hippo通路,干细胞(hippo通路,干细胞 🐎 )
- 作者: 刘若安
- 来源: 投稿
- 2025-08-03
1、hippo通路,干细 💐 胞
河马 🦅 通路对干细胞的调节
河马通路是一 🐱 种重要的信号通路,在控制干细胞的增殖、存活和分化中发挥着关键作用。它是由和Wnt、βcatenin、LEF/TCF 等一 YAP/TAZ 组。蛋白组成的
Wnt信 🦢 号 🌿
Wnt 配 🐴 体 🌼 与受体Fz和LRP5结合,激活河马通 🌼 路。
激活河 🐝 马通路阻 🌵 止βcatenin的降 🦄 解,导致其在细胞质中积累。
βcatenin
βcatenin 进入细胞 🌵 核,与LEF/TCF 转录因子结 🌿 合。
LEF/TCFβcatenin复合物激 ☘ 活靶基 🌴 因的转录,这些靶基因涉及干细胞的增殖、存活和分化。
YAP/TAZ
YAP/TAZ是河马通路的效应 🐴 因子,其活 🐝 性 🌿 受机械应力和剪切力的调节。
YAP/TAZ在细胞核中与TEAD转录因子结合,调节干 🌼 细胞增殖和分化相关基因的转 🌷 录。
河 🕷 马通路对干细胞 🐘 的调节
河马通路通过以下方式调节干细 🦆 胞:
增殖:河马通路促进干细胞的增殖通,过激活细胞 🌲 周期蛋白和抑制细胞周 🌷 期抑制剂。
存活:河马 🐞 通路通过抑制凋亡和激活抗凋亡途径来促 🌲 进干细胞的存活。
分化:河马通路调节干细胞向特定细胞类型分化 🦊 的平衡。不同Wnt信。号和河马通路效应因子可以引导干细 🕊 胞向 🌻 不同的谱系分化
干 🐴 细胞再 🦈 生中的河马通 🪴 路
河马通 🌳 路在干细胞再生中至关重要。它在组织损伤后的再生、胚。胎发育和干细胞疗法中 🐝 发挥作 🐋 用
通过调节河马通路,可,以 🐝 操纵干细胞的行为从而有可能 🐺 用于治疗各种疾病和损伤。
2、hippo通路,干 🪴 细胞
Hippo 通 💮 路和 🐯 干细胞
Hippo 通路是一个保守的信号通路,在组织生长、器官发育和干细胞自我更新中发挥关键作 🐅 用。它,参、与。多种细胞过程包括细胞增殖凋亡和分化
Hippo 通 🌿 路 🌳
Hippo 通路由一系列激酶 🐕 和 🐳 调节蛋 🌴 白组成,包括:
STK4/STK3(LATS 激酶 🐕 ): Hippo 通路的 ☘ 核心激酶,负责通路 🦆 下游效应。
MOB1: LATS 激酶的调节底物,放大 🐈 信号并介导下游靶点。
SAV1/WW45: LATS 激酶的抑制剂抑制,通路活性 🐡 。
YAP/TAZ: Hippo 通路的转录共激活因 🐡 子,促进细 🐯 胞增 🌿 殖和抗凋亡基因的表达。
Hippo 通 🦍 路 💐 与干细 🐕 胞
Hippo 通路在干细 🐡 胞的自我更新和 🐱 分化中起着至关重要的作用。
自我更 🐧 新: Hippo 通路通过抑制 YAP/TAZ 的活 🐦 性来抑制干细胞分化,从而维持干细胞的自 🌹 我更新。
分化: 当 Hippo 通路被激活时,它会抑制 YAP/TAZ,促 🦈 进干细胞分化成特定谱系的 🌹 细胞。
Hippo 通路在干细 🐴 胞 🐒 中的 🕷 失调
Hippo 通路的 🐧 失调与 🌳 干 🕊 细胞相关疾病有关,包括:
癌症: Hippo 通路失活会导致 YAP/TAZ 过度激活,从,而促进细胞增殖和抑制凋亡导致癌 🐺 症的发生。
再生不良性贫血: Hippo 通 🐈 路过度激活会导致造血干细胞分化缺陷导致再生不良性贫血,。
组织纤维化: Hippo 通路失活会导致 YAP/TAZ 过度激活,从,而促进细胞增殖和胶原沉积导致 🌾 组织纤维化。
靶 🐶 向 Hippo 通路的新疗法
由于 Hippo 通路在干细胞和癌症中的作用,靶 Hippo 向通路的治疗 🕷 策略正在被探 🐵 索用于治疗各种疾病。这些策略包括:
直接 🐯 抑制 YAP/TAZ: 使用小 🐦 分子抑制剂或 🌹 siRNA 阻断 YAP/TAZ 的活性。
间接激活 Hippo 通路: 使 Hippo 用小分子激活剂或基因治 🌵 疗激活通路,从而抑制 YAP/TAZ 的活性。
.jpg)
3、干 🐡 细胞sop流 🦉 程
干细胞标准操 💮 作程序 (SOP)
目的此 SOP 旨在提供安全、一、致和有效 🐘 的干细胞处理培养和表 🐠 征程序。
范围此 🦆 SOP 适用于所有涉及干细胞操作的人员,包括研究人员、技 🦍 术人员和 ☘ 学生。
定义干细胞:具有自我更新 🦄 和分化成为多种细胞类型的能力的多能或多 💮 能细胞。
培养 🦈 基:为干细胞提供营 🐞 养和生长的培养 🌸 液。
细胞培养室:专 💮 门用于培养细胞的受控环境区域 🦉 。
程序干细胞 ☘ 处 🦁 理
1. 在无菌工作台内 🕸 进行所有操作 🐘 。
2. 使用无 🐵 菌移液 🐼 管和培养皿。
3. 将干细胞 🐳 悬液均匀混匀。
4. 计算必需 🦅 的 🦋 细 🐯 胞数量并稀释到所需浓度。
5. 将细胞接种到适当的培养容器中 🦍 ,例如细胞培 🦟 养 🍀 瓶或培养皿。
干 🌲 细胞培养 🦄
1. 将细胞 🐺 培养瓶或培养皿置于 37°C、5% CO2 的培养箱 🐴 中。
2. 每隔 12 天更换培养基以 💮 补充营养和去除废物。
3. 当细 🐺 胞达到 8090% 的汇 🌻 合 💐 度时进行传代。
4. 对于悬浮细胞 🌻 ,每隔 12 天离心细胞并用新鲜 🦢 培养基重悬。
干细胞传代 🕸
1. 从培养 🕷 箱中取出细胞 🦁 培养瓶或培养 🐘 皿。
2. 吸 🌵 出培 🦄 养基。
3. 用胰酶溶液(例如胰蛋白酶、Accutase 或 TrypLE)处理 🐺 细胞以使 🐒 其从培养基底脱离。
4. 失活胰酶 🌿 并用培养 🐠 基重 🦈 悬细胞。
5. 将细胞 🐯 接种到 🌵 新的培养容器中以 🐛 扩增。
干细胞表征 🐱
1. 流式细胞术:用 🦟 于鉴定特定细胞表面标记 💮 并评 💐 估细胞表型。
2. 免疫荧光 🐡 :用 🐯 于检测细胞内蛋白 🐦 质的表达和定位。
3. qRTPCR:用于评估 🐠 基因 🐧 表 🌴 达水平。
质量控制1. 定期监测细胞活力和生长率 🦁 。
2. 检查培养物是否 🌷 存在污染(例如细菌或真菌 🐠 )。
3. 记录所 🐕 有实验 🦢 结果并存 🐎 档数据。
安全注 🌷 意事项
1. 始终佩戴适当的个人防护 💮 装 🌲 备(例如手套、口罩和实验服)。
2. 谨 🐝 慎 🌹 处理生物危 🌷 害材料。
3. 使用尖锐 🕷 物品时要小心。
4. 遵守机构的安全准则和生物安全等级 (BSL) 要求 🌴 。
责任1. 研 🐘 究人员负责监督干细胞操 🐦 作。
2. 技 🐞 术人员负 🍁 责执 🐬 行 SOP 中的程序。
3. 所有 🌿 人员负责遵守安全注意事项。
记录1. 保留 🐅 细胞培 💐 养、传代和表征的所有记录。
2. 记录用于细胞操作的所有试 🐱 剂和材料。
修订此 🌵 SOP 将根据需要进行定期审查和 🐈 修改。
4、干细胞通道导入 🐶
干 🐡 细胞通道导入
干细胞通道导入是一种将干细胞诱导 🌸 到特定组织或器官的过程 🦍 ,以治疗疾病或损伤。
原理:干细胞具有自我更新和分化成不 🦁 同细胞 🌼 类型 🐞 的能力。
通过特定信号 🐶 传导途 🌵 径,可以将干细胞诱导到特定的分化谱系。
将干细胞注入目标 🍀 组 🌸 织后,它 🐈 们会整合并发挥治疗作用。
应用:干细胞通道导入已被用 🌵 于治疗各 🐎 种疾病,包括:
心血管疾病:重建受 🌼 损 🌴 的心肌
神经系统疾病:再 🐘 生神经元和胶质细胞
骨骼 🐠 肌肉疾病:修复 🌳 受损的肌肉组织 🌷
糖尿病:产生胰 🐺 岛素生 🐼 成 🐎 细胞
肝脏 🐈 疾病:再生肝细胞
方法:干细胞通道 🐈 导入通常 🕸 涉及以下步骤:
1. 获取干 🌿 细胞:通 🦆 常从患者自体自(身)组织或胚胎中获取。
2. 诱导分化:在体外 🦉 将干细胞诱导成所需 🌵 的分化谱系。
3. 移植干细胞:将诱导后的 🐦 干 🌷 细 🦍 胞注入目标组织。
4. 促进整合:使用生长因子或其他策 🦍 略促进干细 🐶 胞与宿主组织的整合。
优点:使用 🐬 患者自身的细胞 🐧 进行治疗 🐎 ,减少了排斥风险。
具 🐘 有潜在 🐞 的再生受损组织并改善功能的能力 🐞 。
可以用于 🦢 治疗目前无 🌾 法用药物或手术治愈的疾病 🐬 。
缺点:诱导干细胞 🦅 分化的过程可能复杂且耗时。
存在安全风险,例 🍁 如肿瘤形成或免疫反应。
治疗的长期有 🐟 效 🦆 性仍 🍀 有待确定。
研究 🐺 方 🐼 向 🐶 :
干细胞通道导入领域正在不断 🦢 发展,研究人 🐳 员 💮 正在探索:
提高干细胞诱导效率 🐈 的方法
改善 🦄 干细胞整合和治疗效果的 🦅 策略
解决安全问题 🌻 的措施
开发 🐈 新 🦁 的治疗应用