大鼠骨髓干细胞提取(骨 🐡 髓干细胞提取对身体 🐦 有什么影响)
- 作者: 马芊桐
- 来源: 投稿
- 2025-08-30
1、大鼠骨髓 🐦 干细胞提取
大鼠骨髓 🦊 干 🐒 细胞提取
材料:大鼠
清洁的工 🕸 作 🐋 区域
手术 🦉 器械
无菌无热源液 🦉 (PBS)
流式 🌵 细胞仪 💐
用于 🐠 干细胞培养的培养基 🌺 和培养皿
步骤:1. 准备大鼠 🐅 :
对大鼠进行麻醉 🐝 。
消毒 🦄 手术 🐵 区 🐒 域。
2. 取 🌼 出股 🐱 骨 🦉 :
使用剪刀或骨剪沿大腿 🦁 内侧切开皮肤 🐛 和肌肉。
暴露股 🐅 骨并小心 🦢 将其取出。
3. 抽取 🌾 骨 🦋 髓 🐡 :
使用 21 号针刺入股骨骨干末端 🐵 ,并用无菌无 🐎 热源液 ☘ (PBS) 冲洗骨髓腔。
使用注射器小 ☘ 心抽取骨髓悬液。
4. 过 🐎 滤 🐺 和 🌲 离心:
将骨髓悬液通过过 70 μm 滤器过滤以去除 💐 骨碎屑。
将过 🌾 滤后的悬液以 🦁 1200 rpm 离心 5 分 🦋 钟。
5. 收 🐈 集干细胞:
小心地吸取沉淀物(含干细胞)并将其转移到新 🦈 的培 🦄 养皿中。
用无菌无热源液 (PBS) 洗涤细 🐒 胞两次。
6. 流式 🕸 细胞术识别 🕷 :
使用流式细胞 🍁 仪对细 🐯 胞悬液进行分析,标记 CD45+ 和细胞 CD34+ 表 🐴 面抗原。
CD45+ CD34+ 细胞 🐅 为大鼠骨髓干细胞。
7. 培养 🐧 干细胞:
将分选出的骨 🐎 髓干细胞 🌸 接种在干细胞培养基 💐 中。
将细 🌹 胞培 🌺 养在 37°C、5% CO2 的环境中 🐛 。
监测细胞生长并根 🌼 据需要更 🐱 换培养基。
提示:在无菌 🐎 条 🐅 件下进行所 🐒 有步骤至关重要。
使用 💮 新鲜的大鼠骨髓可产生最佳结果 🌾 。
干 🦆 细 🕷 胞培 🌹 养需要专业知识和设备。
应用:从大鼠骨髓中提取的干细胞可用 💐 于研究、组织工程和再生医学 🐒 领域。
2、骨髓干细胞 🐳 提取对身体有什么影响
骨 🐝 髓干细胞提取对身体的影响
骨 🐡 髓干细胞提 🌿 取术是一种侵入性手术,涉及从骨髓中收集干细胞。此过程对身体可能产生以下影响:
短期影 🌴 响:
疼痛:提取部位可能会感到疼痛,通常可以止痛药 🌳 控制。
不适:手术 🐡 后几天可能会感到身体不适和疲劳。
出血和瘀伤:提取部位可能会出现出血和瘀伤 🦆 。
感 🐺 染风险:手术后有感染的轻微风险。
神经损伤:在罕见情况下,提取过程可能会损 🐺 伤神经。
长期 🐱 影响 🐦 :
贫血:取出 🌺 大量的骨髓会 🌻 暂时导致贫血。
免疫力下降:骨髓干细胞的数量减 🐴 少会暂时降 🌾 低免疫力。
生育力下降:女性接受大量的骨髓提 🌳 取术可能会导致生育力下降。
脊柱侧凸:在极少数情况下 🦢 ,从腰椎提取大量骨髓可能会导致 🌷 脊柱侧凸。
骨质疏松:频繁的骨髓提取术可能 🌼 导致骨质疏松症的风 🌵 险 ☘ 增加。
其他注意事 🍁 项:
手术后需 🌷 要 🐝 进行血液检查 🐈 和监测,以评估干细胞提取对身体的影响。
在某些情况下,可能需要进行多次骨髓提取术才能收集足够的 🕸 干细胞。
患者接受骨髓干细胞提取术的风险与年龄、健康状 💐 况和提取的数量有 🦄 关 🌷 。
总体而言,骨,髓干细胞提取术是一种相对安全的程序但 🌺 可能会产生一些短期和长期影响。由,合。格的医生进行此程序很 ☘ 重要并且 🐠 患者应充分了解潜在的风险和收益
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3、大鼠骨髓干细胞提取杂 🐦 细胞
大鼠骨髓间 🐅 充质干细胞 🦈 (BMSCs)提取杂细胞
材料大鼠大腿骨 🕸
无菌 💮 生理盐水
培 🦍 养 🌴 基 🦋 (DMEM/F12,含 10% FBS)
抗生素 🕊 (青霉素/链霉素 🐱 )
细胞刮 🐯 板
离心机培养皿
步骤
1. 获取大腿骨:在无菌条件下,处,死大 🌺 鼠取出大腿骨 🌲 。小。心去除周围组织
2. 切除骨髓:剪开大腿 💐 骨 🦋 两端,使 🦉 用细胞刮板小心刮出骨髓。
3. 清洗骨髓:将骨髓悬浮 🐡 在无菌生理盐水中并轻 🐛 轻搅拌。离心 5 分钟,4°C,1000 rpm。
4. 收集细胞沉淀:小心除去上清液,悬浮 🌺 细胞沉淀 🐶 在培养基中。
5. 培养细胞:将细胞培养在包含培养基和抗生素的培养 🌲 皿中。置于的培养 37°C、5% CO2 箱中。
6. 更换 🐈 培养基:每 23 天更换培养基,以去除死 🐯 亡细胞和杂质。
分离杂细 🌸 胞 🐶
贴壁法:BMSCs 会贴壁生长,而杂细胞则悬浮在培养基中培养。天 23 后,轻,轻。晃 🌹 动培养板去除悬浮细胞
荧光激活细胞分选 (FACS):通过表达特定表面标记(如 CD45)区分杂细胞和 BMSCs。使用 FACS 对细胞。进行分选 🕊
注意事项始 🐳 终在无菌条 🐋 件下操作 💐 。
使用新鲜的大鼠骨髓以获得最佳结 🍁 果。
小心 🌺 不要损 🐵 坏细胞。
定期监测细胞生长并更 🐘 换培养 🍀 基。
杂细胞分 💮 离的效率可 🐒 能因培养条 🐳 件和分离方法而异。
4、女性 🐘 提取骨髓干细 🦅 胞生孩子
这是错误的 🐶 信息,女性无法通过提取骨髓干细胞来 🐠 生孩 🐕 子。
人类的繁殖需要一个完整的卵子与一个精子 🐒 受精形成受精卵,然后受精卵发育为胚胎和 🌳 胎儿卵子。是,由。女性的卵巢产生的骨髓干细胞无法转 🌹 化为卵子