生 🐠 物学专业干细胞培养（干细胞与生殖生物学国家重点 🦢 实验室）
- 作者: 王梨珂
- 来源: 投稿
- 2025-05-22
1、生物学专业干细胞 🌸 培养
生物学 🐅 专业干细胞培养 🦅
干 🦋 细胞是具有自 🐘 我更新和分化成多种细胞类型潜力的未分化细胞干细胞。培。养。涉及在受控环境下维持和扩增干细胞生物学专业中的干细胞培养通常用于研究开发和治疗应用
类型有两种主 🌺 要的干 🐺 细 🐝 胞类型：
胚胎干细胞 (ESC)：从早期胚胎中衍生，具有形成所有 🐼 身体细胞的潜能。
成体干细胞 🐅 ：存在于身体组织中，具有更有限 🐳 的分化潜能。
培养方法干细胞培养通常使用专门的培养基，其中包含生长因子、营养，物 🦟 质和抗生素以支持细胞生长细胞培养。在，无。菌条件下进行使用细胞培养箱提供适宜的温度和二氧化碳浓度
培养基的 🐬 组成
典 🌼 型的干细胞 🌲 培养 🌿 基包括：
基础 🦉 培养基（例如 Dulbecco's Modified Eagle's Medium，DMEM）
血清 🦊 （例如 🐧 胎牛血清，FBS）或无血清替代物
生 🌺 长因 🌻 子（例如 bFGF、EGF）
抗生素（例如 🌿 青霉 🐴 素、链霉 🦆 素）
培养技术干细 🌻 胞培养通常涉及 🐺 以 🐋 下技术：
细胞传代：每隔一段时间的传代，将细胞，从原有培养皿 🦄 转移到 🪴 新的培养皿中以保持细胞健康 🐳 和生长。
诱导分化 🐳 ：通过操纵培养条件，干细胞可以诱 🐡 导分化为特 🍀 定的细胞类型。
克隆形成测定：用来评 🐦 估 🐘 干细胞的自我 🌺 更新能力。
应用干细胞培养在生物学专业中广 🐎 泛应用，包括：
基础研究研究：干细胞 🦊 发育、分化和再生。
药物开发：测试药物和治 🐯 疗对干细胞的影响。
再生医 🐱 学：培养干细胞用于组织 ☘ 工 🐈 程和细胞治疗。
干细胞治疗 🦋 ：使用干细胞治疗各 🐅 种疾病，例如帕金森病和阿尔茨海默病 🦢 。
挑战干细胞培养 🦅 面临的挑战包 🐱 括：
维持干细 🌼 胞性：在培养过程中避免干细胞 🐬 分化为 🐧 其他细胞类型。
规模化培养：为临床 🐕 应用大规模扩增干细胞。
免疫排斥：异 🕸 基因干细胞移植中 🐦 免疫系统的排 🕷 斥反应。
2、干细胞与生殖生物学国 🦆 家重 ☘ 点实验室
干细胞与生殖生物学 🐬 国家重点实验室
成立 🦈 背 🦢 景：
成立于1991年，由中 🕊 国科学院和上海市人民政府共同建 🌵 立。
是中国最早最、大的从事干细胞和生殖生物学研究的国家重 🦊 点实验室之 🐵 一。
研究 🐒 领 🐘 域：
干细胞的基础研究，包括干细胞的来源 🌷 、特 🐒 、性调控机制和分化潜能 🕸 。
生殖生物学，包括生殖发育生殖、内分泌 🌷 和生 🐛 殖健康。
主要成 🍀 果：
在干细胞培养、诱导分化和再生医学方面取得 🐅 了突破性进展。
揭示了生殖发育和 🐟 生殖内分泌的分子机制。
开发了 🌵 针对生殖系统疾病的新型诊断和 🌲 治疗方法 🦟 。
设施 🌲 和 🐺 资 ☘ 源：
拥有先进的实验设备 🦢 和技术 🦈 平 🦆 台，包括显微成像、流、式细胞术分子生物学和动物模型。
建立了完善的干细胞资源库和生殖动物 🐧 模型库。
拥有经 💮 验丰富的高素质科研团 🐶 队 🌵 。
国 🌴 际合 🐞 作 🦆 ：
与国内外知名研究机构和高校建立 🦍 了 🐵 广泛的合作关系。
参与国际 🐅 合作 🌵 项目和科学交流活动。
影响力：在国 🐎 际顶级学术期刊发表了大量高水平研究 🐳 论文 ☘ 。
培养了大量优秀人才，为国内干细胞与生 🌷 殖生物学领域的发展做出了重要贡献。
推动了 🪴 干细胞和生殖生物学相关技术在临床应用 🐅 中的转化。
未 🐛 来展望：
继续探索干细胞 🐦 的基础机制和再 💮 生医学 🌹 潜力。
深入研究生殖 🌷 发育和生殖健康的分子基础。
开发新的诊断和治 🌺 疗方法 🦈 ，应 🐦 对生殖系统疾病。
加强国际合作 🦈 和科学交流，促进干细胞 🦟 与生殖生 🕊 物学领域的共同发展。
3、生物 🌹 学专 🐦 业干细胞培养方法
生物学专业干细胞培 🦢 养方法 🦅
材料：无菌 🦍 培养 🌾 箱 🦅
生物 🕊 安全柜 🌸
培养基血清
生长因 🌾 子 💐
细胞培 🐈 养瓶
吸管和 🐎 移液 🌾 枪 🪴
显微镜细胞刮 🦄 刀
步骤：1. 准 🐱 备培养基 🦆 ：
根据培养基配方配制无菌培 🪴 养基，通常包括基础培养 🕊 基、血清和生长因子。
将培养基分装至细胞培养 🦟 瓶中，每瓶约为 🌺 瓶体积的3050%。
2. 贴壁细 🌿 胞 🦅 的传代：
在 🌾 生物安全柜 🦉 内操作。
用无菌吸管吸取培养基 🕷 ，小心冲洗细胞单层 🐋 以去除无粘附细胞。
加入胰蛋白酶溶液，孵育一定 🐝 时间（根据 🌵 细胞类型而异）以消化细胞。
用培养基稀释 🦋 胰蛋白酶，并转移 🐘 细胞悬液 🐬 到新的细胞培养瓶中。
加入新鲜培养基至瓶 🌷 体积的5070%。
3. 悬浮细 🐟 胞 🐴 的传代 🌷 ：
对悬浮细胞，直 🐟 接吸取生长培养基并转移到新的细胞培 🌺 养瓶中 🌿 。
加入新鲜 🌷 培养基 🌺 至瓶体积的3050%。
4. 培 🐟 养 🌵 ：
将细胞培养 🐳 瓶置于37°C、5% CO2 的无菌培养箱中。
定期监测细胞生长情况，在细胞 🕊 接近融合 💐 时传代。
5. 细胞 🐅 计数和 🐛 活力：
使用细胞计数板 🐬 或流式细胞仪计数细胞数量和活力。
活力可以通 🌻 过染色和荧光显微镜观察来评估。
注 🌵 意事 🐡 项 💐 ：
始终在无 🌳 菌环境下操 🐴 作。
使用一次性材料以防止 🦁 污染。
定期 🌷 清洁培养箱和生物安全 🌳 柜。
注意培 💮 养基 🦆 和生长因子 🐕 的储存条件。
优化培养条件（如培养基 🌸 组成、孵育时间）以获得最佳细胞 🐧 生长。
4、生物学专 🐱 业干细胞培养方案
生物学专 🌺 业干细 🌾 胞培养方案
材料生 🦟 物 🐵 安全柜 🐴
无菌 🐠 培养 🐳 基
支 🐋 架（培养 ☘ 皿培养 🐕 、瓶）
培养液干细 🦅 胞株 🐡
传代试剂 🕷
显微镜移液 🐝 枪和吸 🌳 头
无菌 🐦 操作工具（镊子、剪刀）
程序1. 准备工 🕊 作站
打开生物 🦈 安全柜 🍀 ，紫外线消毒 15 分 🐟 钟。
穿戴无菌手套、口罩和实 🦊 验室服。
2. 复苏干细 🕊 胞 🐟
将 🌹 冷冻保存的干细胞株取出，快速 🐘 解冻至 🕊 37°C。
将细胞悬浮液转移至无菌培养液中，轻轻吹 🌴 打混合。
离心 5 分 🌹 钟 🦊 ，1200rpm。
小 🌳 心地吸出上清液，保留细胞沉淀。
3. 培 🦟 养
将细胞沉淀重悬浮于 🐕 新 🌷 鲜培养液中。
按建议密 🐶 度接种细胞 🕸 （取决 🐴 于干细胞株）。
将培养皿或培养瓶 🌺 置于 37°C、5% CO2 的孵 💮 育器中。
培养 23 天，或直至 🐳 细胞变得饱 🐈 满并开始 🐅 增殖。
4. 传 🦁 代 🦢
当细 🌾 胞达到 7080% 的汇合度时，即可 🦊 传代。
吸 🐝 出旧培 🐘 养液，用无菌 PBS 轻轻洗涤细胞。
加 🕊 入适 💐 量传代试剂，将细胞从 🐘 支架上解离下来。
收集细 🦉 胞 ☘ 悬浮 🦟 液，离心 5 分钟，1200rpm。
小心地吸出上清液，保留细胞沉 🦋 淀 🐅 。
重新 🐧 悬浮细胞并按 🐒 照步 🦈 骤 3 培养。
5. 监 ☘ 测和维护
定期检 🐅 查细胞，确保它 🌸 们处于健康状态。
每 23 天更换 🕸 培养液 💐 ，以去除代谢废物和补充营养。
每 57 天传代 🦋 细胞，以保持它们处于对数生长期 🦁 。
6. 冷 🐵 冻 🐈 保 🐠 存
当细胞达到 7080% 的汇 🕊 合度时，可以冷冻保存。
收集细 🦍 胞 🐱 悬浮液并 🐱 离心 5 分钟，1200rpm。
吸出上清液，将细胞沉淀重悬浮 🕊 于冷冻保 🐘 存液中。
以 🦅 每分 🕸 钟 1°C 的 💮 速率将细胞缓慢降温至 80°C。
将细 🪴 胞转移至液 🐡 氮中长期保存。
注意事项始终保持 🌸 无菌环境。
避免过度 🐺 传 🌾 代细胞，因为这会导致细胞老化和变异。
只使 🌳 用经过验证的培养液和试剂。
如果细胞出现污染或 🪴 异常形态，请丢弃培养物并重新开始。
