大 🌻 鼠骨髓分离干细胞（大鼠骨髓分离干细 🦟 胞是什么）
- 作者: 刘星晚
- 来源: 投稿
- 2025-04-23
1、大 🕊 鼠骨髓分离干 🌹 细胞
大 🐶 鼠骨髓 🐘 分离干细胞 🌸
定义大 🐒 鼠骨髓分离干细胞（BMSC）是从大鼠骨髓中分离出的多能干细 🌷 胞群体。它们具有自 🦆 我更新和向脂肪细胞、软骨细胞。和成骨细胞等多种细胞谱系分化的能力
来源BMSC 可从大鼠的股骨、胫骨或髂骨等长骨中分 🐳 离 🌴 。
分离方法1. 抽取骨髓：使用注射器通 🦊 过小孔抽 🍁 取骨髓。
2. 离 🐬 心：将骨髓离心以分离出细胞。
3. 贴壁培养：将细胞 🐴 悬液铺在培养皿上并培养，使贴壁 BMSC 。
4. 换液：定期换 🐧 液以 🪴 去除非贴壁细胞和碎片。
特性自我更新：BMSC 能 🍀 够增 🌸 殖和自我 🦁 更新，同时保持其多分化能力。
多分化能力：它 🌺 们可以分化为多种 🐞 细胞类型，包括脂肪细胞、软骨细 🦈 胞和成骨细胞。
免疫抑制：BMSC 具有免疫抑制特性，可以抑制免 💮 疫反应。
旁分泌：它们通过分泌细 🐼 胞因子和生长因子 🌷 ，对周围环境产生影响。
应用BMSC 在组织 🌷 工程、再生医学和药 🐎 物 🦊 发现中具有广泛的应用，例如：
骨组织工程：用于修复骨缺损或骨质疏松 🐕 症。
软骨组织工程：用于 🐶 治疗软骨损伤或骨关节炎。
脂 🌹 肪组织工程：用于填充组织缺 🦈 损或修复受 🐋 损组织。
药物发现：用于研究疾病机制 🌿 和开发新疗法。
结论大鼠骨髓分离干细胞是具有多能性和免疫抑制特性的有价 🐧 值的干细胞来源。它们在组织 🐋 工程、再。生医学和药物发现中具有广泛的应用前景
2、大鼠骨 🌺 髓分离干细胞是 🌸 什么
大鼠骨髓 🦋 分离干细胞 (BMMSCs) 是从大 💐 鼠骨髓中分离出的多能细胞。
特征：多能性： BMMSCs 具有分化成多种细胞类 🦟 型的潜力，包括成骨细胞、软骨细 🌲 胞和脂 🌾 肪细胞。
自我更新能力： BMMSCs 可 🍁 以自我更 🍁 新和增殖以，维持其数量。
免疫调节特性： BMMSCs 具有免疫调节特性 🐛 ，可以抑制免疫反应。
组织修复潜 🐘 力： BMMSCs 已被证明在组 🦉 织修复和再生中具 🦉 有治疗作用。
来源：BMMSCs 从大鼠股骨或胫骨骨髓中分离骨髓。被冲洗出来，并通过密度梯度离心分离出细胞。BMMSCs 附，着。在培养 🌾 基板上并培养增殖
用途：BMMSCs 已 🐵 被 🦆 广泛用于研究和治疗应用，包括：
骨 🐋 组织工程： BMMSCs 可分化为成骨细胞，用于修复骨缺损和 🐠 骨折。
软骨组织工程： BMMSCs 可分化为软骨细胞，用于治疗骨关节炎和软骨 🐛 损 🦢 伤。
脂 🦁 肪组织工程： BMMSCs 可分化为脂肪细胞，用于 🦢 填充软组织 🐈 缺损和美容外科手术。
免疫调节治疗： BMMSCs 可 🐡 用于治疗自身免疫 🕷 性疾病和移植物抗宿主病 🐝 。
优势：易于从大 🐕 鼠中获取。
多能 🐟 性 🦁 高。
培养 🐎 增 🦅 殖能 🐟 力强。
具有免疫调节特 🐦 性。
已广泛用于研 🌷 究和治疗应 🐕 用。
3、大鼠骨髓分离干细 🐋 胞的原 🌾 理
大鼠骨髓 🐛 分离干细 🌴 胞的原理
骨髓分离干细胞是一种来自骨髓的干细胞，具有自我更新和 🐬 分化为多种细胞类型的潜力分离。大鼠骨髓干细胞的原理如下：
1. 骨 💮 髓采 🦟 集：
从 🌷 大鼠股 🐯 骨或胫骨中 🐬 抽出骨髓。
使用 💮 注射器和针头， aspirate 骨，髓收集到无菌管中。
2. 单核细胞分 🌾 离：
将骨髓稀释在缓冲液中，如磷酸盐缓冲 🐈 液 (PBS)。
通过 🦟 密度梯度 🌸 离心分离单核细胞，这些细胞含有干细胞。
通常 🐞 使用 FicollPaque 等密度梯度 🐺 介质 🕷 。
3. 干 🐦 细 🐦 胞 🦆 富集：
使用抗体标记干细胞表 🦄 面抗原 🦅 ，例如 Sca1 或 cKit。
用磁性或荧光激活细胞分 🐒 选 (FACS) 筛选标记的细胞，富 🐎 集干细胞。
4. 干 🐼 细胞扩增：
将富集的干细胞培养在 💮 合适的培 🐅 养基中，例如 Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM) 或 Iscove's Modified Dulbecco's Medium (IMDM)。
添加生长 🌸 因子，例如白细胞介素 6 (IL6) 和干细胞因子 (SCF)，以 🌴 促进干 🌸 细胞增殖。
5. 干细胞 🍁 鉴定 🐅 ：
通过流式细胞术或免疫组织化学分析鉴定分 🦊 离的细胞。
使用特定的标记 🐞 ，例如 🦉 Sca1、cKit 和 CD45，来确认干细胞。
6. 分 🦍 化潜能 🐈 ：
体外评估分离干 🐒 细 🐈 胞的分化潜能 🌵 。
诱导干细胞向骨细胞、软 🐘 骨细胞或 🌺 脂肪细胞等 🐯 不同细胞类型分化。
通过遵循这些步骤，可以从 🐶 大鼠骨髓中有效分离、富集和扩增干细胞分离。的，干、细胞可。用于各种研究和临床应用例如再生医学组织工程和药物筛选
4、大鼠骨髓间 🐈 充质干细胞 🐅 提取
大鼠骨髓间 💐 充质干细胞提取
材料：雌 🐯 性 🦅 大 🐞 鼠
无菌PBS（磷酸缓 🐞 冲 🐕 液 🍀 ）
培养基 🐳 （如DMEM）
胰蛋白酶 🐬 （0.25%）
FBS（胎 🦊 牛血 🦁 清 🐧 ）
抗生素 🦉 抗真菌剂溶液
离心机细 🐝 胞培养板
移液枪步骤：
1. 动物准 🦁 备：
从 🐡 雌性大鼠处 🌺 收集股骨和 🌷 胫骨。
将骨骼浸泡 🦄 在无 🐳 菌PBS中15分 🐧 钟，去除多余的组织。
2. 骨 🌳 髓 🐟 冲洗 🌿 ：
在无菌操作台上将骨 🌳 骼 🌲 末端切 🐳 开。
使用无 🐅 菌PBS通过骨干冲洗出骨髓 ☘ 。
收集冲洗液并将其过滤通过100微米 🐅 细胞过滤器。
3. 红 🌴 细胞 🌵 裂解：
向收集到的细胞悬液中加 🌹 入等体积的红细胞裂解液。
轻柔地 🐼 混匀 🌼 并 🦆 孵育10分钟。
离心（500 g，5分钟）以沉淀 🐴 细胞。
用PBS洗 🐋 涤沉淀物，然 🦅 后离心。重。复 🐼 此步骤一次
4. 培 🌷 养 🦋 ：
将细胞重悬在培养 🐯 基中 🐶 ，补充10% FBS和抗生 🐧 素抗真菌剂溶液。
将细胞接种 🐎 于细胞培 🪴 养板上（每孔5×10^5个细胞 🍁 ）。
孵育 🐟 于 🐴 37°C、5% CO2的培养 🐵 箱中。
5. 贴壁 🐎 细胞分 🐒 离：
2448小时后，培养基中的非贴壁细胞会漂浮在培养 🌻 液中。
小心吸出培养液，避免打 🐕 扰贴 🌸 壁细胞。
用PBS洗 🐞 涤贴壁细胞 🐝 ，然后向孔中加入新鲜培养基。
6. 培养和扩增 🌹 ：
每23天更换培养 🕸 基。
当细胞达到8090%融合时，使用 🐴 胰蛋白酶（0.25%）消，化细胞然 🌻 后传代。
提示：使 🍁 用无菌技术 🐞 进行所有步骤，以避免污染。
大鼠骨髓间充质干细 🌵 胞通常表现出贴壁生长并呈梭形形 🌸 态。
可以通过流式 🐺 细胞术或免疫组化对分离的干细胞进行表型 🐟 分析。
