肿 🐠 瘤干细胞富集技术（肿瘤干细胞富集技 🌼 术有哪些）

1、肿瘤 🦟 干细胞富集技 🐱 术

肿瘤 🦆 干细胞富集 🐱 技术 🌲

肿瘤干细胞 (CSCs) 是一小部分具有自我更新能力并在肿瘤形成中发挥关键作用的癌症细胞。富集 CSCs 对。于研究其生物学特征和开发针对它们的靶向疗法至关重要以下是一些已建立的肿瘤干细胞富集技 🌹 术：

基于表 🦍 面 🐵 标记 🐦 ：

CD44/CD24：用于富集乳腺癌和结直肠癌 CSCs。CD44+、CD24low/neg 细 CSCs。胞群富 🐕 含

CD133：用于富集神经 🕷 胶质瘤和肝癌 CSCs。CD133+ 细胞是 CSCs 的。一个 🕸 亚群

ALDH1：用于富集多种癌症的 CSCs。ALDH1+ 细。胞具 🦆 有较高的干细胞活性

基 🦆 于 🐵 功能特 🐳 征：

球状克隆形成 (SF)：CSCs 能够形 🕊 成悬浮培养基中的球状克隆形成能。SF 力是一种富集的 CSCs 功能。标志

侧群 (SP)：SP 细胞群是通过其低 Hoechst 染料摄取 🕸 特征富 🌴 集的细胞群富。SP 含多种 🦅 癌症的 CSCs。

基于转 🐶 导物标 🌷 记 🦅 ：

肿瘤异种移 🐒 植：将人类肿瘤细胞移植到免疫缺陷小鼠中会形成肿瘤 🌿 异种移植物异种移 🐦 植物中。的肿瘤细胞可以富集 CSCs。

类器官培养类器官：是包含不同细胞谱 🐱 系的 3D 结构，可以从 🌼 肿瘤组织中培养出来类器官培养可以。保留的 CSCs 干细胞。特性

其 🐬 他 🐘 方 🌾 法：

磁性细胞分选 (MACS)：使用磁性珠 🦋 子靶向 CSCs 的表面标记，从而 🌺 进行富集。

流式细胞术分选：使 🌺 用流式细胞仪根据 CSCs 的特定标记或功能特征进行分 🐒 选。

激光捕获显微切割 (LCM)：使用激光选择性地捕 🍀 获特定细胞群，包括 CSCs。

选择富集技术的考虑因素 🍀 ：

癌症类型：不同的 🌷 癌症类型具有不同的 CSCs 表型 🐈 。

样本类型：肿瘤组织、血液或其他样本类型可 🐧 能需要不同 🌺 的富集 🦁 方法。

研究目的：富集的目的（例如，表征 🌵 、功能分析或治疗）将影响技术的选择 🐦 。

重要的是要注意 🦁 ，没有一种通用的肿瘤干细胞富集技 🦄 术适用于所有癌症类型通 🕷 。过，结合多种技术可以有效地富集和表征以 CSCs，深。入了解其生物学并开发新的治疗策略

2、肿 🌺 瘤干细胞富集技术有哪些 🐦

肿瘤干 🦋 细胞富集技 🌹 术

1. 细胞表 🦆 面 🌺 标记 🍀 物分选

CD133：通常用 🐞 于富集胶质瘤、胰腺 🐶 癌和肺 🦢 癌的肿瘤干细胞。

CD44：存在于许多肿瘤类型中，与恶性程度和转移 🦄 潜能有关。

EpCAM：在结 🐅 直肠癌、乳腺癌和前列腺癌中表达，可以富集肿瘤干细胞亚群。

ALDH1：醛脱 🐅 氢酶酶，在，许多肿瘤类型中表达被用于富集癌干细胞。

2. 侧向群体 🕊 富集

侧向群体 (SP) 细 🐵 胞群通 🦋 过流式细胞术富集，表现出低 Rhodamine 123 摄取能力和高 Hoechst 33342 排出能力。

SP 细胞在许多肿瘤类型中与肿瘤干细胞类 🐠 似，具有自我更新、侵袭性和耐 🐱 药性。

3. 肿 🦍 瘤球 🦍 形成试验 🌴

将 🕷 肿瘤细胞悬液 🐴 接种到培养基中培养，后，形成球 🌸 状聚集体称为肿瘤球。

肿瘤球形成的能力可 🐶 以富集具有干细胞特性的细胞。

4. 体内 🌹 肿 🐈 瘤移 🦊 植

将肿瘤细胞注射到免疫 🦟 缺陷小鼠 🌸 体内，形成肿瘤。

从成瘤 💮 的肿瘤中分离出细胞可以富集具有肿瘤干细胞特 🕷 性的细胞。

5. 免疫 🐶 磁珠分 🦆 选

使用抗体包被的 🐳 磁珠特异性 🌿 结合 🐡 肿瘤干细胞表面标记物。

磁性分离可 💮 以 🕸 富集特定标记物的肿瘤 🐟 干细胞亚群。

6. 微流控 🦉 分 🌹 选 🌷

微流控芯片可以基于大小、形状或其他物理特性对细 🦟 胞进行分 🐬 选。

可以设计芯片来富集具有肿瘤干细胞特征的 🦢 细胞。

7. 干细胞相关基因 🐺 表达谱分选

通过RNA 测序或微阵列分析确定与肿瘤干细 🌺 胞相关的基因表达 🐧 谱。

使用荧光激活细胞分选 (FACS) 或其他方法富集表达特定基因标记 🌷 的细胞。

3、肿瘤 🐘 干细胞富集技术是什么 🪴

肿 🐧 瘤 🕷 干细胞富集技术

肿瘤干细胞富集 🐴 技术是用于从 🪴 异质性肿瘤中分离富含肿瘤干细胞（CSCs）的细胞群的方法。

CSCs 特 🐴 性 🦍

自我 🌷 更新：能够分裂并产生更多 CSC

分 🌳 化：能够 🦁 分化成 💐 多种类型的癌细胞

耐药性：对放射 🐘 和化疗等传 🐘 统治疗方式具有较强 🌲 的耐受性

转移能力能 🐺 ：够引发 🐧 肿瘤的转移 🍁

表面 🦅 标记：使用针对表面 CSC 抗原的抗体，通过流式细胞术进行富 💮 集。例如，CD44、CD133、EpCAM

珠培养：将肿瘤细胞培养在悬浮微珠上，CSCs 通常会 🐟 形成非贴壁的群体。

药物筛选：使用筛选出对选 CSCs 择性有毒的 🐒 药物 🍀 进行富集。例如，索拉非尼、帕博尼 🌳 司他

细胞分选：利用 🦊 CSCs 特定的功能或性质进行细胞分选。例如分选，Aldefluor 基（于醛脱氢酶活性），侧（向人口分析基于 ABC 转）运蛋 🦍 白活性

小鼠异种移植模型：将肿瘤 🐎 细胞注 🪴 射到小鼠体内，然后从形成的肿瘤中分离出 CSCs。

富集技术 ☘ 的 🐎 应用

研究 CSC 的生物 🐞 学特性 🌴

开 🦆 发 🐎 针对 CSCs 的靶向 🐛 治疗策略

提高 🐬 癌症治疗的效 🐝 果 🐶

监测癌症治 🐬 疗后 CSCs 残留情 🐞 况 🐘

4、肿 🦅 瘤干细胞富集技术原理

肿瘤干细胞富集 🍀 技术原 🌲 理

肿瘤干细胞（CSC）是一类具有自我更新和多向分化能力的细胞，在肿瘤的发生、进展和耐药中发挥关键作用。富CSC集和分、离。对于研究其特 🐝 性开发 🐈 靶向治疗策 🐝 略至关重要

1. 表 🦁 面标 🪴 记 🐋

CD133： CD133是CSC的经典表面标记。在多种肿瘤类型中，CD133阳。性细胞显 🐎 示出更高的肿瘤发生能力和耐药性

CD44： CD44是一 🐦 种细胞黏附分子，在CSC中表达升高。CD44阳。性细胞具 🐟 有侵 🐋 袭性和转移能力

其 🐡 他标记其他 🌷 ： 表CSC面标记包括ALDH1、OCT4和 🐝 SOX2。

2. 侧 🐦 向散射

侧向散射（SSC）测量细胞大小和内部复杂性。CSC通SSC常具有 🌳 较高的值，这反映了它们的细胞核较大、结。构更复杂

3. 培 🐱 养特性 🐕

CSC具有自我更新能力，可形成类癌球。培养时可，CSC以形成不粘附 🦉 的、富。含半固体的球状聚集物

ALDEFLUOR筛选： ALDEFLUOR是一种底物，当被ALDH1分解时会释放荧光。使 🦆 ALDEFLUOR用筛选ALDH1可以识别阳性CSC，具 🪴 。有更高 🌵 的肿瘤发生潜力

4. 流式 🦅 细 🐺 胞术 🐠

流式细胞术是一种细胞分选技术，可根据表面标记 🌻 或其他参数对细胞进行分类。使，用特定的 🐯 抗体和荧光标记可 🦁 以对进行CSC免。疫表型分析和分选

5. 磁性激 🌾 活细胞分 🌷 选 🦄 （MACS）

MACS使 🐛 用磁珠标记靶细胞，然后通过磁场进行分选标记。的磁珠CSC可，以与靶细胞上的表面标 🍀 记 🌴 或抗体结合从而富集CSC。

6. 微流 🦟 控技术

微流控设备可以根据物理或化学特征对细胞进行分选。使用微流控技术可以，基于大小、密度 🐒 或其他参数富集CSC。

选 🦉 择性 💮 富集方法

除了基于表面标记和培养 🦈 特性的标准 🐈 技术外，还开发了一些选择性富集的CSC方法：

APOBEC3B抑制剂： APOBEC3B是一种限制性因子抑制，逆 🌾 转录病毒感染抑制。可APOBEC3B选择性富集人 ☘ 急性髓细胞白血病（AML）CSC。

靶向异质寡糖： CSC表面表达独特的寡糖模式靶向。这。些 🌾 寡糖可以使用碳水化合物结合剂或抗体进行选择性富集

靶向代谢途径： CSC具 🌾 有独特的代谢途径。通过靶向关键代谢酶，可CSC以。选择性富集特定的亚群