细胞 (iPSC):
重 🐝 编程过 🦉 程 🐋 :48 周
培养 🍁 至 🐡 初代:约 🦍 57 天
培养至培养稳定:约 24 周 🦁
成人干 🌲 细胞:
培养至 🐯 初代:24 周 🦊
培养至规模扩大:12 个月或 🐋 更长时间,具体取决于细胞类型
总 🦁 培 🐅 养时间 🌾 :
ESC: 约 🐵 611 周
iPSC: 约 616 周 🐞
成 🐼 人干细胞 🐞 : 约 🐈 36 个月或更长时间
请注意,这,些时间范围仅为估值实际时间可能因 🦍 实验 🌹 室条件和细胞系而异。
4、干细胞培养需要的 🕊 仪器 🐴
必 🕊 需 🐎 仪 🐱 器:
生物安全柜:无菌 🌴 环境,用于进行细胞培养操 🕷 作。
细胞培养箱:提供 🐛 恒温、湿 🐟 度和 CO2 条件,以维持 🐕 细胞生长。
显微 🦟 镜:用于检 🐛 查细胞形态和生长。
离心机:用于细 💮 胞沉淀和提取培养基。
移 🐋 液枪:用于精确转移 🐱 液体 🦄 。
细 🐵 胞刮刀 🦟 :用于从培 🦁 养皿中分离细胞。
培养皿和培养 🦆 瓶:作为细胞生长的容器。
可 🐴 选仪 🐡 器:
流式细胞仪 🐈 :用 🐱 于表 💐 征细胞群并进行细胞分选。
PCR 仪:用于 🌸 检测 🐡 细胞标 🌵 记物或进行基因表达分析。
显微 🦅 注射仪:用于将 🌼 物质注入 🦉 细胞。
细胞计数器:用于测定细胞数量和活 🐅 力 🦢 。
细胞分选器:用 🐒 于分离 🐎 特定细胞亚群。
组织 🌷 培养系统:用于 🐺 培养多细胞结构,例如类器官。
生物反应器:用于大规模 🐎 细胞培养或组织工程 🐘 。