外周血提取干细胞流程(为外周血干细胞提取要几万 🦊 块)
- 作者: 杨桉闻
- 来源: 投稿
- 2025-06-10
1、外周 🐈 血 🦉 提取干细胞流程
外周血提 🦄 取干细胞流 🐛 程
术前准备禁 🦈 食 8 小时以上
抽血检查 🐡 和体检,确 🌺 认手术合格
捐献者服药(如格拉斯替芬或爱必妥),刺激干细胞释 🦉 放到外周 🌺 血中 🐞
采集过程1. 静脉穿刺 🐴 :在手臂上穿刺静脉,插入静脉置管。
2. 细胞分离:血液通 🌹 过离心机分离,提取含有干细胞的血浆部分。
3. 干细胞收集:血 🌺 浆 🐶 通过干细胞收集器收集 🦋 干细胞,。
4. 血小板 🐟 归还:分 🐟 离的红细胞和血小板归还给捐 🐒 献者。
5. 干细胞运输:收集的干细 🐕 胞放入专用袋中,在受控温度 🐈 下运输 🦄 到移植中心。
术后护理术后观察 🦊 12 小时 🐈 ,监测捐献者的状况。
捐献者可能会感到手 🐬 臂酸痛或疲劳,通常在几小时内 🐴 恢复。
捐 🍀 献 🦄 者应多喝水并休息。
注意事项捐献前必须进行彻底的医 🐶 疗评估,以确保捐献者身体状况良好。
捐 🦉 献后避免剧烈活动或举重 🐎 活 🍀 动 24 小时。
如果 🌹 出现任何不适症 🦍 状,例如发烧、寒,战或持续疼痛 🍁 请立即就医。
2、为外周 🐡 血干细胞提取要几 🌼 万块
是的,外周血干细胞提取费用 ☘ 可能高达几万元。具。体费用取决于提取过程中的复杂程度以及医疗中心的收费标准
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3、外周血 🐳 提取 🌾 PBMC流程详解
外周血提取 🌻 PBMC 流程详解
材料外周血标 🦟 本 (EDTA 抗 🐧 凝)
密度梯 💮 度 🌷 液(例如 🐵 FicollPaque Plus)
15 mL 和 🌷 50 mL 离心管
吸管(无 🐺 菌 🐵 )
移液 🕊 器(无菌 🐕 )
细 💮 胞计数板和台 🌷 盼蓝 🦈
PBS步骤
1. 密度梯度离 🕊 心 🦉
将 15 mL 的 15 mL 密度 🦟 梯度液轻轻地 🌹 加入离 🕊 心管底部。
在密度梯度液 🕷 上小心地分层 20 mL 的全 🐝 血。避。免产生气泡
以 400 × g 离 🐛 心 20 分钟,室,温离心 🦊 制动关闭。
2. 分离单个核 🐋 细胞 🐺 (MNC)
离心后,在,密度梯度液和血浆之 🐒 间会出现 🐛 一个白色层即层 MNC 。
使用吸管小心地收集 MNC 层,转 🌸 移到新的 50 mL 离心管中。
用 PBS 补足至 50 mL,轻轻 🌹 混 🦍 匀。
3. 洗涤 🌴
以 300 × g 离心 🐠 10 分钟,室,温离心 🐬 制动关闭。
小心 🐧 弃掉上清液。
用 PBS 补足至 50 mL,轻,轻混 🌷 匀重复步骤 3 两次。
4. 计 🐛 数和活力 🌴 评估
从 MNC 悬液中取出 10 μL,稀释至 🐳 100 μL PBS。
在 🕷 细胞计数板上 🦍 计数细胞,并使用台盼蓝进行活力染色以确定活细胞百分比。
5. 细 🐞 胞收 🌻 集 🐺
根据细胞计 🐳 数和所需的细胞数,将 MNC 悬,液离 🌷 心沉淀 🌻 细胞。
小 🌳 心弃掉 🐵 上清液。
悬浮细胞在所需体 🕊 积的培养基或 🦋 缓冲液中,用于进一步分析或实验。
注意事项所 🌷 有材料和试 💐 剂均应无菌操 🦆 作。
均匀分层全血以避 🐅 免污染底层细胞。
在收集 MNC 层时避免吸取底 🦟 部的红细胞 🌸 。
离心时小心 🐅 ,避,免产生气泡这会扰乱细胞 🦍 分 🐵 层。
洗 🕊 涤步骤有助于去除血小板和红细胞残留物。
细胞计数 🕷 和活力评估对于确定细胞质 🕷 量和 🌳 可行性至关重要。
4、自体外 🐠 周血干 🐋 细胞采集过程
自 🌷 体外周血干细胞采 🌳 集过程
自体外周血干细胞采集是一种收集造 🌿 血干细胞(用于骨髓移植或其他医疗治疗)的过程 🕊 。该过程包括以下步骤:
1. 准 🦉 备 🦟
患者 🦄 接受动员 🦈 剂(如粒细胞集落刺激因子,GCSF),以刺激骨髓释放造血干细胞进入血液。
采集前几天,患者可能需要进行静脉 🌼 留置针或 🐈 插入中心 🌺 静脉导管。
2. 采 🌾 集 🪴
患者通过 🪴 静脉接受无菌导管进 🐠 行血液采集。
血液通过一种特殊的机器机器,将造血干细胞 🍁 从血液中分 🐈 离出来 🐟 。
分离出的干细 🌸 胞 🦉 收集在采集袋中。
采集过程通常需要 46 小时,但可能因患者而 🌵 异。
3. 回输 🌲
采集的干细胞 🦁 经清洗和冷冻后储存。
当患 🐞 者需要时,将解冻干细胞并回输到患者体内。
注意事项自体外周血干细胞采集过程通 🐠 常是安全的,但可 🐅 能产生以下并发症:
针头 🐵 放置部位 🍀 疼痛 🌿 或淤血
发烧或发冷 🐵
轻微 💐 恶 🦅 心或呕吐
血小板减少 🐱 症血小板(计数下降)
在极少数情况下,可,能会发生更 🦊 严重的并发症例 🌷 如 🦆 :
肺动脉 🐝 高压肺(部 🌷 血压过高)
骨 🦢 髓衰 🦉 竭
肾 🌹 损 🦍 伤 🐬
好处与骨髓采集相比,自体 🌸 外周血干细胞采集是创伤更小的过程。
采集的干细胞 🌵 可以冷冻和 🐧 储 🦁 存以,备将来使用。
通常,患者可以在采集后很快恢复日常活动 🐈 。