干细胞分离技术有哪些(干细胞分离 🐕 技术有 🦊 哪些类型)
- 作者: 李竞琛
- 来源: 投稿
- 2025-09-10
1、干 🦆 细胞分离技术有 🐝 哪些
基于表 🐴 面标志物的干细胞分 💮 离技术
正选择:使用抗体或亲 🦁 和剂靶向干细胞特异性 ☘ 表面标志物,将其从细胞混合 🦄 物中分离出来。
负选择:使用 🌲 抗体或亲和 🐺 剂靶向干细胞不存在的非特异性表面标志物,去 🦊 ,除非靶细胞留下干细胞。
基于荧光激活细胞分选 (FACS) 的 🌻 干细胞分离 ☘ 技 🦄 术
细胞表面抗原标记:使用荧光标记抗体靶向干细胞表面抗原,然后通过 FACS 进行分 🐴 选。
细胞内 🐝 标记 🦄 :使 🦆 用荧光染料标记干细胞特异性细胞内成分,然后通过 FACS 进行分选。
基于磁性细胞分选 🌳 (MACS) 的干细胞分离技术 🐬
免疫磁珠:使用与干细胞表面标志物结合的磁 🌳 性免疫 🌲 磁珠标记干细胞。然。后通过磁力梯度分离系统将标记后的干细 🐈 胞与非靶细胞分离
基于微流体分选的干细胞分离技术 🌿
层流式分选 🐯 :利用层流流体将细胞 🐼 按尺 🦢 寸、密度或其他生物物理特性分离。
微流控芯片分选:利用微流控芯片中的微通 🐟 道和特殊设计结构对细 🌼 胞进行分选,基于大 🌳 小、形、状电荷或其他特性。
其他干细胞 🌵 分 🐺 离技术
细胞培养:利用干细胞的增殖能力,在体外培养 🌷 中让 🦍 干细胞增殖 🦊 并分离。
免疫扩增:使用干细胞特异 🌺 性抗体 🌿 或细胞因子的刺激,在体外诱导干细胞增殖。
激光捕获微切割 (LCM):使 🪴 用激光显微镜 🦆 选择性地从组 💐 织切片中分离干细胞。
2、干细胞分离技术有哪 🐳 些类型
干细 🌲 胞分离技 🕷 术 🐳 类型
1. 正 🌹 分 🌹 选
通 🌲 过使用抗 🌻 体或其他配体,特异性地靶向和捕获所需类型的干细胞 🐵 。
方法: 磁 ☘ 性激活细胞分选 (MACS)、流式细胞分 🐳 选 (FACS)、免疫磁 🌲 珠分离
2. 负分 🐎 选
通过去除不需要 🐋 的细胞类型,间接分离所需 🌷 类型的干细胞。
方法: 免疫耗竭 🦅 、抗原呈现细胞 🌲 (APC) 介 🐯 导的分选
3. 物理 🌹 分离
密度梯度离心:利用细胞密度差异,通过离心在不同密 🐠 度梯度中分离干细胞。
大小排阻色谱:利用细胞大小差异,通过色谱柱分离干 🐟 细胞。
4. 表面标记分 🐒 离
识别并分离具有特定 🐦 表 🐞 面标记的干细胞。
方法: 免疫亲和色谱、磁 🐵 性纳米颗粒标记
5. FACS 分 🦉 选后扩 🐦 展 🐴
使用 FACS 分选分离稀 🐘 有干细胞,然后在 🐝 体外扩增以产生足够的数量。
6. 细胞培养分 🐈 离
利用选择性培养条件,促,进所需干细胞的增殖同时抑制其他细 💐 胞类型的生长。
方法: 克隆形成试验 🐎 、球体 💐 培养
7. 组 🦋 织工程分离 🐠
在体内或体外利用支架或生物 🐬 材料 🐧 来定向干细胞分 🕊 化和生长。
8. 微流 🦅 体分离 🌻
利用微流体设备,基于细胞尺寸、电荷或其他特性进行高 🐛 通量干细胞分选 🦆 。
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3、干细胞分离技术有 🌾 哪些方法 🌷
干细胞分离 ☘ 技术
基于细胞 🐡 表 🐋 面标记 🕊 的方法
磁性细胞分选 (MACS):利用抗体结合到细胞表面上的特定抗原,然后用 🕸 磁珠将标记的细胞分离。
流式细胞术分 🐧 选 (FACS):利用荧光标记的抗 🐳 体识别细胞表面抗原,然后通过荧光激活的分选器对细胞进 🌴 行分离。
免疫亲和层析:利用 🐎 抗体附着在固相支持物上,通过与细胞表面抗原结合将目标细 🌴 胞分离。
基 🐧 于细胞 🦍 密度的方法
离心法:利用细胞密度差异,通过离 🐒 心将不同的细胞类型分层。
层析法:利用不同细 🌵 胞类型在特定介质中的流动速度不同,通过层析柱将细胞分离。
等 ☘ 渗梯度离心法 🌺 :利用蔗糖或等 Percoll 密度梯度介质,通过 🍀 离心将细胞按密度分层。
基于细胞 🐒 大小 🌼 和形态的方法 🌺
微流体分 🌼 选:利用微流体装 🦟 置中的特殊通道和流体特性,根据细胞大小和形状对 🌲 细胞进行分选。
过滤法:利用不同孔径的滤 🦆 膜过滤,根据细胞大小将细胞分离。
激 🐞 光切割分选:利用激光束聚焦在目标 🦍 细胞上,通过切割细胞 🐝 膜将其分离。
基于细胞特性的 💐 方 🐟 法 🌿
抗体依赖的细胞毒作用 (ADCC):利用抗体靶向特定细胞表面抗原 🐬 ,然后通过细胞毒性 🐕 细胞 T 或巨噬细胞介导的 ADCC 将目标细胞 🐱 破坏。
细胞凋亡选择:利用 🌹 诱导细胞凋亡的试 🌷 剂 🐶 或抗体,将凋亡的细胞选择性地分离。
细胞增殖选择:利用特定 🦋 培养 🐠 条件或生长因子选择,性地 🐛 分离具有特定增殖能力的细胞。
其他方法磁性共振成像指导的分选 (MRIguided sorting):利用 MRI 来识别和定位目标细胞,然后用磁性操纵器或磁珠将细 🐒 胞分离。
声波分选:利用声波 🌷 的 🌻 声学性质,将不同的细胞类型按大小和密度分层或分离。
4、干细胞分离技术有哪些种 🐕 类
干细胞分离 🪴 技 🐅 术种 ☘ 类
基于表面标 🐬 记的分离技术:
流式细胞术 💮 分选(FACS):利用荧光 🐟 抗体 🌹 标记特定的细胞表面抗原,然后使用流式细胞仪分选具有所需抗原表达的细胞。
磁性细胞分选(MACS):使用磁珠 🌹 标记特定的细胞表面抗原,然,后将磁珠与 🐧 带有磁铁 🐴 的柱子结合从而分离出标记的细胞。
基于密度梯度的 🦢 分离技术:
离心梯度分离 🦋 :将细胞悬浮液通过密度梯度(例如 Percoll 或 Ficoll)进行离心,不同的 🐛 细胞类型根据其 🦉 密度分离到梯度的不同层。
缓冲液 🐛 层分离:将细胞悬浮液分层叠加在不同密度的缓冲液中不同的细胞,类型迁移 🐅 到与它们密度相 🦅 匹配的层。
基于细胞大 🐟 小或形 🦉 态的分 🐱 离技术:
筛选和过滤:使用不同孔径的网 🌵 格或滤纸分离不同大小或形状的细胞。
沉降法:允许较大 🍁 的细胞沉降到容器底部,而较小的细胞保持悬浮。
基于细胞 🕊 活性的分离技术:
免疫珠联结:将特定的抗原或抗体固定在珠子上,然,后将细胞 💮 悬浮液与珠子孵育 🌸 以分离与抗原或抗 🌹 体结合的细胞。
红细胞溶解:使用 🐼 特定 🌲 试剂溶解红细胞,从而分 🕊 离出非红细胞细胞。
基 🪴 于细 🦄 胞培 🦆 养的分离技术:
贴壁培养:基于细胞对培养基 🕸 质的附着能力附着细胞 🕷 ,可以从非附着细胞中分离出来。
悬浮培养:细胞在培养基中不附着,可 🍁 以从培养基中直接收集。
其他分 🦋 离 🐕 技术:
激光显微切割:使用激光扫描显微镜从组织 💮 切 🐒 片中选择 🦈 性地切割特定的细胞或细胞群。
微流控芯片:利 🌸 用流体动力学原理在微流控设备中分离细胞。