胚胎干细胞分离和培养图（胚胎干细胞培养属于胚胎工程 🐦 吗）
- 作者: 陈锦烁
- 来源: 投稿
- 2025-06-20
1、胚胎干细胞 🦋 分离和培养图
胚胎干 🐡 细胞分离和培养图
步骤 1：胚胎收 🐛 集
从捐赠者 🍁 的卵子和精子中 🐟 受精形 🦄 成的胚胎。
步骤 2：内 🕊 细 🦄 胞 🌸 团分离
胚胎发育到桑葚胚期（大 🪴 约 5 天），内 🐼 细胞团从滋养层中分离出来 🐦 。
步骤 3：胚胎 🐠 干细胞分离
内细胞团形成胚胎干细胞 🐬 （ESCs）。
步骤 🕷 4：培养 🐧
ESCs 在富含生长因子的培养 💮 基中培养，允许它们自我更新和增 🌾 殖。
培 🐵 养 🐕 基成分：
无血清 🦆 培 🐘 养 🌲 基（例如 Dulbecco's Modified Eagle's Medium/Nutrient Mixture F12）
胚胎 🐘 干细胞因子（例如白 🐵 细 🐒 胞介素白细胞介素 6、 15）
抑制剂 🐱 （例如 PD，防止 ESCs 分化）
培养 🌸 条 🌺 件 🦆 ：
37°C，5% CO2，95% 湿 🐠 度 🐵
细胞贴壁 🐦 ：
ESCs 通常培养在涂有基质 🌸 胶或其他基质的培养皿上，以促进细胞贴壁。
传代：ESCs 定期传代，以保持它 🦅 们的活力和增 🐟 殖能力。
应用：研 🐡 究胚胎发育和 🐺 分化
再生医 🐘 学和 💮 细胞 🌿 治疗
药物发现 🐳 和疾病建模
2、胚胎干细 🌿 胞培养 🌳 属于胚胎工程吗
3、胚 🌵 胎干细胞培养需要的条件
培养 🌺 胚胎 🐕 干细胞所需的条件：
1. 无血清 🌲 培养基：
含特定 🐶 的生长 🦁 因子 ☘ ，如：FGF2、EGF、TGFβ、IGF1
无血 💮 清或含 🐕 低浓度的血 🐛 清促进干细胞增殖，防止分化
2. 培 🕸 养基添加物 🐝 ：
无血 🕸 清蛋白替代物：如：B27、N2、NSC211，提供无血清条件下必需的营养物质
生 🌾 长因子 🍀 ：调节细胞生长、增殖 🐞 和分化
抑制 🐼 剂：如抑制剂：ROCK或MEKi，防止分 🦟 化并维持干细胞特 🌷 性
3. 培养基成 🐼 分 🦋 ：
基础 🕊 培养 🐬 基：含必需氨基酸、维生素和矿物质（如：DMEM/F12、DMEM）
补充 🦁 剂：如：谷氨酰胺、丙 💐 酮酸，支持细胞代谢 ☘
4. 培 🐝 养基更新：
每12天 🍀 更换培养基，清除代谢废 🌳 物和补 🌹 充必需营养物质
5. 培养基 🐎 pH值：
7.27.4的 🐡 生 🍀 理pH值
6. 培 🌴 养 🌲 温度 🦉 ：
37℃7. 培 🐛 养气 🐺 氛 🕸 ：
5% CO2和95%的空气 🐒 ，提供 🐕 适合干细胞生长 🐵 的环境
8. 基 🐡 质 🌼 ：
聚 🐞 L鸟氨酸、层粘连蛋白或Matrigel等基质，提供粘附基底 🐘 并支持干细胞生 🐠 长
9. 无 🍀 污染条 🐝 件 🌹 ：
使用无菌技术，定期检查是否有微 🦈 生物污染
10. 定期 🌾 传代 🐝 ：
每57天传代细胞，防止过度生长和保持干细胞特性 🌼
4、胚胎干细胞分离培养 🦋 过程
胚胎干细胞分离培养 🍁 过程 💮
1. 胚 🐛 胎 🐯 获取：
通过体外受精（IVF）或（胚胎移植技术获取早期胚胎通常为 🌻 囊胚期）。
2. 胚胎内细胞团 🦁 分离：
使用激光或显 🐒 微手术，从囊胚 🦆 中 🌺 分离出胚胎内细胞团（ICM）。
3. 酶 🦁 消 🌳 化 🕷 ：
将 ICM 用胰蛋白酶或其他酶消化将其，分 🕸 解成单个细胞。
4. 悬 🐎 浮 ☘ 培 🌵 养：
将分离出的细胞悬浮在 🌹 富含营养物质和生长 🐕 因子的培养基 🐈 中。
5. 培养 🦉 基 🐟 制备 🌾 ：
培 🪴 养基通 ☘ 常包 🦋 含：
无血 🦍 清 🐡 培养基（如 🦢 DMEM/F12）
生长因子（如 bFGF 或 🐒 EGF）
抗生 ☘ 素和 🦁 抗真菌 🦆 药
6. 培 🐘 养 🐱 系 🐳 统：
细胞可以在以下系统中培 🌳 养：
悬 💐 浮培养（利用生物反应器或培养摇瓶）
贴壁培养（在带有基质 🐵 的 🐘 培养皿或培养瓶中）
7. 传 🐡 代 🌾 ：
当细胞生长并聚集时，通过胰蛋白酶消 🐠 化 🦄 将它们传代到新鲜的培养基 🐛 中。
8. 质 🐈 量控制 🐛 ：
定期监测细 🕷 胞的生长、分化和遗传稳定性。
9. 保 🌴 存：
为了长期保存，胚胎 🦍 干细胞可以在液氮中冷冻。
注 🐧 意 🦊 事 🦈 项：
胚胎干 🐵 细胞的分离和培养是一个高度技术性的 🐝 过程，需要专业知识和 🦋 设备。
胚胎干细胞具有形成畸胎瘤的潜能，因此必须在严格受控 🦈 的条件下进行培养。
由于其道德影响，胚 🐒 胎干 🦅 细胞的研究受到严格监管。
