肿瘤干细胞分 🐵 离的方法（肿瘤干细胞分离的方法有哪些）
- 作者: 郭泽谦
- 来源: 投稿
- 2025-05-16
1、肿瘤干细胞分离 🌷 的 ☘ 方法
肿瘤 🐵 干细胞分离的方法
1. 细胞 🌾 表 🐱 面标记物 🦢
CD44+/CD24 (乳 🐈 腺癌)：CD44高表达与肿瘤 🐈 干细胞特性相关，而CD24低表达与肿 🐦 瘤进展有关。
CD133+ (胶质瘤)：CD133是一种跨膜糖蛋白，与神经干细胞和肿瘤干细胞的自 🍀 我更新能力有关。
ALDH1A1+ (多种肿瘤 🐼 )：醛1A1脱氢酶是一种酶，其活性与肿瘤干细胞的抗氧化和解毒能力有关。
2. 功 🌷 能 🐒 检 🌷 测
侧群分选 (SP) 细胞侧群细胞：具 🐈 有将碘化物泵 🍀 出的能力，与肿瘤 🌲 干细胞的耐化疗性有关。
腺小体形成能力：肿瘤干细 💐 胞具有在体外培养基中形成腺小体的能力，模仿肿瘤组织的结构。
异种移植成瘤能力：肿瘤干细胞可以异种移植到免疫缺陷小鼠中并形成肿瘤，验证其致瘤性 🍀 。
3. 体内 🦁 富 🐶 集 🌷
原位标记：使用标记肿瘤干细胞的荧光蛋白或磁性示踪剂，在体内选择性地富集肿瘤干细胞 🐋 。
微环境培养：利用肿瘤干细胞 🦟 微环境的 🐴 特定因素，在体外富集具有干细 🐈 胞特性的细胞。
4. 肿 🐛 瘤球体培 🪴 养
非贴壁培养：肿瘤细胞在非 🌵 贴壁条件下培养，形成以肿瘤干细胞为主的肿瘤球体。
极低浓度贴壁培养：肿 🐳 瘤细胞在极低浓度下贴壁培养，存活下来的细 🌳 胞富含肿瘤干细胞。
5. 基因 🐈 表 🌳 达谱 🐟
转录组分 🐅 析：比较肿 🌵 瘤干细胞和非肿瘤 🐦 干细胞的基因表达谱，鉴定与肿瘤干细胞相关的特征基因。
表观遗传分析：研究肿瘤干细胞的表观遗传变化，如DNA甲，基化和组蛋白修饰以了解 🌴 其自我 🦄 更新和分化的机制。
6. 生 🐱 物信息学方法
机器学习：利用 🦅 机器学习算法对肿瘤干细胞相关的数据 💐 进行分析和分类。
数据集成：整合来 🐯 自不同来源的数据，提供肿瘤干细胞生物学的全面视图。
2、肿瘤干细胞分离的 💮 方法有哪些
肿瘤干细 🐈 胞分离的方法
1. 细胞表面 🐅 标记法 🐱
CD133：用于造血干细胞和其他实体肿 🦢 瘤的肿瘤干细 🐕 胞
CD44+、CD24、或ALDH1+：用 🐶 于乳 🐶 腺癌肿瘤干细 🐈 胞
CD166：用于结直 🐬 肠癌和肝癌 🐝 肿 🐟 瘤干细胞
ESA：用于前列腺 🌹 癌肿瘤干细胞
2. 功 🍀 能性检 🐴 测 🌴 法
球状集落形成试验（SphereFormationAssay）：将 🐘 肿瘤细胞接种在无血清培养基中，具有自我更新能力的肿瘤干细 🍁 胞会 🐅 形成三维球状集落。
侧群细胞 🐯 分离侧群细胞（SidePopulation）：表现出特定的膜转运蛋白表达，并具有较强的 🐺 耐药性和自我 🐦 更新能力。
3. 分选 🌾 法
磁性激活细胞分选（MACS）：使用带有磁珠包被的靶向抗体，捕捉 🐵 并分选出特定表面标记的细胞。
荧光激活细胞分选（FACS）：使用荧光标记抗体，识别和 🦊 分选出特定 🐱 表面标记 🌿 的细胞。
4. 基因型或表 🐡 型 🐼 分选法
癌基因或抑癌基因的突变分选：利用特异性引物或探针，筛选具有特定基因突变的肿瘤干细胞 🐈 。
微阵列或RNA测序：比较肿瘤干细胞和非干细胞之间的基因表达谱，识别和分选出特定的生物 🌻 标记。
5. 其他 🦅 方 🐈 法
免疫原性多重微球法：使用多重微球 🐧 包被多种抗体 🌷 ，同时检测多种表面标记。
激光捕获显微切割法：使 🦍 用激光显微镜，从组织切片中捕获和分离特定的细胞群。
需要注意的是，肿瘤干细胞分离方法的选 🐠 择取决于特定肿瘤类型、预期用途和可用资源。
3、肿瘤干细胞分离的方法 🕸 是什么
肿瘤干 🌾 细胞 🍁 分离的方法 💐
肿瘤干细胞 (CSC) 是肿瘤细胞中的一小 🌵 部分亚群，具有自我更新和分化潜 🌸 能的分。CSC 离对于研究肿瘤发生发 🦋 、展和。治疗具有重要意义
以下是一些常用的 🐳 CSC 分离方法：
基于 🌷 表面标记的分 🐦 离 🪴 ：
流式细胞术：使用标记 CSC 特异 🦋 性表面标记的抗体，通过流式细胞术对细胞进行分选。
磁性细胞 🦅 分选 (MACS)：使用标记 CSC 特异性表面标记的磁珠，通过磁场分离 CSC。
基于功 🦟 能特性的分 🐱 离：
侧群分选 (SP)：基于 CSC 能够将 Hoechst 33342 染料 🐠 排出侧向散射 (SSC) 门之外的特性进行分选。
培养球体形成：在无血清、富含生长因子的培养基中培养肿瘤细胞形成球体，能。CSC 够形成球体，而 🌹 。其他肿瘤细胞则无法形成
基于基因表达谱的分 🐴 离：
RNA 测序 (RNASeq)：对 RNA 肿瘤细胞进 🐞 行测序，分析 CSC 特异性基因表达谱。使，用 🌵 这些信息设计引物通过分 PCR 离 CSC。
免疫组印迹 (Immunoblotting)：使用标记 CSC 特异 🌸 性蛋白质的抗体进行免 🦉 疫 🌷 组印迹，分 CSC 离具有标志物的细胞。
其他方 🌲 法 🐒 ：
细胞培 🐴 养：通过在特定条件下培养肿瘤细 🐧 胞，富集 CSC。
小动物模型：在小动物模型中 🐞 移植肿瘤组织，使用荧光标记或其他技术追 🐕 踪 CSC。
注意事项 🌾 ：
CSC 分离方 🐋 法的准确性取决于所用的标记物和方法的优化程度。不。同的肿瘤类型可能需要不同的分离方法分离出的 CSC 并不一定是纯的可能 🐘 ，包。含，其。他类型的细胞因此使用多种方法进行分离和验证非常重要
4、肿瘤干 🐒 细胞分离的方法是
细胞表面标志物分选：使用抗体靶向和捕获表 🦋 达 🦟 于肿瘤干细胞表面的特异性细胞表面标志物，例如和 CD133、CD44、CD24 CD326。
侧向散射（SSC）和前向散射（FSC）：利用流式细胞仪对细胞大小和颗粒度进行排序，肿 🌴 瘤干细胞通常显示出较高的和较 SSC 低的 FSC。
ALDEFLUOR 活性分选：基于肿瘤干细胞高活性 ALDH 使 🐠 ，用 ALDEFLUOR 检测 🌼 试剂分离荧 🌲 光阳性的细胞。
细胞克隆形成性球体培养：将细胞悬液培养在无血清的悬浮培养基中形成球体，肿，瘤干 🦉 细胞能够在低附着环境中形成球体。
染料排除法 🐋 ：基于肿瘤干细胞具有较强的药物外排能力，使用 Hoechst 33342 或罗丹明 123 等染料排除染料强，烈的细胞即为肿瘤干细胞。
免疫磁珠分选：使用结合细胞 🌳 表面标志物的磁珠捕获和分 🌵 离肿瘤干细胞。
微流体平 🐶 台：利用微流体装置对细胞进行大小、形状或电荷等物理性质的分选。
异种移植：将人类肿瘤样本或肿瘤细胞系移植到免疫缺陷 💐 的小鼠体内移植，后形成肿瘤的细胞被视为肿瘤干细胞。
