间充质干细胞的分离鉴定（间充质干 🌺 细胞表型鉴定标准）
- 作者: 胡艺澄
- 来源: 投稿
- 2025-07-27
1、间充 🌴 质干 🌺 细胞的分离鉴定
间充质干细 🦈 胞的分 🍁 离鉴定
分离组织提取：从脂肪组织、骨、髓、脐带胎盘等组 🐎 织中提取。
酶消化：使用 🌲 胶 🕷 原酶和其他酶将组织解离成单个细胞。
密度梯度离心：分离间充 🌸 质干细胞，它们通 🐈 常沉降在较低 🦄 的密度梯度层中。
贴壁培养：将细胞悬液接种到培养皿中 🐦 ，间充质干细胞会贴附在表面上。
洗 🐴 涤和收集：去除未贴附的细胞收集贴附的 🐕 ，间充质干细胞。
鉴定形态学：间充 🦍 质 🦈 干细胞为纺锤形或多极性，具有大的细胞核细胞质 🐟 比。
表面标记 🐧 ：
阳性 🕷 标 🐴 记 🐳 ：CD73、CD90、CD105
阴 🦋 性 🐺 标 🦍 记：CD34、CD45、HLADR
三系分化潜 🐛 能 🌾 ：间充质干细胞能够分化为骨细胞、软骨细胞和 🦅 脂肪细胞。
免 🦟 疫抑制抑制：细 T 胞增殖 🐕 ，表现 🐵 出免疫抑制作用。
多能性 💮 ：在特定条件下，一，些间充质干细胞可以分化为不同的组织类型如 🦆 神经细胞和心肌细胞。
分 🐝 子标记 🕸 ：
转录 🦍 因子 🐱 ：Oct4、Nanog、Sox2
微小 🌼 RNA：miR21、miR145
质量控制增 🌾 殖 🌼 能力 🦋 ：细胞倍增时间和群体倍增潜力的评估。
分化能力：对 💐 骨细胞、软骨细胞和脂肪细胞分化的诱导和表征。
免疫 🌹 特性免疫：抑制能力的评估 🐎 。
基因组稳定性 🐞 ：染色体核型分析和基因表达谱分析。
无菌性：细 🐵 菌、酵母和真菌污染的检测。
2、间充质干细胞表型鉴定标 🐺 准
间 🍀 充质干细胞（MSCs）表 🌺 型鉴定标准
国际细胞治疗与再生 🕸 协 🐴 会 (ISCT) 制定的 MSC 表型鉴定标准如下：
1. 贴 🐞 壁生 🐘 长 🌾
MSCs 在体外培养中 🐎 贴附 🦋 于组织培养器皿上形成梭形 🐘 细胞。
2. 三 🌾 系 🌲 分化潜能 🌹
MSCs 具有 🕊 向骨、软骨和脂肪细胞三系分化的 🍁 潜力。
3. 免疫 🐠 表 🌸 型
阳性 🦋 标记 🐦 : CD73、CD90、CD105
阴性标记: CD14、CD20、CD34、CD45、CD79α、HLADR（在未经刺 🌹 激的情况下）
4. 细胞表面抗原表达 🦆 谱
其 🐠 他常 🕊 用的阳性标记：CD271、CD166、CD44、CD106、CD146
其 🦆 他常用的阴性标记：CD11b、CD19、CD31、CD56、CD133
5. 细 🌻 胞因子产 🐡 生
MSCs 分泌有利于组织再生和 🦋 免疫调节的细胞因子，如 🌳 ：
血管内皮生 🌾 长 🌹 因子 🌹 (VEGF)
胰岛素 🍁 样生长 🐳 因子 🐵 1 (IGF1)
肝细 🦅 胞生长因 🐘 子 (HGF)
白 🌵 介 🐴 素 🌼 6 (IL6)
前列腺素 🐛 E2 (PGE2)
6. 体内 🐵 免 🐋 疫调 🐟 节作用
MSCs 具有免疫抑制特性，可调节免 🦉 疫反应并促进组织修复。
7. 其他 🦊 特 🐋 征 🍁
MSCs 表达干细胞相关基因，如 Oct4、Sox2 和 🐵 Nanog。
MSCs 具有自我更新能力，可在体外长时间培养而 🐦 保 🦢 持其表 🐟 型和分化潜能。
注释：这些标准是动 🌿 态的，随着研究的进展不断更新。
并非所有 MSCs 都符合所有标准 🐵 ，具体特征可能因来源、培养条件和其 💐 他因素而异。
ISCT 建议使 🐠 用至少 2 个 2 阳性标记和个阴性标记进行表型鉴定，并 🌲 结合其 🕊 他测试（如三系分化潜能）以全面描述表型 MSCs 。
3、间充质干细胞鉴定三个标 🐬 准
间 🦍 充质 🐺 干细胞鉴定三 🌵 个标准：
1. 粘附特性： 在体外培养时，间，充质干细胞应能贴壁生长形成纺锤 💮 形或星形细胞。
2. 三系分化潜能： 间充质干细胞具有向三个胚层（外胚层、中胚层和内胚层分化）的潜能，包、括、形、成、软、骨 🦍 骨脂肪肌肉神经肝脏等多种类型的细胞。
3. 表面标记： 间充质 🍁 干细胞表达特定的 🌷 表面抗原 🌷 ，如 CD73、CD90 和 CD105，但不表达造血干细胞抗原和 (CD34、CD45) 内皮细胞抗原 (CD31)。
4、间充质干细胞 🐵 从哪里提取
间充质干细胞可以从多种来源提取 🐦 ，包 🌻 括：
脂肪组织脂肪 🦆 （来源间充 🌷 质干细胞，ADSCs）：从脂肪组织中提取。
骨髓骨髓（来源间充质 🌵 干细胞，BMMSCs）：从骨髓 🌲 中 🐕 提取。
脐带脐带（来源间充 🐎 质干细胞，UCMSCs）：从脐带中 🐡 提取。
胎盘胎盘（来源间 🐠 充质干细胞，PMSCs）：从胎盘中提取。
其 💮 他来源 🐬 ：包括羊水、软、骨皮肤和 🐡 牙髓。
