🐯 胚胎干细胞分离试剂（胚 🐎 胎干细胞分离试剂是什么）
- 作者: 郭无恙
- 来源: 投稿
- 2025-05-08
1、胚胎干细 🌿 胞分离试剂
胚胎干细胞 🌼 分离试剂
胚胎干细胞分离试剂用于从胚胎中分离出 🐺 胚胎 🐯 干细胞分离。的主要目的 🦊 是从异质细胞群体（例如胚胎中）纯。化具有特定表型的细胞
分离原理胚胎干细胞分离试剂通常通过免疫磁珠法或荧光激活细胞分选（FACS）来分离目标细胞。这。些方法利用细 🐧 胞表面标志 🦋 物来结合和分离特定细胞群
免疫 🐦 磁珠法
原理：抗原特异性抗体偶联到磁性珠子上。这些珠子与细胞表面抗原结合，使。带，有。目标抗原的细 🐋 胞附着在磁珠上然后磁性分离器将磁珠与结合细 🐱 胞分离出来
试剂：磁性珠 🐈 、偶联有抗细胞表面标记物 🐎 的抗体。
荧光激活细 🐠 胞分选（FACS）
原理：荧光标记的抗体与 🕊 细胞表面标记物结合。使用流式细 🐝 胞仪荧光标记的细胞，根，据荧光。强度和散射特 🕊 征进行分选从而分离出目标细胞
试剂 🐴 ：荧光标记的 🐡 抗体、流 🐼 式细胞仪。
试剂选择选 🦅 择胚胎干细胞分离试剂时，需要考虑 🐬 以 🕷 下因素：
细胞表面标记物：确定目标 🕷 胚胎干细 🍁 胞的特定细胞表面标记物。
分离 🐳 方法：根据实验室设备 🐼 和专业知 🦁 识，选择免疫磁珠法或 FACS。
抗体特性：选择针对目 🐅 标细胞 🐈 表面标 🐝 记物具有高亲和力和特异性的抗体。
试剂纯度：选择经过验证且低内 🌾 毒 🦍 素的试剂，以避免细胞污 💐 染。
常见试剂用于胚胎干细胞分离 🐟 的常见试剂包括：
免 🌹 疫磁 🐵 珠：Miltenyi Biotec 的的 MicroBeads、STEMCELL Technologies EasySep? Beads
荧 🐋 光标记抗体：BD Biosciences 的抗体的抗体 FITC 、eBioscience PE
流式 🌲 细胞仪：BD Biosciences 的 🐝 的 FACSAria、eBioscience CytoFLEX LX
注意事项胚胎干细胞分离是一项精细的技术，需要经验和熟练的 🦢 技术人 🌷 员。
严格 🪴 遵守制 🦆 造商的说明，以 🐼 确保分离的准确性和细胞活力。
细胞培养条件和分离后细胞护理至关重要，以维持胚胎干细胞 🐠 的特性。
2、胚胎干细胞分离试 🐞 剂是什 🌻 么
胚胎干细胞分 🪴 离试剂是指用于从胚胎中分离 🦉 胚胎干细胞的化学物 🕊 质或试剂。这些试剂可以抑制胚胎内其他细胞的发育，而。促进胚胎干细胞的生长和分离
常见的胚胎干细 🐋 胞分 🐅 离 🦟 试剂包括：
colcemid（秋水仙碱）：一种抗有丝分裂剂，可 🌹 以阻止 🐈 其他细胞分裂。
cytochalasin B（细胞 🕊 松弛素B）：一种细 🐒 胞骨架抑制剂，可以阻止细胞运动和 🦅 粘附。
trypsin（胰蛋白酶）：一种蛋 🦋 白酶，可，以消化细 🦍 胞外的基质从而分离细胞。
EDTA（乙 🐛 二胺四乙酸）：一种螯合剂，可，以去除细胞外基质中的钙离子从而减弱细胞粘附。
dispase（双酶）：一 🦆 种蛋白酶，可，以消化细胞外基 🐅 质中的蛋白聚糖从而分离细胞。
胚胎干细胞分离试剂的具体选择取决于分 🍀 离方法 🐠 和胚胎的具体情况。
3、胚胎干细胞从哪里分离 💐 获取 🐋
胚 🌵 胎干细胞是从胚泡中分离提取的胚泡是。在受精卵受精后 57 天。形成的早期胚胎阶段胚泡由内细胞 🕊 团（ICM）和。滋。养层细胞组成内细胞团是胚胎干细胞的来源
4、胚胎干细胞分离 🦆 试 🐈 剂怎么用
胚胎干细 🐒 胞分离试剂的使用步骤
材料：胚胎干细胞分离试剂 🐦
培养基移液管
培养皿
离心机
步骤：
1. 制备胚 🍀 胎干细胞悬浮液：
从培养皿中收集胚胎干细胞，并用磷 🦅 酸盐 🐺 缓冲 🌵 液 (PBS) 洗涤几次。
将细胞悬浮 🐈 在培 🦆 养基 🌳 中。
2. 添 🍁 加分离 🕷 试剂：
根据制造商的 🦈 说明向细胞悬浮 🐱 液中添加胚胎干 🍀 细胞分离试剂。
轻轻涡旋以充 🌴 分混 🐯 合 🌾 。
3. 孵 🐼 育 🐡 ：
在 🦅 4°C 下孵 🍀 育细胞悬浮液，时间根据试剂说明而 🐎 定。
孵 🐯 育期间，每 🌳 10 分钟用移液管轻轻涡旋一次悬浮 🐘 液。
4. 离 🌹 心 🕊 ：
孵育后，将细 🐋 胞悬浮 🌹 液在离心机中以指定的离心力离心 510 分钟。
5. 收 🦆 集细 🌵 胞 🌿 ：
离心后，小心翼翼地吸出 🐛 上清 🐠 液 🐶 。
用 🍁 培养 🦄 基重悬剩余的细胞 🌸 。
注意：使用胚胎干细胞分离试 🌿 剂时 🦁 ，请务必遵循制造商的说明。
分离的细胞可以用于进一 🐱 步的实验，例如培养或 🌲 免疫表征 🦢 。
分离后的细 🍀 胞应立即 🦄 使用或 💮 冷冻保存。
