🐝 干细胞培养因子教学(干细胞培养 🐋 因子教学ppt)
- 作者: 朱颜可
- 来源: 投稿
- 2025-08-14
1、干 🦢 细胞培养因子教学
干细胞培养因 🐦 子教学
干细胞培养因子在维 🌴 持干细胞自我更新和多能性方面至关重 🐟 要。
培养因子通过结 🐴 合到细胞表 🌿 面受体或通过内吞 🦋 作用激活下游信号通路,调节细胞行为。
主要培 🕸 养因 🌲 子
FGF2 (成纤 🌳 维细 🌲 胞生长 🦋 因子 2)
促进 🌷 干细胞增殖和自我更新。
通过激活 🐟 激 MAP 酶和激酶 PI3 信 🐧 号通路发挥作用。
EGF (表 🌾 皮 ☘ 生长因子)
与 FGF2 共同作用,促 🍀 进干细胞增殖和分化。
通过激活 EGFR (表皮生 🌲 长 🐵 因子受体) 信号通路发挥作用。
LIF (白 🐱 细胞抑 🌾 制因子)
维持胚胎干细胞自我更 🦋 新和抑制分化。
通 🐱 过激活 🦉 JAKSTAT 信号通路发挥 🌹 作用。
TGFβ (转化 🌸 生长因子 β)
调 🦅 节干细胞分化 🐝 和归巢。
通过激 🐺 活 Smad 信号通路发挥作用。
BMP4 (骨形态发生 💐 蛋 🕸 白 🐘 4)
诱导 🕸 干细胞分化为中胚层细胞谱系 ☘ 。
通过激活 BMP 信 🐒 号通 🐬 路发挥作用 🦢 。
Wnt3a
维 🌷 持 🐧 干细胞自我更新和抑制分化。
通过激活 βcatenin 信号通路发挥作用 🦄 。
培养 🦉 因 🐘 子 💐 配方
培养 🕸 因子配方 🐞 因干细胞类型和培养条件而异。
通常使用无血清培养基,其中包含基本营养物质和特定的培养因 🕊 子 🌴 。
培养因子 🐝 添 🐱 加
根据培养基体积添加 🐬 培养 🐳 因 🌺 子。
通常 💮 使 🌴 用 10100 ng/ml 的培 🕷 养因子浓度。
培养因子储存 🐺
培 🐝 养因子应保存在 20°C 或 🦟 80°C。
冻融循 🌳 环应尽可能减 🦊 少。
质量控制定期监测培养因子 🐵 的活性,以确 🦄 保其 🌲 质量。
可使 🌳 用生物活性测 🕷 定或 Western 印迹 🌷 来评估活性。
常见问题Q:培养 🦄 因子何 🐬 时添加?
培 🕷 养因子通常在传代或重新悬浮干细胞 🌲 后立即添加。
Q:培 🐈 养因子过量 🍁 会发生什 🌼 么?
培养因子 🐅 过量可 🌲 能会导致干细胞分化或死亡 🌻 。
Q:如何 🐶 优 🌳 化培养因子 🐝 配方?
通过尝试不同的 🦅 培养 🐒 因子组合和浓度来优化配方,满足特定的干细胞培养要求。
2、干 🌾 细胞培养因子 🦍 教学ppt
干 🐴 细胞培 🦄 养因子 🐋 教学 PPT
幻灯片 🦊 1:标题 🌷
干细胞培养因子:定义和作用 🌿
幻灯 🐋 片 2:定 🌳 义
定义干细胞培养因子:支持干细胞自我更 🦊 新和增殖的蛋白质、多肽或其他小分子
强调培养因 🐞 子的必需性,以维持干细胞的干性 🦊
幻 🐟 灯 🐼 片 3:作 🌹 用
调 🦈 节细胞周期、凋 🐡 亡和分化
促进 DNA 合成 🐠 和细胞增殖
抑制分 🌸 化 🦍 和保 🐈 持干性
幻灯 🐳 片 4:分类
生长因子:刺激细胞增殖 🕷 ,如 EGF、FGF 和 IGF
细胞因子 🐬 :调节免疫功能和细胞相互 🕊 作用,如和 IL、TNF IFN
激素:调节细胞代谢和增殖,如皮质 🌲 醇和甲状腺激素
幻灯片 🐞 5:选择培养因子 ☘
考 🐅 虑细胞类型、培养阶段和期望的结果
参考文 🐋 献和供应商建议
优化浓 🐳 度和组合
幻灯 🦉 片 6:培养因 🌲 子制备
商业来源:纯 🐶 化和浓缩,易于使用
体 🐺 内来源:从组织、血清或血浆中提取
重组来 🐘 源:基因工程产生 🌼 ,高度特异性
幻灯片 7:添加 🦊 培养 🪴 因子
定期补充新鲜培 🐞 养因子
避免过度或不足添加 🌴
优化添加 🐡 时间和频率
幻灯片 🍀 8:培养因子 🌷 储存
冷冻储 🦉 存,避免 🦍 反复冻融
避 🕷 光储存,防止降解
定期监测培养因子 🐋 的活 🌷 性
幻 🦟 灯片 🌷 9:质量控制
检测污染物:内毒素、支 🌻 原 💮 体和真菌
验 🐴 证培养因子的活性:细胞增殖测定
记录 🐳 保存和批 🐈 次追溯 🍁
幻灯 🐎 片 🦢 10:结论 🌲
培养因子对 🐯 于 🦄 干细胞培养至关重要 🐈
选择、制备和添 🌿 加培养因子对于维护干细胞干性至关重要
质量控制 🐼 对于确保培养因子质量和培养成功至关重 🐅 要 💮
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3、干细胞培养 🐟 视频 🐯 教程
干细胞 🌷 培养视 🦊 频 🐠 教程
第 1 部分 🕸 :准备 🐺 培养基 🦅
视频 1:如 🌹 何 🦅 配制干细 🦅 胞培养基(5:31)
视频 2:配 🌵 制 FBS 补充剂(1:47)
第 2 部分:培 🌷 养基和培养皿 💐 准备
视频 3:涂敷 ☘ 培养皿和培养 🐈 瓶以用于干细胞培养(5:40)
视频 4:准备 🪴 和钝化 🦟 细胞 🌲 培养瓶(2:40)
第 3 部分:干细胞培养技术 🐎
视频 🌳 5:如何 🦆 从冻存中复苏 🌷 干细胞(5:47)
视 🐵 频 🌺 6:干细胞传代(5:08)
视频 7:干细 🪴 胞分离 🦊 :Ficoll 方法(4:36)
第 4 部分 🐕 :细胞计数和活力评估
视频 8:使用血 ☘ 细胞计数器计数干细胞(3:04)
视频 9:使用 🌴 台盼兰染色评估干细胞 🐯 活力(4:17)
第 5 部分 🦉 分 🐱 :化和 🦈 诱导
视频 10:干细胞 🦊 向神经祖细胞的分化 🐱 (4:43)
视频 🐈 11:诱 🦢 导多能干细胞(iPSCs)的产生(5:16)
第 6 部分:故障排 🐦 除
视 🐦 频 12:干细 🌸 胞培养常见问题故 🌴 障排除(5:39)
视频 13:干细 🐎 胞污染 🌾 检测和去除(4:07)
提示:确 🕷 保在无菌环境下 🦆 进行所有操 🌾 作。
穿戴 🐧 适当的个人防护装备 (PPE)。
遵循特定于您使用的细胞类型的 🦋 详细说明 🐅 。
定期监测培养物并根据需要进行调整 🐯 。
如果您有任何问题或疑虑,请务必咨询经验丰富的干细胞研 🌻 究人员。
4、干细胞培养液的成分 🐡
干 🌺 细胞培养液的成分
干 🐘 细 🐵 胞培养液是培养和维持干细胞生长和增殖所必需的液体环 🌻 境。它通常包含以下成分:
1. 基础 🐼 培养基
DMEM(杜尔伯克改良的 🌵 鹰氏培养基):为干细胞提 🐱 供基本营 🐶 养。
RPMI1640:另一种广泛用于干细 🐈 胞培养的培养基。
2. 血清 🦊 或生长 🕊 因子
胎牛血清(FBS):富含生长因子和其他营养物质,促进干 🌼 细胞增殖和存 🌸 活 🌵 。
生长因子 🌿 :如 bFGF(碱性 🐘 成纤维细胞生长因子)、EGF(表)皮生长因子和SCF(干细胞因子),刺激干细胞增殖和分 🐕 化。
3. 补 🍀 充 💐 剂 🕊
谷氨酰胺:非必需氨基酸,支持能 🌹 量代谢。
青霉素/链 🐧 霉素:抗生素,预防细菌污染 🌼 。
β巯 🐟 基乙醇:抗氧化剂,保护 🐞 干细胞免受氧化应激。
非必需氨基酸:如丙氨酸、天冬氨酸和丝 🦈 氨酸,补充细胞代谢所需的营养。
4. 其他 🦈 成 🕸 分
缓冲液 🌴 (如 HEPES):调节培养液的 🐦 pH 值。
血小板来源生 🌻 长因子(PDGF):促进基质细胞增殖和存活。
肝细胞生长因子(HGF):刺激干细胞 🐧 迁移和侵 🐳 袭。
培 🕷 养液 🐘 的 🐘 优化
干细胞培养液的成分可能会根据 🐯 所培养的干细胞类型和特定的实验要求而有所不同。因此,需要。对 🕊 培养液进行优化以获得 🐘 最佳的干细胞生长和功能
质量控制干细胞培养液的质量对于确保干 🌵 细胞培养的成功至关重要培养液。应定期监测其成分、pH 值 🦁 和无菌性,以确保。其符合质量标准